Tat-LK15运载siRNA沉默RGC-5神经细胞nNOS基因的实验研究

目的探讨离体条件下细胞穿透肽Tat-LK15运载小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)沉默RGC-5视神经节细胞(retinal ganglion cell line,RGC-5)神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,n NOS)基因的可行性,为在体条件下研究Tat-LK15运载siRNA沉默n NOS表达治疗神经病理性疼痛提供理论依据。方法 1通过凝胶阻滞分析测定Tat-LK15与siRNA的最佳交联比。流式细胞术检测Tat-LK15/FAM-siRNA以最佳交联比转染RGC-5细胞的转染效率;不同剂量Tat-LK15(1、2.5、5、10和20μg)孵育RGC-5细胞24 h,流式细胞术检测细胞凋亡率。2制备n NOS高表达的RGC-5细胞模型。3将RGC-5细胞随机分为5组:对照组、模型组、Tat-S组(Tat-LK15运载n NOS/siRNA转染模型细胞)、Lipo-S组(LipofectamineTMRNAi MAX运载n NOS/siRNA转染模型细胞)及Tat-N组(Tat-LK15运载NCsiRNA转染模型细胞),通过Q-PCR及Western blot检测各组nN OS表达水平。结果 Tat-LK15与siRNA质量比为2∶1时可完全包裹siRNA,达到最佳交联,此时其转染效率为(84.4±3.9)%。当Tat-LK15剂量为20μg(6.1μmol·L-1)时才出现一定细胞毒性,细胞凋亡率高于对照组[(10.3±1.1)%vs(7.4±0.9)%,P<0.05]。造模后RGC-5细胞nN OS表达水平明显升高(P<0.05)。与模型组相比,Tat-S组nN OS mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05),Tat-S组与Lipo-S组相比无差异(P>0.05)。结论Tat-LK15能高效转染siRNA,细胞毒性低,离体条件下可有效运载siRNA沉默nN OS的基因表达。     

谷胱甘肽转硫酶M1、T1基因型与溃疡性结肠炎易感性的关系

谷胱甘肽转硫酶（GST）是重要的Ⅱ相代谢酶，能催化多种Ⅰ相酶代谢产物与谷胱甘肽巯基共轭结合，形成亲水性物质后排出体外，提高机体对外来化合物的解毒作用。人体中GST活性差异将影响个体对疾病的易感性，而GST的活性受GST基因多态性所调控。本研究通过比较GSTM1、T1基因型在浙江汉族正常人群和溃疡性结肠炎（UC）患者间的分布差异，旨在阐明UC的遗传易感性。     

维生素D受体和骨关节炎

骨关节炎 (osteoarthritis,OA)是一种以骨关节软骨退变及其软骨下骨反应性增生为特征 ,复杂的多因子发病机制的骨关节疾病。流行病学调查显示OA在发达国家是最常见的肌骨骼源性致残因素 ,OA对健康的威胁在女性疾病中排第 4位 ,男性疾病中为第 8位。在美国估计有 4 0 0 0万患者 ,其中 70 %～ 90 %年龄超过 75岁 ,并且至少侵犯一个关节 ,估计到 2 0 2 0年患者数将达到 6 0 0 0万。虽然OA的病因不明 ,但有关双胎和家族性的多方面研究证据已表明遗传因素起到了相当重要的作用[1] 。可能参与其中的基因包括维生素D受体基因、Ⅱ型前胶原基因、…     

单采血浆和输血途径感染HIV的患者中HBV和HCV感染状况

目的 了解单采血浆和输血途径感染艾滋病病毒(HIV)的人群中,乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)、丙型肝炎(丙肝)病毒(HCV)的感染状况. 方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA),对825 名HIV阳性的单采血浆献血员和受血者,检测乙肝病毒表面抗原(HBsAg)和丙肝病毒抗体(抗-HCV). 结果 单采血浆和输血途径感染HIV的人群中,HBV、HCV的感染率分别为3.76%、72.24%.其中单采血浆献血员中,HCV感染率(81.85%)高于输血人群(56.03%),而HBV感染率(1.54%)低于输血人群(7.49%)(P均＜0.01). 结论 在单采血浆和输血途径感染HIV的患者中,有很高的HCV感染率,而HBV感染率较低.     

人感染高致病性H5N1亚型禽流感一例报告并文献复习

目的 探讨人感染高致病性H5N1亚型禽流感的临床特征及防治手段。方法 2005年11月，救治1例确诊为感染高致病性H5N1亚型禽流感的青年女性患者，分析其临床表现、影像学及流行病学特点。结果 患者发病前与病死家禽有密切接触史，从发病至死亡约10d。在呼吸困难发生前，发热持续了5d，以急性社区获得性肺炎及急性呼吸窘迫综合征（ARDS）为主要特征入院，X线胸片示双肺大片实变影并进行性进展，入院至死亡不足3d。中国疾病预防控制中心应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、实时聚合酶链反应（real-time PCR）技术检测患者下呼吸道吸出物标本，发现禽流感病毒血凝素（HA）5型特异性基因片段呈阳性；尸检肉眼所见主要有支气管充血、双肺实变，多浆膜腔积液；弥漫性血管内凝血（DIC）及多脏器功能衰竭（MOF）。结论 人感染高致病性H5N1亚型禽流感是一种致命的传染性疾病。提高认识，重视流行病学调查并及早干预是降低病死率的主要手段。     

抗-R7V研究现状

近年有研究发现,人类免疫缺陷病毒(HIV)不进展者体内一种名为抗-R7V的抗体含量很高,并且临床资料显示抗-R7V对HIV感染者具有一定的保护作用,使病情进展延缓或长期停留在无症状期,可以作为疾病进展的一个标志,为人们希望通过自身机体免疫控制HIV感染带来了曙光。对这类患者的研究有利于进一步阐明影响病毒复制的因素,也有助于制定治疗HIV/AIDS患者的新方案。含有R7V肽的酶联免疫吸附试验(ELISA)可以检测到HIV感染者体内的抗-R7V,与CD4计数和病毒载量联合应用,有助于医生决定治疗开始的时机。     

慢性乙型肝炎128例外周血T淋巴细胞亚群检测结果分析

目的观察各型慢性乙肝患者体内细胞免疫变化情况,为临床诊疗提供科学、量化的实验指标。方法用流式细胞术检测HBV感染后引起的慢性活动性肝炎、慢性迁延性肝炎和肝硬化病人共128例T淋巴细胞亚群,并和正常人进行对照。结果各型慢性乙肝病人的CD3 和CD4 T淋巴细胞绝对数均较正常人显著降低(t均>2.100,P均<0.05),CD8 T淋巴细胞在慢活肝病人组和正常对照组差异无显著性(t=0.728,P>0.05),慢迁肝和肝硬化患者则显著降低(t=2.043和2.862,P均<0.05),CD4 /CD8 在慢活肝和慢迁肝组显著低于正常人(t=0.216和0.223,P均<0.05),而在肝硬化组与正常人差异无显著性(t=1.784,P>0.05)。结论慢性乙型肝炎病人T淋巴细胞亚群出现明显异常变化,监测T淋巴细胞亚群有助于了解病情和观察疗效。     

河南省医用加速器多叶光栅小野输出因子验证测量方法研究

目的 调查放射治疗计划系统(TPS)计算的多叶光栅(MLC)小野输出因子,研究用0.015 cc电离室验证小野输出因子的测量方法。方法 在河南省选择8台可开展调强放射治疗的医用加速器,调查TPS计算的小野输出因子并与国际原子能机构(IAEA)推荐的出版值进行比。如果2 cm×2 cm照射野相对偏差超出IAEA要求的±3%,3 cm×3 cm、4 cm×4 cm、6 cm×6 cm照射野相对偏差超出IAEA要求的±2%,则用0.015 cc电离室和Unidos剂量仪进行测量验证。结果8台医用加速器的TPS计算小野输出因子与出版值比较,5台相对偏差符合IAEA要求,占调查总台数的62.5%,3台相对偏差超过IAEA要求,占调查总台数的37.5%。用针尖电离室测量验证,3台测量结果均符合IAEA要求。结论 河南省部分医用加速器TPS计算的MLC小野输出因子,需要现场实施小电离室测量修正,测量值作为制定放射治疗计划的依据。     

卒中一级预防指南:美国心脏协会/美国卒中协会致医疗专业者的声明(第二部分)

本更新版指南的目的是为那些尚未患卒中或短暂性脑缺血发作的人群提供深入及时的卒中预防循证建议。循证建议涉及危险因素的控制、头颈部循环的动脉粥样硬化性疾病的介入方法,以及为预防血栓形成和血栓栓塞性卒中而进行的抗栓治疗。更为深入的建议还涉及遗传和药理学试验,以及其他特殊情况下的卒中预防,如镰状细胞病和卵圆孔未闭。     

卒中一级预防指南:美国心脏协会/美国卒中协会致医疗专业者的声明(第七部分)

本更新版指南的目的是为那些尚未患卒中或短暂性脑缺血发作的人群提供深入及时的卒中预防循证建议。循证建议涉及危险因素的控制、头颈部循环的动脉粥样硬化性疾病的介入方法,以及为预防血栓形成和血栓栓塞性卒中而进行的抗栓治疗。更为深入的建议还涉及遗传和药理学试验,以及其他特殊情况下的卒中预防,如镰状细胞病和卵圆孔未闭。