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191.
目的研究两种RGD模拟肽(NB05和NB06)的抗兔血小板聚集活性.方法体外检测RGD肽抑制家兔ADP诱导血小板聚集率,计算RGD肽对血小板聚集的抑制率.体内颈动静脉旁路血栓模型检测两种RGD肽对形成血栓湿重的影响.结果NB05和NB06体外抗家兔血小板聚集的IC50值分别为(33.34±3.58)和(8.69±1.34)μmol·L-1;NB05和NB06均使血栓湿重显著减小(P<0.01),NB06的抗血栓活性较NB05高(P<0.05).结论NB05和NB06均具有较强的抗血小板聚集和抗血栓形成活性. 相似文献
192.
目的本研究拟通过干扰新的叶酸相关代谢-核苷三磷酸还原成相应的脱氧核苷三磷酸通路中的关键酶-核苷酸还原酶,诱导构建神经管畸形(NTDs)小鼠模型,并且与前期构建的NTDs小鼠模型进行比较。方法实验小鼠选用C57BL/6J小鼠,购自北京华阜康公司,雌鼠60只,雄鼠30只,小鼠年龄7~8周,体重18~20 g,常规饲养于SPF级动物房。小鼠饲养一周后,晚上18∶00按照雄雌(1∶2)进行合拢,早上分笼将有阴栓的小鼠标记为孕0.5 d(E 0.5)。按照随机分组的方法将小鼠分为6组。其中实验组5组,在神经管闭合前的孕7.5 d(E 7.5),给予5种剂量的羟基脲进行腹腔注射;正常对照组,采用0.9%的氯化钠水溶液注射。采用不同剂量的羟基脲(HU)腹腔注射C57BL/6J孕鼠,诱导构建最佳小鼠NTDs模型,筛选出HU的最佳造模剂量为NTDs组。利用Western blot方法和免疫组化方法观察神经上皮细胞增殖和凋亡的情况,与前期诱导的NTDs小鼠模型中的结果进行对比。结果HU可诱导出NTDs的小鼠模型,免疫组化检测结果显示,畸形胚胎中的PCNA的阳性细胞低于正常胚胎组;Caspase3的阳性细胞高于正常组(P<0.05)。PCNA蛋白在NTDs组中的表达水平明显低于正常对照组(P<0.05),Cleaved Caspase-3蛋白在NTDs组中的表达水平明显高于正常对照组(P<0.05),并且与前期诱导模型的结果一致。结论本研究通过干扰核苷酸还原酶,引起了神经管发育过程中细胞增殖和凋亡的失衡,从而诱导构建出NTDs小鼠模型,为进一步研究NTDs的机制提供了新的动物模型。 相似文献
193.
缺血再灌注大鼠肝组织细胞核NF-κB提取 总被引:3,自引:1,他引:2
应用液氮快速冷冻组织破碎技术,将缺血再灌注大鼠肝组织破碎,去除组织细胞碎片。应用高盐溶液提取法、高速离心法分离纯化大鼠肝细胞核蛋白。提取物经凝胶滞留电池分析其NF-κB成分,结果满意。该方法的建立,为进一步研究核转录因子活性及其调控基因的表达提供了基础。 相似文献
194.
目的 观察经过转录前加工、修饰后克隆至表达载体pBV220中的人肝细胞生长因子α链cDNA在肠杆菌的表达情况,优化表达条件,以建立hHGFα原核高效表达体系,并进一步研究hHGF-α蛋白的生物学功能。方法与结果 将重组表达质粒pBV220-hHGF-α转化大肠杆菌DH5a、Plyss,通过升温诱导法,即将温度由30℃升高到42℃,诱导外源基因表达。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测hHGF-α蛋白表达,电泳图谱显示一特异的分子量与单体hHGF-α链吻合的蛋白带。SDS-PAGE光密度扫描对外源基因表达产物进行初步产量,表达产物分别占细菌可溶性蛋白总量的25%、30%。进一步行West-ern-blot对表达产物进行定性,外源基因表达蛋白与特异的hHGF-α抗体呈阳性反应。结论 成功地建立了hHGF-α链原核高效表达工程菌系。 相似文献
195.
重组γ干扰素的表达与纯化 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 探讨γ干扰素在大肠杆菌中的表达及纯化方法,为下一步批量生产提供实验依据。方法 应用DNA重组技术把中国人淋巴细胞mRNA反转录产物IFN-γcDNA克隆到析核表达质料pBV220上,构建出pBVIFN高效表达载体,转化大肠杆菌plyss。通过温度诱导,高效表达IFN-γ cDNA。然后,经过包涵体溶解、复性、浓缩及DEAE离子交换层析,使γ干扰素纯化。结果 IFN-γ cDNA表达水平占菌体 相似文献
196.
SiRNA对大鼠钙调神经磷酸酶活性及VSMCs增殖的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:观察神经肽Y(NPY)刺激的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖中钙调神经磷酸酶(CaN)活性和c-fos表达水平的变化,以及RNA干扰抑制CaN活性的作用.方法:采用组织贴块法体外原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞;NPY刺激培养的大鼠VSMCs增殖;RNA干扰特异性抑制CaN的活性及其mRNA的表达,阻断NPY刺激的大鼠VSMCs中CaN依赖的信号转导通路,观察对CaN活性、细胞增殖、核内原癌基因c-fos表达水平的变化.结果:NPY可增加VSMCs的CaN活性,加快细胞增殖及增加核内c-fos表达水平.RNA干扰抑制CaN活性后,明显降低NPY刺激的VSMCs增殖及核内c-fos表达水平.结论:CaN参与了NPY刺激的VSMCs增殖,RNA干扰通过抑制CaN的活性可阻断NPY诱导的VSMCs增殖作用. 相似文献