人源治疗性抗体研发技术进展

1986年美国食品和药物管理局（Food and Drug Administration,FDA）批准了首个单抗药物。30多年来,抗体药物领域的发展日新月异,截至2019年12月,获得FDA批准上市的单抗药物达79种,用于治疗癌症、自身免疫性疾病、传染病等多种疾病。人源抗体具有特异性强、不良反应小的优点,已经成为新药开发的主流,全球销售额排名前十的药物中,人源抗体药物占据了半壁江山。本文着重对近年来抗体药物研发技术进展,包括抗体人源化、噬菌体展示、转基因小鼠、单细胞PCR等进行述评。     

基于技能模块导师负责制的住院医师规范化培训教学研究

目的　探讨基于技能模块导师负责制在住院医师规范化培训中的应用及效果。方法　通过遴选、聘用的技能模块导师负责对湖南省儿童医院2016级45名儿科住院医师进行培训,并对其前后的专业理论知识、技能操作能力、综合能力进行比较分析;另外通过问卷星的调查方式让住院医师对技能导师进行教学反馈,对儿科基地2017年、2018年、2019年结业技能考试通过率进行分析比较。应用SPSS 17.0行t检验和卡方检验。结果　技能模块导师负责制培训后住院医师专业理论知识[（86.45±7.59）分]、技能操作成绩[（89.78±6.04）分]以及综合能力[（84.09±8.43）分]均高于培训前（P<0.05）。2019年首次住院医师规范化培训结业技能考试通过率为93.33%,明显高于2017年的57.14%,两组比较差异具有统计学意义（?字2=28.45,P<0.01）;与2018年80.00%比较差异也有统计学意义（?字2=6.365,P<0.05）。结论　技能模块导师负责制培训方法,不仅有助于迅速提高住院医师的专业技能,提高其住院医师岗位胜任力,也有助于师资成长及综合素质的提高,值得住院医师规范化培训的推广应用。     

泛素特异性蛋白酶4对脂肪干细胞成骨分化的影响

目的:本研究通过使用泛素特异性蛋白酶4(USP4)抑制剂Vialinin A干预大鼠脂肪干细胞(ASCs)的生长分化,探究USP4对ASCs的成骨分化的影响。方法:将分离培养至第3代的ASCs细胞分为6组分别用含0、0.1、0.5、1、5、10μmol/L Vialinin A的培养基培养10 d,CCK-8检测各组细胞增殖情况。将第3代细胞分为实验组、阳性以及阴性对照组,分别用含0.5μmol/L Vialinin A的成骨诱导液、不含Vialinin A的成骨诱导液及普通的α-MEM培养。检测各组第7天细胞内USP4、β-catenin、碱性磷酸酶(ALP)及骨桥蛋白(OPN)基因的表达。将3组细胞培养至第4、7、10、14天进行ALP染色,检测ALP的活性;培养至21 d时进行茜素红染色,检测细胞矿化结节的形成。采用t检验比较组间数据差异,P<0.05时差异具有统计学意义。结果:0.5μmol/L Vialinin A处理的实验组细胞增殖趋势与对照组的差异无统计学意义,表明该浓度的Vialinin A对细胞增殖无影响,作为后续实验组浓度。ALP与茜素红染色结果显示实验组染色效果均较其他组显著。RT-qPCR结果显示与阴性对照组相比,阳性对照组与实验组细胞内USP4与β-catenin表达量较低,差异具有统计学意义。实验组与阳性对照组相比无显著性差异。与阳性对照组相比,实验组的ALP与OPN表达量显著升高,差异具有统计学意义。结论 :0.5μmol/L的USP4抑制剂Vialinin A可以促进大鼠ASCs内ALP与OPN基因的表达。但USP4可能并非通过β-catenin途径调节其成骨分化。     

饶河地区野生动物携带病毒的基因分型及序列特征分析

目的 确定当前饶河地区宿主动物所携带病原体的基因型别,分析其变异情况,对该地区自然宿主动物的感染情况进行监测。方法 使用TRIZOL法提取待测样本RNA,经RT-PCR扩增后对PCR产物进行核苷酸序列测定。应用DNAStar软件包对核苷酸序列进行同源性比较,构建系统进化树和氨基酸序列的比对。结果 在饶河地区,除褐家鼠(Rattus norvegicus)以外,松鼠(Sciurus vulgaris)也携带SEOV。本次从3只褐家鼠和1只松鼠体内分离出汉城型汉坦病毒(Seoul virus, SEOV),4株SEOV的遗传距离范围为0.00~0.01,与黑龙江地区常见SEOV病毒株亲缘关系较近。结论 黑龙江地区的气候和自然地理条件非常适合携带汉坦病毒(HV)宿主动物的生存和繁殖,但是随着人们生活条件的改善,禁止伐木狩猎,家鼠和野鼠与人类交集的逐渐减小,肾综合征出血热(HFRS)在黑龙江省暴发的概率也越来越小。     

手术室护士工作量化表的设计与应用

随着外科技术迅猛发展,微创手术及高、新、尖手术大量开展,新仪器新设备层出不穷,手术室护理工作显得尤为重要,如何建立手术室护士绩效考核标准,用数据客观地对护士工作情况进行评价[1],如何充分发挥护士们蕴藏的知识、技能和创造力,提高护士们的工作积极性[2],全面提高手术室护理质量和人员综合素质,已成为手术室管理者密切关注的课题。我院手术室自2012年1月以来,采用Excel软件,自行设计了手术室     

肝复康药物血清对肝星状细胞核因子-κB及I、Ⅲ型胶原表达的影响

目的:通过观察中药肝复康中剂量浓度含药血清对肝星状细胞T6(hepatic stellate cell-T6,HSC-T6)细胞株中核因子-κB(NF-κB)、Ⅰ型胶原(TypeⅠCollagen,ColⅠ)及Ⅲ型胶原(TypeⅢCollagen,ColⅢ)基因表达的影响,探讨其抗纤维化的作用及分子机制。方法:常规方法制备肝复康中剂量浓度含药血清,并用肝复康含药血清干预,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western-Blot方法观察分析NF-κB、ColⅠ和ColⅢ表达的变化并探讨其相关性。结果:经乙醛刺激后的HSC-T6细胞株NF-κB、ColⅠ和ColⅢ表达均上调,肝复康中剂量浓度含药血清处理后可明显下调上述基因的表达。结论:中药肝复康抗纤维化的机制可能与其抑制NF-κB及ColⅠ、ColⅢ的表达有关。     

早期生长反应因子1特异诱骗寡核苷酸下调富含半胱氨酸蛋白61抑制大鼠血管平滑肌细胞迁移

目的观察早期生长反应因子1特异诱骗寡核苷酸对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞中早期生长反应因子1和富含半胱氨酸蛋白61表达的影响,初步探讨早期生长反应因子1特异诱骗寡核苷酸抑制血管平滑肌细胞迁移的机制。方法体外培养血管平滑肌细胞并转染早期生长反应因子1特异诱骗寡核苷酸,采用逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学法检测转染后不同时间点对照组与实验组血管平滑肌细胞中早期生长反应因子1及富含半胱氨酸蛋白61的mRNA和蛋白的表达变化,划痕法测定血管平滑肌细胞迁移距离。结果早期生长反应因子1及富含半胱氨酸蛋白61的mRNA和蛋白在对照组、诱骗组及诱骗对照组中均有表达。在不同时间点,诱骗组早期生长反应因子1及富含半胱氨酸蛋白61的mRNA和蛋白的表达均低于对照组(P<0.05)。转染后48 h,对照组、诱骗组及诱骗对照组血管平滑肌细胞的迁移距离分别为105.23±7.81μm、58.65±12.68μm、106.47±7.60μm,诱骗组血管平滑肌细胞的迁移距离明显低于其他两组(P<0.01)。结论对体外培养的血管平滑肌细胞转染早期生长反应因子1特异诱骗寡核苷酸可以抑制早期生长反应因子1及富含半胱氨酸蛋白61的mRNA和蛋白表达,从而抑制血管平滑肌细胞的迁移。     

HIV/AIDS患者合并眼部肿瘤的临床特征分析

探讨11例HIV/AIDS患者合并眼部肿瘤的临床特点。回顾2015年5月至2019年12月北京地坛医院眼科11例（12眼）HIV/AIDS合并眼部肿瘤患者的临床资料。11例患者中,男性9例,平均年龄（33.2±10.4）岁;确诊HIV/AIDS病程为1~72个月;3例未行HAART治疗,其余8例HAART治疗时长为7~75个月;6例合并梅毒感染,6例合并尖锐湿疣,4例合并结核分枝杆菌感染,3例合并慢性乙型肝炎病毒性肝炎,2例合并卡氏肺孢子虫肺炎。眼部肿瘤病程45天～10个月。术后病理证实5例（6眼）为结膜乳头状瘤,4例为眼眶淋巴瘤,2例为眼睑结膜鳞状细胞癌。认为HIV/AIDS患者可合并多种眼部肿瘤,包括艾滋病相关性肿瘤和非艾滋病相关性肿瘤,需多学科合作制定个体化治疗方案。（眼科,2021, 30： 474-476）