一种改良的脂肪染色法

在临床病理诊断和科研工作中，HE切片常出现大小空泡，究竟是脂肪变性、水泡变性还是糖原贮积；肿瘤是否为脂肪源性；骨折患者是否有脂肪栓塞等都需要用脂肪染色加以鉴别。用于脂肪染色的油红O、苏丹类染料一直使用丙酮或异丙醇配制，而丙酮和异丙醇极易挥发产生沉淀，染色时易在组织片上留下红色结晶，并且使用液不易保存每次染色需要重新配制。我们经过不断探索，摸索出一种易配制、不易产生沉淀、易保存、性能稳定的方法，该方法操作简便，染色效果很好，现介绍如下。     

超声诱导培养大鼠血管平滑肌细胞凋亡的研究

目的　研究不同剂量超声对培养大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)凋亡的影响 ,为超声治疗的临床应用提供实验依据。方法　不同剂量、频率为 650 k Hz的超声波辐照体外培养的大鼠血管平滑肌细胞。照射后 2 4h,用原位末端脱氧核苷酸转移标记 (TUNEL )技术检测凋亡细胞 ,用免疫组织化学方法检测 B细胞淋巴瘤 -2伴 Bax蛋白表达。结果　 1.0 W/ cm2及 0 .5W/ cm2超声辐照细胞 5min,2 4h后细胞凋亡率明显及 Bax蛋白表达率分别显著高于对照组 (P<0 .0 5)。结论　声强为 0 .5W/ cm2 及 1.0 W/ cm2 超声辐照大鼠血管平滑肌细胞 5min,能诱导其凋亡的发生及 Bax蛋白表达率的提高     

健康干预对长沙市城乡老年人生活质量的影响

目的 探讨健康干预对老年人生活质量的影响.方法 选择长沙市城乡老年人2 339名为研究对象,进行为期2年的健康干预,干预前后分别发放问卷调查表进行调查,比较干预前后老年人生活质量的变化,评估干预效果.结果 经过两年健康干预,老年人生活质量项目中健康状况、生活习惯、日常生活功能、社会交往、心理状况、生活满意度、体格检查状况的评价及总评分均明显改善(P＜0.01).结论 针对性的健康干预对提高老年人生活质量有积极的作用.     

斑点追踪技术评价肥厚型梗阻性心肌病化学消融术前后左心室收缩同步性的研究

目的 应用二维斑点追踪显像(2D-STI)技术评价肥厚型梗阻性心肌病(HOCM)化学消融术前后患者左室收缩同步性,并探讨左室收缩同步性与左室流出道压差的关系.方法 21例HOCM患者于化学消融术前及术后6d,超声心动图测量左室流出道压差;获取左室短轴观(二尖瓣环、乳头肌和心尖水平)二维灰阶图像,应用2D-STI测量左室短轴观各节段收缩期径向应变达峰时间(TRS).计算左室整体径向应变达峰时间的标准差(TRS-SD).结果 21例HOCM患者左室流出道压差术后较术前明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01).术后6d,前间隔基底段及中段径向TRS较术前明显延迟(P＜0.05),左室短轴观水平整体径向TRS-SD与术前比较差异无统计学意义(P＞0.05).前间隔基底段TRS延迟与左室流出道压差下降呈中等相关(r =0.657,P＜0.01).结论 2D-STI能准确检测HOCM患者化学消融术前后左室收缩同步性.     

二尖瓣环位移对正常胎儿左心功能的定量研究

目的 探讨M型超声心动图测量中晚孕期正常胎儿二尖瓣环位移(MAD)与常规方法评价胎儿左心功能参数之间的关系.方法 用M型超声心动图测量155例孕龄在19～38周的正常胎儿的MAD,脉冲多普勒(PW)测量房室瓣口血流频谱的舒张早期峰值流速(E),组织多普勒(TDI)测量房室瓣环处心肌运动频谱的舒张早期峰值流速(Em)及两者的比值(E/Em),定量分析MAD与孕周及常规胎儿左心功能参数之间的相关性.结果 正常胎儿MAD值为(7.05±1.17)mm.MAD与孕周呈显著正相关(r=0.82,P＜0.01),与其他评价左心功能的指数E、A、Em、Am、Sm呈正相关(r值分别为0.25、0.24、0.32、0.29、0.40,P值均＜0.01),但与E/A、E/Em、左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)无显著相关性(P值均＞0.05).MAD在任何孕周均小于三尖瓣环位移.结论 MAD是评价胎儿长轴方向左室功能有价值的参考标准,正常中晚孕胎儿MAD值随孕周增加而增长,其评价胎儿左室功能与PW二尖瓣口E、A峰值流速及TDI二尖瓣瓣环Em、Am、Sm等传统左室功能评价参数有良a的相关性,与传统方法相比具有更好的简便性及可重复性.     

超声心动图对母体糖耐量异常胎儿心脏结构与功能的定量研究

目的 对母体糖耐量异常(gestational impaired glucose tolerance,GIGT)胎儿的心脏结构和功能进行系统胎儿超声心动图定量分析.方法 选取68例孕龄21～40周GIGT孕妇,并随机选择孕龄匹配的81例无血糖异常孕妇作为对照组.采用胎儿超声心动图进行系统定量检测,包括二维、M型超声心动图测量心脏大小、室壁厚度、左室射血分数及短轴缩短率,脉冲多普勒超声心动图定量主动脉瓣口、肺动脉瓣口及房室瓣口血流速度等系列参数,并采用组织多普勒技术评价胎儿房室瓣环运动,测量舒张早期、舒张晚期及收缩期的峰值运动速度;GIGT胎儿与对照组胎儿间评价心脏形态结构,室壁厚度、收缩及舒张功能参数比较采用独立样本t检验.结果 GIGT胎儿与对照组胎儿相比,心脏形态结构及心室收缩舒张功能各参数差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 多参数定量胎儿超声心动图分析能准确、客观地评估GIGT胎儿心脏结构和功能,有助于此类胎儿的产前咨询.     

miR-124在胃癌中的表达及其临床意义

【目的】探讨miR-124（Homo sapiens miR-124）在胃癌组织中的表达及临床意义。【方法】收集胃癌患者手术标本176例（研究组）,以相应癌旁组织作为正常对照（对照组）,制成组织芯片,运用原位杂交检测胃癌及癌旁组织中miR-124的表达,分析其与胃癌临床病理参数之间的关系。【结果】研究组miR-124阳性表达率18．18％显著低于癌旁对照组86．36％,差异有统计学意义（P〈0．01）;miR-124的表达随着胃癌临床分期演进和浸润深度的增加而下调,各组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）;miR-124的表达与胃癌的分化程度相关,分化越差其表达越低,各组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）;且有淋巴结转移的miR-124的表达显著低于无淋巴结转移组,差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】miR-124的表达下调可能是胃黏膜恶性转变及胃癌发生浸润转移的重要生物学标志。     

二烯丙基二硫化物诱导胃癌BGC823 细胞周期G2/M期阻滞的机制*

目的:以细胞周期作为抗癌药物新靶点的研究,可能是很有前途的。笔者的前期工作发现,二烯丙基二硫化物（diallyl disulfide,DADS）可抑制人胃癌BGC 823 细胞增殖,其增殖抑制与细胞周期G2/M期阻滞有关;DADS可能是通过抑制细胞分裂周期蛋白25C（Cell division cycle protein 25C,Cdc25C）、cyclinB 1 表达使部分BGC 823 细胞停滞在G2/M期,但G2/M期阻滞的机制还未完全阐明。本研究进一步探讨DADS诱导人胃癌BGC 823 细胞周期G2/M期阻滞的可能机制。方法:RT-PCR 检测Chk1 和Chk2 在mRNA 水平的改变;Western blot检测DADS处理BGC 823 细胞前后细胞周期相关蛋白ATM-RAD3 相关基因（ATM-RAD3-related gene,ATR ）、细胞周期检查点蛋白激酶1（checkpoint kinase1,Chk1）、细胞周期检查点蛋白激酶2（checkpoint kinase2,Chk2）表达和ATR 、Chk1、Chk2 的磷酸化程度;免疫共沉淀检测Chk1、Chk2 与Cdc25C 结合情况。结果:RT-PCR 检测显示,Chk1 和Chk2 的mRNA 水平在处理组与未处理组之间无显著性差异（P>0.05）。 Western blot检测显示,总Chk1 和Chk2 蛋白表达在细胞处理前后均无明显改变,但15mg/LDADS刺激BGC 823 细胞2h 后,处理组细胞Chk1 磷酸化程度明显增加,并呈时间依赖性（P<0.05）,而Chk2 磷酸化程度在处理组与未处理组之间无显著性差异（P>0.05）。 15mg/L DADS 作用15～120min,ATR 磷酸化程度明显增加,呈时间依赖性（P<0.05）,而ATR 表达无改变。免疫共沉淀分析表明,DADS 能促进BGC 823 细胞Chk1 与Cdc25C 结合,而对Chk2 与Cdc25C 结合无影响。结论:DAD诱导人胃癌BGC 823 细胞G2/M期阻滞与Chk1 的活化有关,DADS可能是通过激活ATR 、Chk1,调节Cdc25C 的表达引起人胃癌BGC 823 细胞G2/M期阻滞。      

DADS对人结肠癌SW480细胞裸鼠致瘤的影响

目的探讨二烯丙基二硫（DADS）对人结肠癌SW480细胞裸鼠致瘤的影响。方法建立人结肠癌裸鼠移植瘤模型。15只实验裸鼠分为3组,每组5只。观察DADS对裸鼠致瘤的影响,并记录各组裸鼠及其皮下移植瘤的生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算肿瘤体积和肿瘤生长抑制率。光镜下观察移植瘤组织形态学改变,采用免疫组织化学法检测瘤组织内增殖细胞核抗原（PCNA）、p21WAF1蛋白表达情况,应用流式细胞术检测移植瘤细胞周期分布。结果 DADS能明显降低人结肠癌SW480细胞致瘤性,抑制移植瘤生长,降低肿瘤组织异型性,引起细胞周期G2/M阻滞,抑制PCNA蛋白表达,增强p21WAF1蛋白表达。结论 DADS可明显降低人结肠癌SW480细胞的致瘤性,抑制SW480细胞增殖,引起G2/M期阻滞,其可能与抑制PCNA蛋白表达、增强p21WAF1蛋白表达有关。     

二烯丙基二硫对人结肠癌SW480细胞周期的阻滞作用

背景与目的:前期研究表明,二烯丙基二硫(diallyl disulfide.DADS)能有效在体内外抑制人结肠癌细胞增殖,并将细胞阻滞于G2/M期.本实验旨在进一步探讨DADS对人结肠癌SW480细胞周期阻滞作用的可能机制.方法:采用MTT、细胞计数法检测DADS对SW480细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测DADS对SW480细胞周期的影响;免疫细胞化学法检测DADS作用后PCNA、P53表达情况,蛋白印迹法分析P21WAF1、细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)表达的改变.结果:不同浓度DADS作用SW480细胞24、48、72 h后.对细胞增殖的抑制作用及细胞群体倍增时间呈浓度、时间依赖性增加.流式细胞仪分析结果显示,DADS作用SW480细胞后,G0/G1期细胞含量降低.S期细胞比例变化不大,而G2/M期细胞比例则明显增加,且随着处理浓度的增加和处理时间的延长,其G2/M期细胞含量逐渐增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).DADS作用后.免疫细胞化学检测显示,PCNA、P53蛋白表达明显下降.蛋白印迹分析显示,DADS作用SW480细胞后,Cyclin BI蛋白表达明显下降,P21WAF1蛋白的表达明显升高,均呈时间效应关系.结论:DADS可能通过下调PCNA、P53、Cyclin B1蛋白表达.上调P21WAF1蛋白表达引起SW480细胞G2/M期阻滞.