p38 MAPK信号转导通路在骨关节炎中的相关研究

骨关节炎(osteoarthritis,OA)又称骨关节病、骨性关节炎,是机械性和生物性因素的共同作用,破坏关节软骨细胞、细胞外基质和软骨下骨正常合成与降解偶联的结果[1].根据流行病学研究,我国60岁以上的人群患病率可达50％,75岁以上的人群高达80％,该病的致残率高达53％[2].随着社会老龄化人口的增加,OA的发病率呈逐年上升趋势,故它不仅是医学问题,而且也成为社会问题,日益引起人们的重视.近年来,从p38 MAPK信号转导通路研究OA的发病机制与防治越来越广泛,现综述如下.     

痛风宁颗粒对急性痛风性关节炎模型大鼠关节局部炎证因子及TLRs/MyD88的影响

目的 探讨痛风宁颗粒对急性痛风性关节炎的抗炎机制. 方法 36只雄性SD大鼠,随机设立正常组、模型组、痛风宁颗粒组及秋水仙碱组,以尿酸钠混悬液关节腔注射建立急性痛风性关节炎动物模型,运用病理学、放射免疫及RT-PCR等技术方法,观测大鼠膝关节液中性粒细胞数、TNF-α、IL-1β含量及关节滑膜组织TLR-2、4及MyD88 mRNA的表达情况. 结果 痛风宁颗粒能显著降低急性痛风性关节炎模型大鼠关节液中中性粒细胞数、TNF-α、IL-1β含量及滑膜组织TLR-2、4及MyD88 mRNA的表达. 结论 痛风宁颗粒对急性痛风性关节炎的抗炎机制可能是通过抑制TLR-2、4及MyD88基因的表达,阻止TLRs/MyD88信号通路的激活,减少TNF-α、IL-1β的生成,进而减轻急性痛风性关节炎症反应.     

Ⅱ型胶原酶消化法培养兔关节软骨细胞

背景：目前关节软骨细胞的分离培养技术已经比较成熟,但是研究中发现通过目前技术培养的软骨细胞生长周期慢,容易出现退变现象,不利于后续试验的进行。 目的：改进并探讨4周龄新西兰大白兔膝关节软骨细胞的分离与培养的方法。 方法：无菌条件下取4周龄新西兰大白兔双侧膝关节软骨,采用Ⅱ型胶原酶消化并机械吹打的方法,分离关节软骨细胞并进行原代、传代培养;采用形态学观察,甲苯胺蓝染色以及Ⅱ型胶原免疫组织化学方法对关节软骨细胞进行鉴定;MTT法检测关节软骨细胞增殖情况。 结果与结论：倒置显微镜下见膝关节软骨分离的原代软骨细胞6 h后开始贴壁,72 h可形成单层,96 h即可传代;前3代软骨细胞表型稳定,增殖力良好;第4,5代软骨细胞增殖能力减弱,绝大部分细胞变为长梭形和不规则形状。甲苯胺蓝染色显示培养的软骨细胞细胞质染成浅蓝色,细胞核染成深蓝色;免疫组织化学显示软骨细胞Ⅱ型胶原呈黄褐色阳性表达;MTT法检测表明前3代软骨细胞增殖差异无显著性意义(P > 0.05),且第1-3代与4代软骨细胞在培养第4-7天时,吸光度值差异有显著性意义(P < 0.05),与第5代软骨细胞在培养1-7天时,吸光度值差异有显著性意义(P < 0.05)。提示采用Ⅱ型胶原酶消化并机械吹打的方法能够获得大量生长速度快且不宜退变的新西兰大白兔膝关节软骨细胞,且培养的前3代新西兰兔膝关节软骨细胞最为适宜。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

痛风宁对急性痛风性关节炎模型大鼠IL-1β,TNF-α及NALP3炎性体的影响

目的:从核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NALP3)炎性体角度探讨痛风宁的抗炎作用机制。方法:将48只SD大鼠随机分为造模大鼠36只、正常大鼠12只。造模大鼠采用踝关节局部注射0.2 mL尿酸钠(monosodium urate,MSU)混悬液建立急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)模型,正常大鼠予相同部位注射生理盐水。造模成功后,随机分为模型组、痛风宁组、秋水仙碱组,分别用生理盐水、痛风宁药液、秋水仙碱混悬液灌胃,每天2次,共3 d。正常大鼠为正常组,同时予等量生理盐水灌胃。造模成功后72 h,行腹腔注射麻醉后取踝关节液及滑膜组织。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠踝关节液白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测滑膜组织NALP3炎性体相关蛋白与mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠踝关节液IL-1β,TNF-α含量显著升高,滑膜组织NALP3,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1),凋亡相关斑点样蛋白(ASC)蛋白及mRNA表达均显著增加(P0.01);与模型组比较,痛风宁组与秋水仙碱组大鼠踝关节液IL-1β,TNF-α含量显著下降,且滑膜组织中NALP3,Caspase-1,ASC蛋白及mRNA表达均显著降低(P0.01);与秋水仙碱组比较,痛风宁组大鼠踝关节液IL-1β,TNF-α含量仍较高(P0.05),但滑膜组织中NALP3,Caspase-1,ASC蛋白及mRNA表达均较低(P0.05,P0.01)。结论:痛风宁对AGA的抗炎作用机制可能是通过抑制NALP3炎性体相关蛋白及mRNA表达,从而减少IL-1β,TNF-α的生成,减轻关节炎症反应。     

马钱子总碱对兔膝骨关节炎模型软骨损伤修复作用及机制

目的探讨马钱子总碱对兔膝骨Hulth-Telhag关节炎模型的作用及机制。方法新西兰兔随机分为正常对照组,模型组,假手术组,马钱子总碱高、中、低剂量组,玻璃酸钠组,每组8只。除正常对照组外,其余各组均以Hulth-Telhag方法造模。造模8周后,马钱子总碱高、中、低剂量组分别给予兔每个膝关节腔注射0.3、0.2、0.1mL马钱子总碱注射液,玻璃酸钠组给予兔每个膝关节腔注射0.2mL玻璃酸钠,每周2次,连续用药5周。正常对照组、模型组及假手术组常规饲养,无其他特殊处理。停药1周后光镜观察关节软骨病理改变和Mankin′s评分,血液流变仪检测全血黏度(低切、中切、高切)及血浆黏度,ELISA检测关节液NO、SOD、过氧化脂质(LPO)及尿液吡啶酚(PYD)含量。结果与正常对照组比较,模型组Mankin′s评分、全血黏度、血浆黏度、NO、LPO及PYD升高(P0.05),SOD降低(P0.05)。与模型组比较,马钱子总碱高、中剂量组及玻璃酸钠组Mankin′s评分降低(P0.05);各给药组全血黏度、血浆黏度、NO、LPO及PYD降低(P0.05),SOD升高(P0.05)。马钱子总碱中剂量组较低剂量组中、高切变率全血黏度、SOD升高(P0.05),NO、LPO及PYD降低(P0.05);马钱子总碱高剂量组较中剂量组全血黏度、血浆黏度升高(P0.05),NO、LPO及PYD降低(P0.05),SOD升高(P0.05)。与玻璃酸钠组比较,马钱子总碱低剂量组Mankin′s评分、NO、LPO及PYD升高(P0.05),SOD降低(P0.05);马钱子总碱中剂量组Mankin′s评分、SOD降低(P0.05),NO、LPO及PYD升高(P0.05);马钱子总碱高剂量组Mankin′s评分、全血黏度及血浆黏度升高(P0.05)。结论马钱子总碱对骨关节炎的软骨损伤具有修复作用,其机制主要与通过SOD途径抑制NO介导的软骨细胞凋亡有关,还与改善软骨代谢有关。     

人正常及骨关节炎关节软骨细胞的体外分离培养及鉴定

目的评价经验性抗感染治疗社区获得性肺炎（CAP）的临床疗效。方法以急诊内科病房CAP患者97例为研究对象,依据肺炎严重指数（PSI）分为低、中、高危人群,应用相应的抗感染治疗方案（阿奇霉素、或联合二、三、四代头孢茵素）,评价其疗效。结果97例患者中,应用相应的抗感染治疗方案后7天好转率（有效＋显效）为63．9％（62例）、临床治愈率为33．O％（32例）,总有效率（好转＋治愈）为96．9％（94例）;其中14天治愈率为30．9％（30例）;21天治愈率为10．3％（10例）。结论阿奇霉素、或联合二、三、四代头孢菌素经验性抗感染治疗CAP疗效确切可靠。     

补骨合剂调节大鼠骨髓间充质细胞分化机制的研究

目的：应用体外培养骨髓间充质细胞，在细胞和分子水平观察补骨合剂对细胞分化的影响，探讨补骨合剂治疗骨质疏松症的机制。方法：分离SD大鼠骨髓间充质细胞，通过形态学、碱性磷酸酶、细胞内骨钙素、转化生长因子β1基因表达等指标，对重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP2)诱导下的骨髓间充质细胞向成骨细胞分化的程度进行探讨。结果：一定浓度的补骨合剂可促进分化中的骨髓间充质细胞分泌碱性磷酸酶和骨钙素，增强rhBMP2的活性，促进分化中的骨髓间充质细胞表达转化生长因子β1，补骨合剂的这种促进骨髓间充质细胞分化作用与密钙息基本相同。结论：补骨合剂不仅可以增强rhBMP2的活性，促进分化中的骨髓间充质细胞表达转化生长因子β1，大量分泌Ⅰ型胶原，以利于钙盐沉积；还可以促进rhBMP2诱导的骨髓间充质细胞分泌碱性磷酸酶和骨钙素，促进骨髓间充质细胞向成骨细胞表型分化．从而促进钙、磷在骨表面沉积。     

膝骨性关节炎中IL-1的调控及其干预进展

膝骨性关节炎（knee osteoanhritis，0A）为中老年人的常见病，病因及发病机制尚未完全明确。其病理特点是关节软骨变性、破坏，软骨下骨硬化，关节边缘和软骨下骨反应性增生，骨赘形成等^[1]。许多研究表明，IL-1与膝OA以上病理均密切相关．抑制或减少IL-1产生的药物能够缓解膝OA的症状．减缓膝OA进展^[2]。现对膝OA发病中IL-1的作用机制及中医药干预概况作一综述。     

基于LXRs/NF-κB通路探讨壮骨健膝方对兔膝骨关节炎滑膜组织炎症的影响

目的:从兔滑膜组织的炎症调控及LXRs/NF-κB通路关键节点蛋白的表达情况探讨壮骨健膝方对兔膝骨关节炎(KOA)滑膜组织炎症的干预效应及机制.方法:制备兔空白血清及含药血清以备滑膜组织干预使用.将22只兔按照随机数字表法分为造模组16只和空白组6只,造模组予右后肢膝关节腔注射木瓜蛋白酶制备KOA模型,模型鉴定成功后,...     

强骨宝1号对去卵巢骨质疏松大鼠腰椎松质骨蛋白质组的影响

目的 从差异蛋白质组角度探讨去卵巢腰椎骨质疏松症及强骨宝1号干预的内在机制.方法 建立去卵巢大鼠骨质疏松症模型,设立假手术组、模型组及中药组,双相电泳技术展示腰椎松质骨蛋白质组图谱,比较各组间差异蛋白点并进行质谱分析及初步鉴定.结果 3组电泳图谱的蛋白点均为600个,与发病相关的有6个;与中药干预相关的有7个.结论 角蛋白、果糖二磷酸醛缩酶、肌动蛋白、ATP合酶α-亚单位、α-烯醇化酶、蛋白二硫键异构酶表达改变可能与骨质疏松发病有关,血清白蛋白、ATP合酶β-亚单位、碳酸酐酶、晶体蛋白β-链、过氧化还原酶-6、β-烯醇化酶、肌动蛋白表达改变可能与强骨宝1号干预效应有关.