nm23-H1基因调控人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的PKA活性和体外增殖侵袭力的实验研究

目的探讨nm23-H1基因转染对人高转移大细胞肺癌L9981细胞株PKA活性变化和细胞增殖和体外侵袭力影响。方法应用放免法检测人高转移大细胞肺癌原代细胞株L9981,转基因细胞株L9981-nm23-H1和空载体转染细胞株L9981-pLXSN的PKA的活性,应用MTT法检测L9981,L9981-nm23-H1和L9981-pLXSN细胞株的体外增殖,改良的Boyden小实法检测L9981,L9981-pLXSN,L9981-nm23-H1这3个细胞株细胞体外侵袭力。结果(1)原代细胞株L9981的PKA活性为0.408±0.048(pmol/min/μg),空载体转染细胞株L9981-pLXSN的PKA活性为0.476±0.05(7pmolmin/μg),转基因细胞株L9981-nm23-H1的PKA活性为1.939±0.06(2pmol/min/μg),经F检验,在3种细胞株中PKA活性有显著性差异(P<0.001)两两比较,L9981-nm23-H1的PKA的活性明显高于L9981和L9981-pLXSN细胞株(P<0.001),而L9981和L9981-pLXSN细胞株之间所显示PKA的活性并无统计学差异(P>0.05);(2)L9981细胞株的OD值为1.532±0.893,L9981-pXSN细胞株的OD值为1.435±0.542,L9981-nm23-H1细胞株的OD值为0.456±0.081,经F检验,L9981、L9981-pLXSN和L9981-nm23-H1增殖力有非常显著性差异(P<0.001),两两比较,L9981-nm23-H1细胞增殖力显著低于L9981和L9981-pLXSN细胞株(P<0.001),而L9981和L9981-pLXSN细胞株之间比较无显著性差异(P=0.121<0.05);(3)L9981细胞株穿越ECM胶的细胞数为151.75±3.304,L9981-pLXSN细胞株穿越ECM胶的细胞数为158.75±2.986,L9981-nm23-H1细胞株穿越ECM胶的细胞数为43.5±2.082,经F检验3个细胞株间的体外侵袭力有显著性差异,两两比较,L9981-nm23-H1细胞株体外侵袭力明显低于L9981和L9981-pLXSN细胞株(P<0.001),而L9981和L9981-pLXSN细胞株间比较无显著性差异(P=0.271<0.05)。结论nm23-H1基因可以显著抑制人高转移大细胞肺癌的体外增殖力和侵袭力,显著上调人高转移大细胞肺癌细胞株的PKA活性信号。     

99mTc-P53和99mTc-N(NOEt)2在肺部包块显像方面的应用研究

目的:研究99mTc-P53和99mTc-N(NOEt)2显像对肺癌的诊断及鉴别诊断方面的临床价值.方法:用99mTc-P53和99mTc-N(NOEt)2分别对44例有病理诊断的肺部包块的病人进行SPECT显像.结果:肺癌99mTc-N(NOEt)2的早晚期T/N比值差异有显著性.以晚期±s为判断良恶性的标准,99mTc-P53诊断的敏感性、特异性及准确性分别为91%,55%和81%,而99mTc-N(NOEt)2诊断的敏感性、特异性及准确性分别为88%,64%和81%.肺炎性假瘤对99mTc-P53和99mTc-N(NOEt)2都有比较高的摄取,二者比较无统计学意义.断层显像要优于平面显像(P<0.05).肺癌的大小不是决定肺99mTc-P53和99mTc-N(NOEt)2是否被浓聚的必然因素.在肺癌显像方面,99mTc-P53和99mTc-N(NOEt)2SPECT无显著性差异(P>0.05),二者与肺癌的不同TNM分期也无显著性差异.结论:99mTc-P53和99mTc-N(NOEt)2对肺癌的显像有着良好的敏感性,但都相对缺乏特异性,对其在肺癌的诊断及鉴别诊断方面可进行进一步的研究.     

转染nm23-H1基因靶向阻断人大细胞肺癌细胞株L9981Wnt信号传导通路

目的探讨nm23-H1基因转染靶向阻断人高转移大细胞肺癌细胞株L9981 Wnt信号传导通路的可行性,为阐明nm23-H1基因调控肺癌转移抑制的分子机制和靶向治疗提供实验依据.方法以转染nm23-H1基因的L9981-nm23-H1、原代L9981、空载L9981-pLXSN三株人高转移大细胞肺癌细胞为研究对象,应用Western blot检测比较各株肺癌细胞胞浆、胞核中Wnt信号传导通路关键激酶GSK-3β和β连环蛋白表达的变化.结果①GSK-3β在L9981-nm23-H1肺癌细胞胞浆中表达量IOD(6 341±541)显著高于L9981(3 736±298)和L9981-pLXSN(3 613±383)(P＜0.001);②GSK-3β在L9981-nm23-H1肺癌细胞胞核中表达量IOD(4 356±490)显著高于L9981(657±57)和L9981-pLXSN(705±75)(P＜0.001);③β-连环蛋白在L9981-nm23-H1肺癌细胞胞浆中表达量IOD(3 649±118)显著高于L9981(1 401±31)和L9981-pLXSN(1 350±55)(P＜0.001);④β-连环蛋白在L9981-nm23-H1肺癌细胞胞核中表达量IOD(2 945±68)与L9981(2 604±23)和L9981-pLXSN(2 652±53)比较无显著性差异(P＞0.05);⑤L9981与L9981-pLXSN两者间GSK-3β和β-连环蛋白在肺癌细胞胞浆和胞核的表达量均无显著性差异(P＞0.05).结论①nm23-H1基因能够显著上调人高转移大细胞肺癌细胞L9981胞浆和胞核中GSK-3β表达以及胞浆中的β-连环蛋白表达,但并未引起胞核内β-连环蛋白聚积.②调控GSK-3β和β-连环蛋白表达和靶向性阻断Wnt信号传导,可能是nm23-H1基因抑制肺癌转移的分子机制和信号调节机制之一.     

MTT法检测乳腺癌原代细胞中SP细胞对化疗药物的敏感性

目的:探讨MTT法在筛选乳腺癌较敏感的药物及浓度和指导乳腺癌临床治疗中的作用.方法:乳腺癌原代细胞和乳腺癌细胞株MCF-7培养传代,利用Hoechest DNA染色流式细胞仪分选SP细胞和非SP细胞.选SP细胞、MP细胞、PP细胞分别加入不同浓度的四种常规化疗药物观测SP细胞对药物敏感性.结果:不同药物对SP、MP和PP三种细胞的半抑制浓度IC50都呈现如下趋势:SP>>PP>MP.结论:SP细胞对不同药物都具有最低的敏感性,会将药物之间的差异放大,更适合用其检测药物毒性,药物毒性随着药物浓度的增加而增高,在具有相同效应的药物中,应选择低浓度,但因药物的作用机理不尽相同,患者身体基础状况及耐受程度不同,还应结合临床试验确定药物浓度.     

恶性胸膜间皮瘤治疗新进展

恶性胸膜间皮瘤是一种与石棉接触密切的肿瘤,其侵袭性很强,起病隐匿,发现时已在中晚期,目前的治疗方案尚未能有很好的治疗效果.采用溶瘤细胞性单纯性疱疹病毒和顺铂诱导溶瘤细胞性单纯性疱疹病毒产生GADD34蛋白增量调节方案能对间皮瘤癌细胞有相对的特异性,是一种有前景的治疗方案.     

151例甲亢病人治疗前肝功能的临床分析

分析 15 1例甲亢病人治疗前肝功能受损情况。统计肝功能生化指标异常例数和不同甲亢类型、血FT3、FT4 水平及各年龄段肝功能的受损例数。结果显示 :有 96例 (6 3 .5 8% )病人至少有一项指标异常 ,其中 43例 (44 .79% )有二项以上指标异常 ,以ALP异常为主 (5 4.30 % ) ,其次为ALT(35 .10 % ) ,与其他指标差异有显著性 (P <0 .0 1) ,血FT3 和 (或 )FT4 水平越高 ,越易发生肝功能损害 (P <0 .0 1) ,老年更易发生肝功能损害 (P <0 .0 1) ,而不同甲亢类型发生肝功能损害则差异无显著性 (P >0 .0 5 )。提示甲亢病人治疗前发生肝功能损害以ALP、ALT异常为主 ,血FT3 和 (或 )FT4 水平越高者和老年病人容易发生肝功能损害     

前列腺素E1对犬肺过度膨胀所致损伤保护作用的实验研究

目的 探讨前列腺素E1对肺过度膨胀所致损伤的保护作用及作用机制.方法 杂种犬16只,随机分为对照组和实验组,建立肺过度膨胀动物模型.对照组保持肺过度膨胀6 h;实验组保持肺过度膨胀6 h,并以30 ng/(kg·min)的剂量给予前列腺素E1,6 h后取标本进行肺组织湿/干比、支气管肺泡灌洗液中蛋白含量的检测,并进行肺组织光镜和电镜的观察,观察肺损伤的变化情况.结果 对照组肺组织湿/干比、支气管肺泡灌洗液中蛋白含量(BALF)明显高于实验组(P＜0.05);肺组织学检查实验组肺损伤程度明显轻于对照组.结论 前列腺素E1对犬肺过度膨胀所致损伤有明显的保护作用,其作用机制与抑制中性粒细胞活性,降低中性粒细胞、血小板聚集等有关.     

云南宣威昆明两地肺癌ras基因表达的异质性研究

目的云南省宣威市是我国的肺癌高发地区,具有显著的地域性特点,本研究通过比较ras基因在宣威及昆明两地肺癌中表达的差异性,分析ras基因在两地肺癌中的异质性。方法采用免疫组化染色技术,对45例宣威地区肺癌和45例昆明地区肺癌石蜡包埋组织标本中ras基因的表达进行检测,比较ras基因在两组肺癌组织中表达的差异。结果90例肺癌组织中55例ras基因表达阳性,其中宣威肺癌组31例,昆明肺癌组24例,两组相比,差异无统计学意义（62．0％vs48．0％,x2=2．291,P=0．130）。fas基因在宣威肺腺癌病例中的阳性表达率为78．3％（19／23）,在昆明肺腺癌病例中为47．8％（11／23）,宣威肺癌组高于昆明肺癌组,差异有统计学意义（78．3％vs47．8％,x2=4．572,P=0．032）。结论ras基因在两地肺腺癌病例中的表达存在着差异性,提示ras基因在两地肺腺癌中存在着异质性。