Percoll非连续密度梯度沉降法分离人外周血中性粒细胞

随着炎症反应综合征 (ｓｙｓｔｅｍｉｃｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｒｅａｃｔｉｏｎｓｙｎ ｄｒｏｍｅ,ＳＩＲＳ )概念的提出 ,对中性粒细胞 (ＰＭＮ )在炎症过程中的作用又有了新的认识。研究组织中ＰＭＮ的转归 (坏死或凋亡 )及其影响因素显得十分重要 ,因此建立一种快速、高效、稳定的外周血ＰＭＮ的分离提纯方法 ,对于研究ＰＭＮ的理化及生物学功能意义重大。本文报道用Ｐｅｒｃｏｌｌ分离液的非连续密度梯度沉降方法 ,简便易行。1　材料和方法1 1　试剂及仪器　Ｐｅｒｃｏｌｌ原液及ＤｅｘｔｒａｎＴ 5 0 0均为Ｐｈａｒｍａ ｃｉａ公司…     

肿瘤坏死因子α对小鼠骨髓型放射损伤的防护作用

目的：研究肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）对受照射小鼠骨髓造血细胞的近期影响和造血重建功能的作用探讨ＴＮＦα对骨髓造血细胞的辐射防护作用。方法小鼠照射前２４ｈ一次性注射ＴＮＦα,２周后检测共外周血ＷＢＣ、骨髓ＭＮＣ、ＣＦＵ－Ｓ和ＣＦＵ－Ｍｉｘ,流式细胞仪分析骨髓ｃ－Ｋｉｔ＋细胞;并进行长期造血重建实验燧注射ＴＦＮα的小鼠,２周后外周血ＷＢＣ、骨髓ＭＮＣ、内源性ＣＦＵ－Ｓ、ＣＵＦ－Ｍｉｘ数量和ｃ－Ｋｉｔ＋     

胃粘膜上皮不典型增生和胃癌组织CD44v6的表达研究

目的 探讨ＣＤ４４Ｖ６在胃癌发生与发展中的作用。方法 运用免疫组化方法检测２４例浅层性胃炎、２４例不典型增生胃粘膜、４８例胃癌组织中ＣＤ４４Ｖ６的表达。结果 （１）浅表性胃炎组无ＣＤ４４Ｖ６表达,不典型增生组和胃癌组ＣＤ４４Ｖ６阳悸率分别为４５．８３％、５０．００％,明显高于浅表性胃炎组（Ｐ均〈０．０１）,（２）ＣＤ４４Ｖ６表达与胃癌淋巴结转移和ＰＴＭＮ分期有关（Ｐ〈０．０５）,与组织学类型无关Ｐ     

100例急性白血病免疫表型特点

目的 :研究急性白血病免疫表型的特点。方法 :采用间接免疫荧光法分析 10 0例急性白血病患者的免疫表型。结果 :T- AL L 13例 ,非 T- AL L 2 3例 ,AML 49例 ,HAL 10例 ,另外还发现了 5例标记特殊的急性白血病。与FAB诊断符合率为 86 %。结论 :急性白血病免疫分型可以提高诊断的准确性。     

人Blys转染细胞对B细胞功能的影响

利用RT-PCR方法从经IFN-γ激发的正常人外周血单核细胞总RNA中扩增出全长BlyscDNA,继而将BlyscDNA插入真核表达载体逆转录病毒载体pSIV1中。以脂质体转染法将重组逆转录病毒载体与两个辅病毒载体共转染包装细胞293T,将含完整病毒颗粒的上清转染小鼠成纤维细胞L929,经G418筛选获得稳定表达Blys分子的L929细胞;RT-PCR和流式细胞术检测证实Blys分子在L929的稳定和高水平表达。继而以该转染细胞与PWM驱动的人扁桃体B细胞共培养,体外实验表明Blys介导的共刺激信号能促进该培养体系B淋巴细胞增殖,与抗μ抗体信号协同能刺激B细胞分泌IgG。     

4-1BB信号拮抗肿瘤细胞培养上清诱导的树突状细胞凋亡

为研究4-1BB信号拮抗肿瘤细胞培养上清诱导的树突状细胞(DC)凋亡的作用,采用rmGM-CSF联合rmIL-4诱导小鼠骨髓细胞分化为未成熟树突状细胞(imDC),分别经rmTNF-α、4-1BB激发型单克隆抗体(2A)或TNF-α联合2A激发DC成熟。未成熟或成熟DC分别与不同浓度的肿瘤培养上清混合培养。流式细胞仪测定DC表面CD80、CD86的表达,3H-TdR掺入法测定DC激发T细胞活化增殖能力;JAM法测定未成熟或成熟DC与肿瘤上清混合培养后DNA片断形成率。结果显示:经2A或TNF-α刺激后,DC激发T细胞活化的能力显著提高;5%、10%、20%、50%小鼠肿瘤细胞株A20或B16培养上清与未成熟DC共育24h后,DNA片断形成率分别为16%、29%、41%、51%和20%、27%、37%、58%,且该效应具有时间依赖性;DC经2A或TNF-α激发48h后,不同浓度肿瘤培养上清诱导DNA片断形成率显著降低。因此,肿瘤细胞可以通过分泌可溶性因子诱导未成熟DC凋亡;4-1BBmAb能促进DC的发育成熟,并能有效地抑制肿瘤细胞培养上清诱导的DC凋亡。     

免疫衰老及其免疫学预警指标

增龄导致胸腺萎缩,成为免疫衰老的直接原因。免疫衰老是免疫系统全方位多系统的并由基因严格控制的循序渐进的自然过程,在这一过程中,免疫系统发生了许多明显的变化,细胞免疫、体液免疫以及天然免疫均有不同程度的改变。免疫学预警指标(immunologicalriskphenotypes,IRP),不仅可以评价机体的免疫状态,而且可以提前预知疾病的发生,为免疫干预提供客观数据。     

丝素蛋白的免疫学特性及细胞相容性研究进展

丝素蛋白作为一种具有良好生物相容性和低免疫原性的天然高分子材料在生物医学领域里有着广泛的应用价值。阐述了近年来对丝素蛋白在组织工程学研究中所涉及的免疫学方面及细胞相容性方面的研究概况。     

第2，3鳃裂联合瘘管1例

患者男，１７岁。出生后即发现颈前左下方有一逐渐增大的包块，１岁时在当地医院手术切除，后经反复换药抗炎治疗，切口一直不愈合，间断溢脓，进流汁时有液体渗出，但无食物残渣。１９９５年７月患者就诊我院外科以“颈段食道皮肤疹”收入院，请我科行食道镜检查食道内未见瘘口，Ｘ线碘油吞服造影见碘油从左侧梨状窝流入颈部软组织内。瘘管口注射碘油造影见：瘘管向颈上内方深部走行，而转入我科。查体：一般情况好，颈软、甲状腺及气管未见异常。左侧锁骨上窝锁骨中点上方有一瘘口，周围皮肤糜烂，瘢痕增生，可挤出少许脓性分泌物。 气管…