辽宁汉族人群MICA、TNF基因微卫星多态性研究

目的探讨中国北方辽宁汉族人群HLA区域的MICA和TNF基因微卫星多态性分布。方法采用PCR-毛细管电泳方法检测197名正常无关个体的MICA基因第5外显子和TNF基因复合体TNFa微卫星的基因型。应用Arlequin和SPSS软件进行统计分析。结果辽宁汉族人群MICA基因第5外显子存在5种等位基因,其中以A5.1最为常见(34.01%);TNFa位点存在13种等位基因,其中以a6最为常见(33.76%)。辽宁地区和南方部分地区汉族人群MICA基因第5外显子和TNFa位点的等位基因频率分布均具有统计学差异(P<0.01)。MICA基因第5外显子和TNFa位点间存在一定的连锁不平衡,如单体型A5-a6和A5.1-a7(P<0.05)。结论 MICA基因第5外显子和TNFa位点微卫星多态性分布在中国汉族人群中均存在地区差异。     

FK506对肾移植患者Th细胞亚群分化的影响

目的研究抗排斥药物FK506对肾移植患者Th1细胞和Th2细胞分化的影响。方法大连市友谊医院92例肾移植3年以上患者服用FK506前及服用FK5062h后抽血,运用流式细胞仪进行Th1细胞和Th2细胞的检测。计算均值并进行统计学分析。结果服用FK506后,Th1细胞百分率[(8.45±1.57)%]明显低于服用FK506前[(13.66±2.41)%],差异有统计学意义(P<0.05)。服用FK506前,Th2百分率[(1.19±0.36)%]与服用FK506后Th2百分率[(1.21±0.29)%]相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论服用FK5062h后,对肾移植患者的Th1细胞有明显的抑制作用。Th2细胞分化可能不受FK506的影响。     

慢性儿童免疫性血小板减少症差异表达基因的生物信息学分析

目的:探究慢性儿童免疫性血小板减少症(ITP)的关键基因和信号通路,为研究慢性ITP的潜在分子机制提供新的思路。方法:从GEO数据库获得mRNA表达芯片数据集GSE46922,利用GEO2R筛选出DEGs,并利用DAVID对DEGs进行GO功能富集分析和KEGG信号转导通路富集分析。随后,构建PPI蛋白互作网络,筛选核心靶标。结果:筛选出274个表达上调基因,主要参与细胞骨架组构,基于肌动蛋白丝的过程,肌动蛋白纤维组织等生物过程。筛选出496个表达下调基因,主要参与动作电位和肌肉收缩等过程。KEGG分析发现,上调基因主要参与HIF-1信号通路。下调基因主要涉及焦点黏附、Rap1信号通路、PI3K-Akt信号通路、神经信号传递通路、肌动蛋白细胞骨架调控等信号通路。获得11个核心靶标:VEGFA,CCND1,ESR1,MYH14,ERBB2,CDKN3,PVALB,CDC20,CHEK1,MTOR和CFTR。结论:本研究通过生物信息学分析获得慢性ITP的关键基因和信号通路,为研究慢性ITP的发病机制提供了新的思路。核心靶标基因可作为诊断和预后评估的生物标志物。     

MICA第5外显子微卫星多态性与大肠癌易感相关性研究

目的研究MHC-Ⅰ类链相关基因A(MICA)第5外显子微卫星多态性与大肠癌之间的相关性。方法应用荧光PCR微卫星分型技术分析103名大肠癌患者和100名正常人群MICA基因第5外显子微卫星等位基因频率。结果 MICA*A6基因频率在患者组(23.3%)高于对照组(14.5%),相对风险(OR)为1.791 4(P0.05);其余各基因频率在患者组与对照组之间的差异无统计学意义(P0.05)。结论 MICA-STR MICA*A6等位基因多态性与大肠癌相关,MICA*A6是人群个体中1个大肠癌遗传易感标记。     

广西壮族人群13个单核苷酸基因座遗传多态性

目的 采用荧光标记复合扩增单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)体系对广西地区壮族314名个体的13个SNP基因座进行等位基因频率调查,并评价其法医学应用价值.方法 选择13个常染色体双等位基因SNP基因座,应用荧光标记片段长度差异等位基因特异性复合扩增SNP分型体系,对广西地区壮族人群进行群体调查.结果 获得了广西地区壮族人群13个SNP基因座的等位基因频率,13个SNP基因座等位基因频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡,杂合度位于0.2166和0.5478之间,多态信息总量位于0.2084与0.3750之间,13个SNP基因座累积个人识别几率和累积非父排除率均分别达到99.99%和87.71%.结论 用荧光标记复合扩增片段长度差异等位基因特异性PCR法可同时对多个SNP基因座进行分型;13个SNP基因座在法医学个人识别领域具有较高的应用价值.     

-40℃条件下储存不同时间的全血对提取DNA浓度的影响

<正>目前为止中华造血干细胞志愿捐献者资料库已经建库多年,标本保存是采用低温冰箱全血保存法。对于分子生物学实验有时需要长时间的标本积攒,而长时间的低温保存会对这些全血提取后的DNA的浓度产生何种影响,目前国内还未见详细的报道。本实验室就-40℃冰箱保存的人全血进行基因组DNA的提取,将保存时间为年,0～4年的全血     

类风湿关节炎患者Th17细胞与调节性T细胞失衡的研究

目的观察类风湿性关节炎（RA）患者外周血Th17细胞与CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞（Treg）平衡状态与疾病的关系,分析Th17／Treg细胞免疫失衡在RA发病机制中的作用。方法采用流式细胞仪四色荧光抗体标记法分别对47例RA患者和39名健康志愿者（HVs）进行CD3、CD8、IL-17与CD4、CD25、F0xP3标记,测定Th17与调节性T细胞的比例变化及相关细胞因子IL-6、IL-23和IL-17水平。结果RA组患者外周血中,CD3^＋CD8^＋IL-17^＋T细胞占CD3^＋T淋巴细胞的百分比为（1．12±0．38）％,明显高于对照组（0．68±0．29）％（t=1．83,P〈0．05）;CD4’CD25’FoxP3^＋细胞占CD4^＋T淋巴细胞的百分比为（2．74±0．71）％,明显低于对照组（4．69±1．23）％（t=-2．94,P〈0．05）。相关细胞因子测定结果：IL-6水平在RA组为（13．5±3．7）ng／L,正常人为（4．6±0．9）ng／L（t=6．24,P〈0．01）;IL-23水平在RA组为（71±19）ng／L,正常人为（25±6）ng／L（t=14．37,P〈0．01）;IL-17水平在RA组为（122±33）ng／L,正常人为（37±9）ng／L（t=19．01,P〈0．01）;RA患者血清IL-6、IL-23和IL-17水平均明显升高。结论RA患者外周血Th17与CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞数量的异常可能是RA发病的重要因素,IL-6和IL-23的升高是引起这些改变的可能原因。