87例CD4+T淋巴细胞低水平AIDS患者机会性感染临床分析

目的分析CD4^＋T淋巴细胞低水平AIDS患者机会性感染的临床特点及治疗效果,以提高临床诊疗水平。方法收集我院感染科就诊的87例CD4^＋T淋巴细胞低于100／td的AIDS患者的临床资料,回顾性分析其机会性感染谱及预后情况。结果87例中67例发生机会性感染,主要临床表现为：发热、咳嗽、消瘦、乏力、口腔白斑、头晕、呕吐、气短、腹泻、皮疹、淋巴结肿大等;主要机会性感染依次为：细菌性肺炎、口腔念珠菌感染、肺结核、带状疱疹、肺孢子菌肺炎等。总共发生107例次机会性感染,在接受对症治疗的70例次中,治愈或好转59例次,治疗无效8例次;3例因机会性感染死亡。发生过多种机会性感染的患者与未发生机会性感染患者相比,有较低的CD4＋T淋巴细胞水平及较高的病毒载量,但并未显示出统计学差异。结论CD4＋T淋巴细胞低水平的AIDS患者易发各种机会性感染,发生率为77．01％,临床症状复杂多样。早期发现、早期诊断、早期治疗机会性感染对降低AIDS患者的病死率,提高其生活质量尤为重要。     

人中性粒细胞多肽1,3真核表达载体的构建与鉴定

目的：扩增人中性粒细胞多肽1，3(HNP1，3)基因片段，构建真核表达载体pcDNA3．1／V5-His-TOPO／HNP1，3。方法：从健康人中性粒细胞中提取总RNA，用RT-PCR方法扩增出HNP1，3基因完整的cDNA片段，应用TA克隆插入pMD18-T载体，经酶切鉴定及序列分析确证后，将其亚克隆至真核表达载体pcDNA3．1／V5-His-TOPO中。结果：从人中性粒细胞中克隆出人HNPl1，3基因，经测序分析与GenBank公布的人HNP1，3核苷酸序列同源性为100％，成功地构建了真核表达载体pcDNA3．1／V5-His-TOPO／HNP1，3。结论：真核表达载体pcDNA3．1／V5-His-TOPO／HNP1，3的成功构建，为后续重组基因的真核／表达及其对HIV-1抑制作用的研究奠定了实验基础。     

Expression of HNP1cDNA in CHO-dhfr^- cells

Objective: To prepare secretary recombinant human neutrophil peptidel (HNP1)and test its antimicrobial activity. Methods: The eukaryotic expression vector pcDNA3. 1/V5-His-TOPO-HNP1 was cotransfected with plasmid pDCH1P11 carrying dhfr gene into dhfr- negative CHO (CHO-dhfr- ) cells and recombinant protein was verified by ELISA; G418 selective medium was used to screen the stably expressing cell clones followed by serial passages in 5×10-8 mol/L and 5×10 mol/L methotrexate (MTX) for gene amplification. Finally 4 cell clones with high expression level were obtained and confirmed by ELISA, RT-PCR and IFA. The bacteriastatic activity of concentrated supernatants was tested in vitro as well. Results: The expression level of recombinant HNPl ranged from 18.85 mg/L·48 h to 47.46 mg/L·48 h per 106 cells that was almost 200-fold increase than that in G418 selective medium. 303 bp segments were amplified from 4 stably tranfec tant clones which matched the length of HNPl cDNA by RT-PCR. Strong fluorescence was     

HBV相关慢加急性肝衰竭患者短期预后的影响因素分析

目的分析探究影响HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)短期预后的危险因素。方法收集2009年1月—2019年12月西安交通大学第二附属医院收治的240例非肝移植HBV-ACLF患者的临床资料,按照入院后28 d和90 d存活情况进行分组(28 d:生存组164例,死亡组76例;90 d:生存组140例,死亡组100例)。收集患者发病诱因、肝功能指标、MELD评分、MELD-Na评分和出现的并发症等资料。计量资料用2组间比较采用Mann-Whithey U检验,计数资料2组间比较采用χ^2检验。根据ROC曲线,计算ROC曲线下面积(AUC),采用约登指数确定临界值,HBV-ACLF短期预后的危险因素分析采用logistic多因素回归分析。结果HBV-ACLF患者的诱因主要包括HBV自发激活(55.6%)、核苷类似物停药或耐药引起HBV激活(25.2%)等。依28 d存活情况分组,基线资料中年龄、PTA、NLR、血钠、MELD评分、MELD-Na评分、TBil水平2组间比较差异均有统计学意义(Z值分别为-2.400、-6.015、-5.070、-5.103、-5.044、-7.430、-6.637,P值均<0.05);依90 d生存情况分组,基线资料中年龄、PTA、NLR、血钠、MELD评分、MELD-Na评分、TBil、胆固醇水平2组间比较差异均有统计学意义(Z值分别为-2.205、-7.728、-3.335、-4.015、-6.053、-7.908、-6.655、-3.607,P值均<0.05)。logistic多因素回归分析显示,TBil>260.20 mmol/L、PTA<24.8%、NLR>5.63、血钠<130.8 mmol/L、MELD>17.84分、MELD-Na>25.1分是影响患者28 d生存的独立危险因素[OR(95%CI)分别为4.572(1.321~15.823)、8.934(3.026~26.374)、2.632(1.126~6.152)、27.467(6.113~123.423)、4.303(1.048~17.663)、3.453(1.614~7.387),P值均<0.05];TBil>260.20 mmol/L、PTA<25.5%、血钠<135.3 mmol/L、MELD>17.84分、MELD-Na>25.1分是影响患者90 d生存的独立危险因素[OR(95%CI)分别为5.148(1.918~13.822)、15.718(5.161~47.866)、10.080(3.244~31.323)、11.157(2.580~48.254)、4.391(2.057~9.372),P值均<0.05]。240例患者中160例(66.7%)90 d内发生感染,其中细菌感染140例、病毒感染12例,真菌感染8例。160例出现感染的患者其90 d病死率显著高于无感染的患者(46.3%vs 32.5%,χ^2=6.720,P=0.010)。240例患者中176例28 d内出现腹水,44例出现胸腔积液,36例发生急性肾损伤,60例发生肝性脑病,12例发生消化道出血,2组间急性肾损伤、Ⅲ~Ⅳ度肝性脑病、消化道出血所占比例比较差异均有统计学意义(χ^2值分别为64.088、29.811、7.797,P值均<0.05)。结论HBV-ACLF患者基线TBil、PTA、血钠、MELD评分、MELD-Na评分是影响患者28 d和90 d预后的独立危险因素。HBV激活引起的肝脏炎症坏死是ACLF的始动因素,而感染、急性肾损伤、肝性脑病和消化道出血是影响患者预后的主要的并发症。     

血色病患者临床表现及病理学特征分析

目的探讨血色病的临床特点，评价铁生化指标、腹部影像学、肝脏活组织病理学检查在血色病诊断中的作用。方法回顾性分析4例诊断为血色病临床资料完整的患者，对其临床特点、铁生化指标、腹部影像学、病理组织学和特殊染色及超微结构的特点进行分析。结果遗传性和继发性血色病各2例。腹胀、乏力、肝脾肿大、皮肤色素沉着为其常见临床表现；2例患者肝硬化，2例患者心脏扩大，1例患者出现心包积液伴有多发性关节炎。2例患者血清铁升高，3例患者转铁蛋白饱和度升高，4例患者血清铁蛋白均〉1000ng／ml。2例肝穿病理检查均显示肝铁过多沉积。4例患者均存在不同程度贫血。结论血色病在我国较少见，除临床特点不明显诊断困难以外，与临床医生对该病认识不足亦有关，提高临床医生对血色病的认识可能有利于疾病的早期诊断。     

基于Flash的Director与外部程序消息传递方法

利用Flash的LocalConnection对象之间可以通信的特点,结合实践详细介绍了实现Director程序和其他程序(Delphi语言编写的程序)之间进行消息传递的通信方法及步骤.     

艾滋病病毒／丙型肝炎病毒双重感染者的艾滋病病毒特异性CTL应答

目的探讨中国艾滋病病毒/丙型肝炎病毒（HIV/HCV）双重感染患者HIV特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）应答的特征。方法观察对象为HIV/HCV双重患者、单纯HIV感染者。以HIV-1 B亚型构建的全基因组肽库作为抗原,通过酶联免疫斑点（ELISPOT）法检测HIV/AIDS患者HIV特异性CTL应答。并对HIV/HCV双重感染患者的HIV特异性CTL应答进行相关性分析。结果 HIV/HCV双重感染组和单纯HIV感染组的HIV特异性CTL应答强度与频率在肽段水平存在一定差异,与单纯HIV感染组相比,合并HCV感染组反应增强的肽段主要集中在Gag。两组特异性CTL应答强度与频率均呈明显正相关,且合并HCV感染组较单纯感染组正相关性增强。不同肽段累计反应强度的比较,Gag反应强度最高,其次是Nef。CD4计数与特异性CTL应答强度的关系无统计学意义。结论 HIV/HCV双重感染患者HCV对HIV进程的影响可能与对Gag蛋白CTL应答的增强有关。     

TGF-β1多肽疫苗抗肝纤维化的鉴定

目的 鉴定转化生长因子β1（TGF-β1）的优势抗原表位偶联钥孔戚血蓝素（KLH）蛋白人工合成多肽疫苗对SD大鼠的免疫原性,并探讨对SD大鼠实验性肝纤维化的抑制效应.方法 人工合成TGF-β1优势抗原表位多肽偶联KLH蛋白后,作为多肽疫苗免疫SD大鼠.40只SPF级SD大鼠随机分为4组,即正常对照组、佐剂对照组、造模组（CCl4诱导）、多肽疫苗组,每组各10只,采用CCl4复合因素诱发大鼠肝纤维化模型.多肽疫苗组动物第1、14、28天连续三次每次腹股沟处及腋窝处多点注射50 μg 0.5ml乳剂（相同体积的弗氏佐剂加合成肽）,此后每隔7d免疫一次无任何佐剂的合成肽（50 μg0.5 ml水剂）,共免疫10周;造模组及多肽疫苗组自第3周起首次皮下注射40％ CCl4橄榄油溶液2 ml/kg,以后每周2次背部皮下注射40％ CCl4橄榄油溶液1.5 ml/kg、30％乙醇6 ml/kg隔日灌胃并给予高脂饮食连续造模8周.正常对照组大鼠同时给予相同剂量的橄榄油溶液皮下注射;佐剂对照组大鼠同期给予注射用水加弗氏佐剂0.5ml乳剂.第10周处死所有大鼠,ELISA检测血清TGF-β1抗体、肝纤维化指标（HA、Ⅳ-C）,全自动生化仪检测血清ALT、AST、TBIL、ALB和GLB,碱水解法检测肝脏羟脯氨酸（Hyp）含量,并进行肝脏病理检查.结果 TGF-β1多肽疫苗可以诱导SD大鼠产生一定量的抗TGF-β1抗体,但是与对照组比较没有统计学差异（P＞0.05）.多肽疫苗组生化指标ALT、AST、TBIL与造模组比较有统计学差异（P＜0.05）,但是血清HA、Ⅳ-C含量及肝脏Hyp含量与造模组相比并没有统计学差异（P＞0.05）.HE、VG染色可见多肽疫苗组较造模组肝组织病理变化及纤维化程度无明显差异.结论 TGF-β1多肽疫苗可以诱导SD大鼠产生一定量的抗TGF-β1中和抗体,且可能具有保肝作用,但其干预治疗实验性大鼠肝纤维化的疗效较差,有待进一步研究.     

咖啡酸苯乙酯对实验性肝损伤大鼠的保护作用

目的 探讨不同给药途径及不同剂量咖啡酸苯乙酯(CAPE)对四氯化碳(CCl4)等复合因素诱导大鼠肝损伤的保护作用.方法 选取95只雄性SD大鼠,随机分为9组,A:正常对照组;B:溶剂对照组,皮下注射橄榄油,腹腔注射10％乙醇;C:单纯模型组,腹腔注射10％乙醇;D:维生素E组,腹腔注射维生素E 10 mg/kg,1次/...