Immobilization of amyloglucosidase onto macroporous cryogels for continuous glucose production from starch

Poly(methyl methacrylate-glycidyl methacrylate) [Poly(MMA-GMA)] cryogels were synthesized using monomers of methylmethacrylic acid and epoxy group bearing GMA via radical cryopolymerization technique. Synthesized cryogels were used for the immobilization of amyloglucosidase to the cryogel surface using epoxy chemistry. Characterizations of the free and immobilized amyloglucosidase were carried out by comparing the optimum and kinetic parameters of enzymes. For this, pH and temperature profiles of free and immobilized preparation were studied and, it was found that, optimum pH of enzyme was not change upon immobilization (pH 5.0), while optimum temperature of the enzyme shifted 10 °C to warmer region after immobilization (optimum temperatures for free and immobilized enzyme were 55 and 65 °C, respectively). Kinetic parameters of free and immobilized enzyme were also investigated and K_m values of free and immobilized amyloglucosidase were found to be 2.743 and 0.865 mg/mL, respectively. V_max of immobilized amyloglucosidase was found to be (0.496 µmol/min) about four times less than that of free enzyme (2.020 µmol/min). Storage and operational stabilities of immobilized amyloglucosidase were also studied and it was showed that immobilized preparation had much more stability than free preparation. In the present work, amyloglucosidase immobilized poly(MMA-GMA) cryogels were used for continuous glucose syrup production from starch for the first time. Efficiency of immobilized enzyme was investigated and released amount of glucose was found to be 2.54 mg/mL at the end of the 5 min of hydrolysis. The results indicate that the epoxy functionalized cryogels offer a good alternative for amyloglucosidase immobilization applications with increased operational and thermal stability, and reusability. Also, these cryogels can be used for immobilization of other industrially valuable enzymes beyond amyloglucosidase.     

术前3D数字化技术模拟对胫骨平台骨折手术操作、术后关节功能恢复的影响

目的 探讨术前3D数字化技术模拟手术复位及操作对复杂胫骨平台骨折患者的手术效果及关节功能恢复的影响.方法 前瞻性分析2016年2月—2018年8月新疆医科大学第六附属医院骨病矫形外科收治的92例复杂型胫骨平台骨折患者资料,随机数字表法分为3D模拟组(术前CT扫描数据导入Minics软件内进行三维重建模拟骨折复位、手术入路等操作)、对照组(常规手术治疗)各46例.3D模拟组男性28例,女性18例;年龄26～62岁,平均42.2岁.对照组男性26例,女性20例;年龄26～65岁,平均41.1岁.患者分别于术后4、6个月到门诊接受膝关节功能测定,比较两组患者的手术操作相关指标、术后膝关节功能、胫骨平台内翻角(TPA)、胫骨平台后倾角(PA)的变化及手术并发症.结果 3D模拟组患者的手术时间、术中出血量、术中透视时间均少于对照组[(108.6±16.2)min vs.(119.4±20.0)min、(180.5±36.1)mL vs.(224.3±40.6)mL、(90.6±11.7)min vs.(102.5±14.3)min,P<0.05],3D模拟组患者的解剖复位率高于对照组(93.48％vs.78.26％,P<0.05);术后4个月,3D模拟组患者的Lysholm评分高于对照组[(78.33±8.61)分vs.(74.18±9.25)分,P<0.05],术后6个月,3D模拟组患者的Lysholm评分与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);手术后即刻、术后4、6个月,3D模拟组和对照组的膝关节TPA、PA角比较差异无统计学意义(P>0.05);3D模拟组的手术并发症发生率4％与对照组9％比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 术前3D数字化技术模拟手术复位及操作有利于减少复杂胫骨平台骨折患者手术操作的难度,提高解剖复位率,促进早期膝关节功能的恢复.     

基于转录组测序筛选和田羊毛囊周期性变化过程中差异表达miRNAs以及初步分析

为了探讨miRNAs在和田羊毛囊周期性变化中皮肤组织的表达差异,同时预测其在和田羊毛囊周期性变化过程中发挥的潜在功能.本研究选取和田羊毛囊周期性变化的生长期(P1、5月份、n=3)、退行期(P2、10月份、n=3)以及休止期(P3、次年1月份、n=3)的皮肤毛囊组织为材料进行转录组测序和分析.结果共鉴定了143个已知miRNAs并预测了759个新miRNAs,显示相较于P1组,P2组共鉴定了173个显著差异表达miRNAs,其中包含7个显著上调的miRNAs与166个显著下调的miRNAs;而在P3组中鉴定了243个差异表达miRNAs,其中包含28个显著上调的miRNAs与215个显著下调的miRNAs;相较于P2组,P3组共鉴定了71个显著差异表达miRNAs,其中包含23个显著上调的miRNAs与48个显著下调的miRNAs.针对差异表达miRNAs进行靶基因预测和功能分析,发现靶基因显著富集在与毛囊发育相关的激素水平调节、细胞分解代谢、周期蛋白结合、骨细胞发育等GO条目中以及与毛囊发育相关的AMPK、Hedgehog、TNF等信号通路中.在和田羊毛囊周期性变化过程中差异表达miRNAs可能通过以上通路调控靶基因的表达进而参与和田羊毛囊的周期性变化过程.     

新疆温宿县博孜墩乡黄牛同期发情试验效果分析

新疆温宿县博孜墩乡是山区牧业乡,因为交通不便,难以开展人工授精,牛改良程度很低,养牛收益很差。为了加快山区黄牛改良速度,增加牧民收入,我们在该乡牛群比较集中的两个行政村农户家筛选174头母牛进行同期发情后人工授精处理。通过分析同期发情率和受胎率,判断山区牛群同期发情效果。结果表明:这次试验同期发情率为70.68%,受胎率为74.7%。结论:通过现有技术的组装配套,同时加大科普推广和培训力度,可以提高山区黄牛改良速度,提高农牧民饲养管理水平和接受科学能力,从而改善当地传统的改良和饲养管理方式,促进农牧民增收。     

哈萨克族成人指骨长度的X线测量及其与身高的性别判别

目的 探讨新疆哈萨克族成人指骨长度与身高的依存关系。方法 随机选择健康哈萨克族成人200人（男100人,女100人）,进行双手后前位X线拍片,分别测量各节指骨长度和对应的身高。计算各节指骨长度的均值、标准差和标准误,并且从各节指骨长度推断身高的性别判别方程。结果 男性和女性各节指骨长度之间的差异有统计学意义（P＜0.01）。经相关分析建立了哈萨克族成人指骨长度推断身高的4个性别判别方程（Y₁＝0.780ZM₁＋3.146YM₂＋1.594YS₁＋0.618ZS₃＋0.045YX₁＋1.891ZX₁＋2.548ZX₃-135.324, Y₂＝0.3450ZM₁＋2.328YM₂＋1.814YS₁＋1.355ZS₃＋0.714YX₁＋1.461ZX₁＋1.580ZX₃-118.678, Y₃＝3.540SG＋0.859YM₂-1.882ZS₂＋0.640YZ₁-5.598YZ₂＋5.794ZZ₂＋0.807YZ₃＋0.695ZX₁-391.229, Y₄＝3.284SG＋0.313YM₂-1.595ZS₂＋1.113YZ₁-3.869YZ₂＋4.959ZZ₂＋5.244YZ₃＋0.353ZX₁-340.001）。 结论 所得性别判别式对法医学性别判别应用价值较大,为体质人类学和法医学提供了有关新疆哈萨克族人的解剖学资料。     

miR-708-5p通过靶向URGCP抑制非小细胞肺癌A549细胞侵袭、转移的研究

目的 探讨miR-708-5p对非小细胞肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及其与上调基因-4(upregulated gene-4/upregulator of cell proliferation,URG4/URGCP)的靶向关系.方法 选取非小细胞肺癌细胞株A549,正常肺成纤维细胞HLF-1为研究对象,根据A549细胞转染物质的不同,分为Control组(未进行任何处理),NC组(转染随机序列RNA Oligo),miR-708-5p组(转染miR-708-5p mimics).MTT检测增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,Transwell小室实验检测侵袭能力,划痕实验检测迁移能力,Western blot检测URGCP表达水平;实时荧光定量PCR检测miR-708-5p、URGCP基因mRNA表达水平;荧光素酶实验验证miR-708-5p与URGCP的靶向关系.结果 与HLF-1细胞株相比,肺癌细胞株A549细胞miR-708-5p表达水平降低,URGCP-mRNA表达升高(P<0.05),同时,URGCP蛋白水平升高.转染72h后,与Control、NC组比较,miR-708-5p组细胞URGCP基因mRNA明显降低,URGCP蛋白表达量明显降低(P均<0.01).miR-708-5p组细胞增殖、迁移和侵袭能力明显低于Control、NC组(P<0.05).与WT-URGCP组相比,miR-708-5p+WT-URGCP组细胞荧光素酶活性明显降低(P<0.01).结论 miR-708-5p在非小细胞肺癌A549细胞中低表达,过表达miR-708-5p可抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭,机制可能与负性调控URGCP有关.     

香叶氧基香豆素衍生物Auraptene对恶性淋巴瘤细胞毒性、凋亡、侵袭的影响

目的 研究香叶氧基香豆素衍生物(AUR)对恶性淋巴瘤细胞毒性、细胞凋亡和侵袭的作用.方法 使用不同浓度AUR处理恶性淋巴瘤细胞JeKo-1、SNK6、SU-DHL-4,使用Glomax发光系统细胞活力检测试剂盒检测AUR对淋巴瘤细胞株活力的影响;使用流式细胞术检测JeKo-1的细胞周期进程变化和凋亡率变化;分别使用伤口愈合实验和有基质胶涂层的Transwell侵袭实验检测细胞的迁移率和侵袭率变化.结果 50～100μmo]/L AUR对JeKo-1、SNK6、SU-DHL-4细胞活性均有明显的抑制作用,24 h时IC50浓度分别约为58、67和113μmol/L,其中JeKo-1细胞对AUR敏感性较强.50μmol/L AUR抑制JeKo-1细胞G0/G1向G2/M期的细胞周期的进展,促进JeKo-1细胞的凋亡和caspase-3/7的活力.AUR对JeKo-1细胞的迁移率影响较小,然而AUR可抑制细胞的侵袭率和MMP-2,MMP-9,VEGF-A的蛋白表达水平(P＜0.05).结论 香叶氧基香豆素衍生物增加恶性淋巴瘤细胞凋亡率,抑制G0/G1向G2/M期的细胞周期进展和细胞侵袭率.     

DZIP1通过影响Wnt/β-catenin信号通路促进口腔鳞状细胞癌增殖、迁移和侵袭

目的　探究DZIP1通过Wnt/β-catenin信号通路对口腔鳞状细胞癌增殖、迁移和侵袭的影响。方法　实时荧光定量PCR和Western blot检测DZIP1和Wnt/β-catenin信号通路相关基因mRNA表达和蛋白表达,CCK-8检测细胞活力,克隆形成实验检测口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果　与人口腔角质形成细胞相比,人OSCC细胞系TSCCA,Tca8113和SCC25中DZIP1的mRNA表达和蛋白表达均显著升高;与阴性对照组（negative control,NC）相比,敲低DZIP1显著降低SCC25细胞Wnt/β-catenin信号通路相关基因的mRNA表达和蛋白表达（P<0.05）,显著降低细胞活力（P<0.05）,显著抑制细胞增殖（P<0.05）,显著降低细胞迁移和侵袭能力（P<0.05）,LiCl显著升高SCC25细胞Wnt/β-catenin信号通路相关基因的mRNA表达和蛋白表达（P<0.05）,显著升高细胞活力（P<0.05）,显著促进细胞增殖（P<0.05）,显著升高细胞迁移和侵袭能力（P<0.05）;与si-DZIP1组相比,si-DZIP1+LiCl显著升高SCC25细胞Wnt/β-catenin信号通路相关基因的mRNA表达和蛋白表达（P<0.05）,显著升高细胞活力（P<0.05）,显著促进细胞增殖（P<0.05）,显著升高细胞迁移和侵袭能力（P<0.05）。结论　DZIP1通过影响Wnt/β-catenin信号通路促进口腔鳞状细胞癌增殖、迁移和侵袭。     

混合牙列ⅢA期个别正常牙合下颌牙弓及基骨弓的形态研究

目的:通过三维数字化测量对混合牙列ⅢA期个别正常牙合下颌牙弓及基骨弓形态的测量比较,分析混合牙列ⅢA期个别正常牙合下颌牙弓、基骨弓形态相关性,以期对临床及科研工作提供理论依据和参考.方法:选取就诊于新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)儿牙预防科符合要求的儿童92例(男44例,女48例),制取石膏模型,采用三维数字化扫描及测量软件进行测量:获得下颌牙弓、基骨弓标志点之间的直线距离和距离差值;对下颌牙弓、基骨弓形态参数进行Pearson相关性分析,并得出拟合曲线图.结果:(1)FA'点至WALA'点距离差值从乳尖牙区开始向磨牙区数值逐渐增大.FA点与WALA点之间的直线距离由下颌中切牙至下颌第一恒磨牙距离逐渐减小,直线距离在男女之间无统计学差异(P>0.05).(2)下颌牙弓、基骨弓前段、中段、后段长度与宽度之间均相关性显著,具有统计学意义(P<0.01).下颌牙弓、基骨弓中段、后段宽度高度相关关系(r=0.842,r=0.882),其余测量指标之间均为中度相关关系.结论:混合牙列ⅢA期个别正常牙合下颌牙弓、基骨弓形态密切相关,并得出新疆乌鲁木齐地区混合牙列ⅢA期个别正常牙合下颌牙弓FA点与基骨弓WALA点的距离差值的正常值范围.     

中国新疆地区成人健康上颌前牙唇侧牙槽骨厚度的CBCT评价

目的:应用CBCT评价中国新疆地区成人健康上颌前牙唇侧牙槽骨厚度.方法:选取咬合正常且上前牙健康的200例成人的CBCT图像.测量双侧上中切牙、上侧切牙及上尖牙的唇面3个位点:牙槽嵴顶下方1mm唇侧根面(ML1)、根中1/2唇侧根面(ML2)及根尖(ML3)至牙槽骨唇侧骨壁的距离.结果:ML1、ML2、ML3的平均值(mm)分别为中切牙(1.27±0.55)、(0.92±0.53)、(1.66±0.83)mm,侧切牙(1.19±0.56)、(0.73±0.53)、(1.59±0.77)mm,尖牙(1.36±0.57)、(0.96±0.57)、(1.73±0.96)mm.其中侧切牙ML2小于中切牙ML2(P<0.05),尖牙ML1、ML2大于中切牙ML1、ML2(P<0.05).左右同名牙在同一位点左右侧均无统计学差异(P>0.05),不同位点比较具有统计学差异(P<0.05).男性中切牙ML3、尖牙ML2大于女性(P<0.05).汉族中切牙ML3、尖牙ML3小于维吾尔族(P<0.05).31～40岁中切牙ML2、ML3,侧切牙ML3、尖牙ML3均小于18～30岁,41～50岁尖牙ML3大于31～40岁(P<0.05).结论:中国新疆地区成人健康上颌前牙唇侧牙槽骨厚度普遍较薄,上颌尖牙唇侧牙槽骨厚度汉族和维吾尔族之间存在差异.