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31.
目的:用含有HSV-TK基因的重组腺病毒/丙氧鸟苷系统(AdTK/GCV)及该重组病毒/无环鸟苷系统(AdTK/ACV),在体外分别对4种肿瘤细胞进行抑瘤实验,比较GCV、ACV对肿瘤细胞的抑制效果。方法:将同滴度AdTK感染的4种肿瘤细胞分别加入GCV、ACV,用MTT法测定OD值,计算细胞抑制率,用SPSS统计软件进行数据分析。结果:相同浓度的GCV与ACV相比,对肿瘤细胞的抑制率无显著差异。结论:由于ACV最大耐受量是GCV的4倍,且价格低廉,故在AdTK自杀基因治疗中可用ACV取代GCV。 相似文献
32.
用nestedPCR、ELISA三种方法对天津地区209例慢性肝病患者进行了病原学分析,初步探讨了其临床意义。结果揭示天津地区慢性肝病(慢性肝炎、肝硬化和肝癌)患者目前仍以HBV单独感染为主占69.8%,HCV单独感染(HCV抗体和HCVRNA均阳性)率为13.4%,表明HCV感染在天津地警惕一肝病中占有一定癸209例中的HBV和HCV重叠感染为9.1%,揭示该地区亦存在相当数量的HBV和HCV重 相似文献
33.
34.
肝细胞癌基因治疗的体外实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :构建一种对肝细胞癌有直接、间接治疗作用的重组腺病毒。方法 :用PCR方法扩增CD基因和glyES基因片段 ,插入腺病毒穿梭质粒。用细菌内同源重组方法与腺病毒骨架质粒重组构建出重组腺病毒质粒。经脂质体介导转染293包装细胞扩增获取重组腺病毒rAd CDglyES。用MTT法检测其对肝癌细胞株 (SMMC -7721)的生长抑制率及其表达产物对经ECGF处理的脐静脉血管内皮细胞 (ECV -304)增殖的影响。结果 :纯化的重组腺病毒滴度为1×1013 3TCID50/L ,对SMMC 7721的生长抑制率达 (82 1±8 3) % ,与对照组 (24 6±14 1) %比较有显著性差异 (P<0 01)。浓缩的转染了该重组腺病毒的细胞培养上清液对ECV 304细胞增殖的抑制率为(78 7±1 8) % ,而同样浓缩的转染了对照重组腺病毒rAd CD的细胞培养上清液的抑制率仅为 (24 2±9 7) % ,两者亦有显著性差异 (P<0 01)。结论 :rAd CDglyES在体外对肝癌细胞具有直接和间接抑瘤作用 相似文献
35.
AdTK治疗肺癌的实验研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:构建含HSV—TK基因的重组腺病毒AdTK,在两种肺癌细胞和鼠肺癌模型中对AdTK/GCV系统进行抑瘤买验研究。方法:采用同源重组法构建AdTK,用MTT法测定AdTK/GCV系统对H460、PG49人肺癌细胞的生长抑制率,建立T739鼠肺癌模型,观察AdTK/GCV系统对瘤体大小及鼠存活期的影响。结果:成功构建AdTK,AdTK转染H460、PG49细胞后对细胞抑制率随AdTK、GCV及药物作用时间的增加而增高,有显著性差异,小鼠体内实验中观察到AdTK/GCV系统对鼠肺癌有明显生长抑制作用,且明显延长了小鼠的存活期。结论:本文建立的AdTK/GCV系统在体内外对肺癌细胞均有明显抑制作用,为AdTK用于基因治疗奠定了基础。 相似文献
36.
目的:构建含融合自杀基因CDglyTK复制型重组腺病毒,并在肺腺癌细胞A549中验证其复制能力和溶瘤特性。方法:建立重叠延伸PCR方法,用该方法制备的E1A-IRES片段插入AdEasy载体构建含融合自杀基因CDglyTK复制型重组腺病毒rAdE1A-CDglyTK。并用该病毒与复制缺陷型重组腺病毒rAd-CDglyTK分别感染肿瘤细胞A549,从荧光蛋白表达、细胞病变及病毒增殖等方面进行比较,以确定其复制能力及溶瘤特性。结果:成功构建了含融合自杀基因CDglyTK的复制型重组腺病毒rAdE1A-CDglyTK,该病毒感染肿瘤细胞A549后报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的表达,能大量增殖并出现明显的细胞病变效应(CPE)。结论:构建的复制型重组腺病毒在肿瘤细胞内的复制能力、溶瘤特性和外源基因的表达明显优于目前广泛应用的复制缺陷型重组腺病毒。 相似文献
37.
目的 :构建含HSV -TK基因的重组腺病毒AdTK并观察AdTK/GCV系统对体外培养的PG49、H460、MCF -7和HeLa4种肿瘤细胞株的抑制作用。方法 :采用同源重组法构建AdTK ;用MTT法测定细胞生长抑制率。结果 :已成功构建了AdTK ;AdTK/GCV系统对4种肿瘤细胞的生长抑制率随AdTK、GCV浓度及作用时间的增加而升高。结论 :所构建的AdTK/GCV系统对4种肿瘤细胞株有明显的抑制作用 相似文献
38.
39.
目的:构建含胞嘧啶脱氨酶基因(CD基因)重组腺病毒AdE1CMVCD,用自杀基因治疗系统AdE1CMVCD/5-氟胞嘧啶(5-FC)对小鼠肺腺癌进行体内抑瘤作用的实验研究,方法:建立T739小鼠肺腺癌荷瘤模型,瘤体内导入AdE1CMVCD,腹腔注射5-FC,观察各组小鼠瘤体和生存期差异以及瘤体组织切片病理变化,结果:从实验中观察到AdE1CMVCD/5-FC系统对小鼠肺腺癌有明显的抑制生长作用,与对照组荷瘤小鼠相比,治疗组荷瘤小鼠生存期明显延长,结论:AE1CMVCD与5-FC联合在体内对肺癌有明显的抑制作用。为临床肺癌基因治疗提供了可靠的理论及应用依据。 相似文献
40.