GPC3启动子报告基因载体构建与转录活性分析

目的 构建磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)启动子荧光素酶报告基因载体,并验证其转录活性.方法 以人类基因组DNA为模板,PCR扩增GPC3启动子基因片段,克隆到pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体上,通过转染HepG2细胞检测荧光素酶活性来验证GPC3启动子的转录活性.结果 GPC3基本启动子和全长启动子分别成功构建到pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体中,GPC3基本启动子具有很强的转录活性,而全长启动子的转录活性比基本启动子高4倍以上.结论 成功构建了GPC3启动子荧光素酶报告基因载体,为研究GPC3转录调控提供了重要手段.     

原发性肝癌组织p53和ASPP2基因突变检测及临床意义

目的:检测原发性肝癌组织中p53与ASPP2基因突变,并探讨其临床意义.方法:收集24例肝癌标本,分别提取DNA及RNA,PCR扩增p53基因,逆转录PCR扩增ASPP2基因并进行半定量分析,基因测序后进行突变分析.结果:24例肝癌患者中,p53基因在肝癌组织中的突变率是75.0%,在癌旁组织中的突变率为20.8%,P<0.01;肝癌组织中ASPP2与GAPDH的灰度比值平均为0.81,癌旁组织中为0.85,P>0.05,但是癌组织和癌旁组织均未检测到ASPP2基因突变.结论:在原发性肝癌发生过程中,p53基因突变比ASPP2基因突变可能起到更重要的作用.     

儿童肾瘢痕形成的危险因素

肾瘢痕可导致高血压、蛋白尿、慢性肾脏病、甚至终末期肾病的可能。研究儿童肾瘢痕形成的危险因素,有利于早发现、早诊断、早预防、早治疗。高级别的膀胱输尿管反流,反复的泌尿道感染,以及延误治疗都是肾瘢痕形成的危险因素。但是仍有一些因素,如性别和年龄,先天性因素与肾瘢痕的关系目前仍存在争议。近年研究发现,尿液无创指标,如尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白、尿内皮素-1及风险预测模型均可预测肾瘢痕的形成,而预防应用抗生素虽可减少泌尿道感染的发生,但并不能降低肾瘢痕形成的风险。文章综述了儿童肾瘢痕形成的可能危险因素和预测指标,为临床对肾瘢痕的早期发现、及时干预和有效预防提供依据,以期减少肾瘢痕的形成和进展。     

针灸加拔罐治疗股外侧皮神经炎临床观察

目的讨论针灸加拔罐疗法对股外侧皮神经炎的治疗效果。方法选择经肌电图检测确诊为股外侧皮神经炎患者84例,随机分成观察组和对照组各42例,分别予针灸加拔罐治疗和单纯针灸治疗,均治疗2个疗程,比较治疗前后2组肌电图感觉传导速度(SCV)变化情况。结果 2组治疗后SCV均较治疗前升高,差异有统计学意义(P0.0001);观察组SCV恢复到(43.83±4.00)m/s,对照组恢复到(38.10±5.19)m/s,组间比较差异有统计学意义(P0.0001)。结论针灸加拔罐可促进股外侧皮神经炎恢复。     

板蓝根乙醇提取物化学成分及其抑制一氧化氮释放活性研究

目的 研究板蓝根Isatidis Radix的化学成分及其抑制一氧化氮（NO）释放活性。方法 采用硅胶、反相ODS C18、葡聚糖凝胶、半制备液相等色谱技术分离纯化,结合理化性质,NMR、MS等波谱数据解析结构,CCK-8法测定化合物抑制NO释放活性。结果 从板蓝根中共分离鉴定了17个化合物,分别为(7S,8R,7′S,8′R)-3,4,3′,4′-tetramethoxy-9,7-dihydroxy-8.8′,7.O.9′-lignan(1)、(-)-(7R,7′R,8S,8′S)-4-β-D-吡喃葡萄糖基-4′-羟基-3,3′,5′-三甲氧基-7,9′:7′,9-双环氧木脂烷（2）、liballinol(3)、2-amino-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)propane-1,3-diol(4)、对羟基苯丙醇（5）、3-甲氧基-4-羟基苯丙醇（6）、3-羟基-1-(3-甲氧基-4-羟基-苯基)-丙基-1-酮（7）、 3,4,5-三甲氧基肉桂酸（8）、(E)-4-(3R,4S)-3,4-dihydroxy-2,6,6-trimethylcyclohex-1-...     

缬草中1个新的单环氧木脂素

目的 研究缬草Valeriana officinalis的化学成分及其细胞毒活性.方法 采用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱以及半制备HPLC等方法进行分离纯化,根据理化性质、MS、NMR和ECD数据鉴定化合物的结构,采用MTT法测定化合物的细胞毒活性.结果 从缬草中分离得到15个化合物,分别鉴定为缬草木脂素A(1)、(7...     

艾滋病痴呆复合征抗病毒治疗研究进展

获得性免疫缺陷综合征（acquired immune deficiency syndrome,AIDS）是人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）特异性感染辅助性T淋巴细胞,破坏免疫系统,造成以机会性感染和恶性肿瘤为主要临床表现的综合征,日前已成为世界上首要的社会公共卫生问题。截至2007年底,全世界已有HIV／AIDS患者4000余万,其中我国70余万人^[1]。     

婴幼儿有机磷中毒12例误诊原因分析

我院儿科 1994～ 2 0 0 0年共收治婴幼儿有机磷中毒 3 2例 ,其中 12例误诊 ,误诊率 3 7 5 % ,远远超过我院较大儿童有机磷中毒的误诊率 (5 6 % )。现分析报告如下。1　临床资料1 1　一般资料　 12例中 ,男 7例 ,女 5例 ;年龄最大 2 8个月 ,最小 2个月 ,平均 11个月。来自农村 11例 ,城市 1例。发病距就诊时间最长 8小时 ,最短 3 0分钟 ,平均 2小时。经皮肤接触中毒8例 ,经消化道中毒 2例 ,另 2例接触史不明。 12例均行胆碱脂酶活力 (ＣＨＥ)测定 ,均 <0 3 ,可确诊为重度有机磷农药中毒。1 2　临床表现　有恶心、呕吐、腹疼等消化道症状者 …     

核苷类逆转录酶抑制剂线粒体毒性发病机制的研究进展

自1981年首次报告获得性免疫缺陷综合征（acquired immunede ficiency syndrome,AIDS,简称艾滋病）以来,艾滋病在全球迅速蔓延,已经变成了人类前所未有的最具毁灭性的疾病。我国艾滋病的流行自1995年以来进入快速发展期,每年以30％的速度增长,估计感染人数已达70余万。早期感染者已相继发病,迫切需要有效的治疗。高效抗逆转录病毒治疗（highly active anti—retrovirus therapy,HAART）是近年来艾滋病研究的重大进展,     

东方栓孔菌多糖对小鼠的降血糖和降血脂作用

目的 探讨东方栓孔菌多糖组分的降血糖和降血脂作用。方法 东方栓孔菌粗多糖经DEAE纤维素柱分离，利用水和0.5 mol/L NaCl溶液冲洗，收集其中多糖含量较高的组分DEAE-水和DEAE-盐，两部分分别经Sephadex G-100凝胶柱得到4个多糖组分TOPW-1，TOPW-2，TOPS-1，TOPS-2。通过2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（ABTS）法考察各多糖组分抗氧化活性，对紫外检测信号一致的收集液TOPW-1，TOPS-1利用HPGPC测定相对分子质量，对均一的TOPW-1通过酸水解结合HPLC分析测定单糖组成。体外检测TOPW-1，TOPS-1对DPP4（二肽基肽酶-4）抑制活性，脂肪细胞摄取葡萄糖能力和对胰脂肪酶的抑制活性，初步判断降糖作用，并建立高脂饲料高血脂小鼠模型和链脲霉素（STZ）高血糖小鼠模型，实验动物分为正常组，模型组，模型+TOPS-1高、中、低剂量组（0.1，0.2，0.4 g/kg），模型+丹参（0.5 g/kg）组和模型+消渴丸（5丸/kg）组，后两组为阳性对照组，灌胃给药。采用血糖测试仪和全自动生化分析仪分别测定血清血脂指标[总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）]和血糖水平，评价TOPS-1降血糖和降血脂作用，探讨可能的作用机制。结果 TOPW-1为均一组分，是由D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖及D-岩藻糖组成的多糖，但TOPW-1的抗氧化及体外降血糖作用均不显著。TOPS-1为非均一多糖，具有较强的抗氧化能力（在500 μg/mL浓度下，其清除率达到90.15%），对胰脂肪酶有一定的促进作用，进一步动物实验表明TOPS-1中剂量组（0.2 g/kg）能显著降低高血糖小鼠的空腹血糖值及高血脂小鼠的TC、TG和LDL-C含量，且给药过程中未出现小鼠死亡。TOPS-1低、高剂量组降血糖作用不显著，高剂量组给药存在一定增加小鼠死亡率的可能。结论 东方栓孔菌多糖具有抗氧化，降血糖和调血脂的作用，推测其降糖作用与降低氧化应激水平，减少糖尿病人脂肪代谢紊乱有关。