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目的 观察DNA甲基转移酶1(DNMT1)和DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)基因干扰对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响.方法 利用LipofectamineTM 2000转染DNMT1和DNMT3b小分子干扰RNA (siRNA)至胰腺癌BxPC-3细胞.实验共分5组:DNMT1干扰组(转染DNMT1-siRNA)、DNMT3b干扰组(转染DNMT3b-siRNA)、双重干扰组(转染DNMT1+ DNMT3b-siRNA)、阴性对照组(转染negative-siRNA)和空白对照组(转染脂质体).转染48 h后,应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法和Western blot法分别检测细胞中DNMT1、DNMT3b mRNA和蛋白的表达水平;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞体外增殖活力;流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 与空白对照组和阴性对照组比较,各干扰组的DNMT1和(或)DNMT3b mRNA及蛋白表达量均显著降低(P<0.01).DNMTI干扰组和双重干扰组的细胞生长抑制率分别为30.9%和28.3%,均显著高于DNMT3b干扰组的14.5% (P<0.01),而DNMT1干扰组和双重干扰组之间差异无统计学意义(P>0.05).空白对照组、阴性对照组、DNMT1干扰组、DNMT3b干扰组和双重干扰组的细胞凋亡率分别为3.74%、5.07%、44.46%、24.20%和39.24%,各干扰组的细胞凋亡率均比对照组显著增加(P<0.01),DNMT1干扰组与双重干扰组的细胞凋亡率均显著高于DNMT3b干扰组(P<0.01),而DNMT1干扰组与双重干扰组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论 DNMT1和(或)DNMT3b基因表达下调后,能抑制胰腺癌BxPC-3细胞生长,并能诱导细胞凋亡.DNMT1单干扰的抑癌作用优于DNMT3b单干扰,DNMT1和DNMT3b双重干扰无明显的协同效应. 相似文献
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我院普外科自1965年5月至1996年7月收治并经手术和病理证实胰岛素瘤11例(含1例胰岛素癌),其中8例于近10年收治,现报道如下。 临床资料 1.一般资料 男5例,女6例。年龄17~54岁,平均31.1岁。起病至确珍时间2月~4年,平均20个月。 2.诊断情况 患者均有典型的Whipple三联征,发作时血糖值为0.2mmol/L~2.5mmol/L(3.4mg/dl~42.5mg/dl),其中7例同时检测胰岛素水平,仅1例<5μU/ml(其血糖值为0.6mmol/L),另6例在120~25μU/ml,免疫反应性胰岛素/葡萄糖(IRI/G)均>0.3(6.56~0.463)。 相似文献
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用Western免疫印迹技术检测了接触室内煤烟的肺癌患者19例(肺癌组)和未患肺癌者22例(非肺癌组)以及不接触煤烟的未患肺癌者19例(对照组)血清中的rasp21癌基因蛋白和p53抑癌基因蛋白。结果显示:肺癌组血清中p21和p53蛋白含量明显高于其他两组人群(P<0.05或P<0.01);肺癌组p21和p53蛋白阳性样品数各为6例,非肺癌组p21蛋白阳性样品数为2例。验证了本室以前采用酶联免疫斑点法进行初步筛检的结果,表明血清中癌基因蛋白和抑癌基因蛋白可作为环境相关肺癌的生物标志。本文还讨论了上述两种免疫学检测方法的适用条件和优缺点 相似文献