Validation of serotonin (5-hydroxtryptamine) as an in vitro substrate probe for human UDP-glucuronosyltransferase (UGT) 1A6.

Investigation of human UDP-glucuronosyltransferase (UGT) isoforms has been limited by a lack of specific substrate probes. In this study serotonin was evaluated for use as a probe substrate for human UGT1A6 using recombinant human UGTs and tissue microsomes. Of the 10 commercially available recombinant UGT isoforms, only UGT1A6 catalyzed serotonin glucuronidation. Serotonin-UGT activity at 40 mM serotonin concentration varied more than 40-fold among human livers (n = 54), ranging from 0.77 to 32.9 nmol/min/mg of protein with a median activity of 7.1 nmol/min/mg of protein. Serotonin-UGT activity kinetics of representative human liver microsomes (n = 7) and pooled human kidney, intestinal and lung microsomes and recombinant human UGT1A6 typically followed one enzyme Michaelis-Menten kinetics. Serotonin glucuronidation activity in these human liver microsomes had widely varying V(max) values ranging from 0.62 to 51.3 nmol/min/mg of protein but very similar apparent K(m) values ranging from 5.2 to 8.8 mM. Pooled human kidney, intestine, and lung microsomes had V(max) values (mean +/- standard error of the estimates) of 8.8 +/- 0.4, 0.22 +/- 0.00, and 0.03 +/- 0.00 nmol/min/mg of protein (respectively) and apparent K(m) values of 6.5 +/- 0.9, 12.4 +/- 2.0, and 4.9 +/- 3.3 mM (respectively). In comparison, recombinant UGT1A6 had a V(max) of 4.5 +/- 0.1 nmol/min/mg of protein and an apparent K(m) of 5.0 +/- 0.4 mM. A highly significant correlation was found between immunoreactive UGT1A6 protein content and serotonin-UGT activity measured at 4 mM serotonin concentration in human liver microsomes (R(s) = 0.769; P < 0.001) (n = 52). In conclusion, these results indicate that serotonin is a highly selective in vitro probe substrate for human UGT1A6.     

丙泊酚对N-甲基-D-天冬氨酸所致PC12细胞损伤的保护作用

目的　探讨静脉麻醉药丙泊酚 (PPF)脑保护作用的可能机制。方法　乳酸脱氢酶 (LDH)法及MTT比色法判断细胞损伤程度及细胞存活率 ,Fura 2 /AM荧光标记法测定细胞内Ca2 + 浓度 ( [Ca2 + ]i)的变化 ,分光光度法测定细胞一氧化氮合酶 (NOS)活性。结果　N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA) 3 0 0 μmol·L-1处理4h可明显导致PC1 2细胞的损伤 ,表现为LDH释放量明显增加 ,吸光度值A570nm明显降低 ,细胞存活率降低 ,同时 [Ca2 + ]i 和NOS活性则明显增加。PPF6.2 5 ,2 5 ,1 0 0 ,40 0 μmol·L-1与NMDA同时处理PC1 2细胞则使LDH释放量显著降低 ,细胞存活率增加。PPF 1 2 .5和 1 2 5 μmol·L-1可显著降低NMDA诱导的[Ca2 + ]i 水平及NOS活性的提高。结论　PPF对NMDA所致的PC1 2细胞损伤有明显的保护作用 ,其机制可能与其抑制NMDA受体的功能 ,降低 [Ca2 + ]i,减弱Ca2 + 超载 ,并降低NMDA诱导的NOS活性增加有关。提示PPF可能是通过抑制NMDA受体 Ca2 + NOS通路的功能而产生细胞保护效应     

黄芩苷元选择性诱导人白血病K562细胞凋亡

目的研究黄芩苷元诱导人白血病细胞凋亡的作用及机理。方法MTT法测细胞毒活性，Hoechst 33258荧光染色法观察凋亡小体形成，流式细胞仪Annexin V FITC-PI法检测细胞凋亡发生率，PI染色法检测凋亡峰及细胞周期，同时流式细胞仪检测细胞Bcl-2，Fas和Caspase 3蛋白表达情况。结果黄芩苷元能选择性抑制人白血病K562细胞生长且呈浓度依赖关系，并能诱导细胞凋亡，细胞增殖被阻滞于S期；同时细胞Fas和Caspase 3蛋白表达增高，而Bcl-2蛋白表达不变。结论黄芩苷元能激活Caspase 3蛋白表达，诱导人白血病K562细胞凋亡且呈时效量效关系，此作用与Fas蛋白表达上调有关，与Bcl-2蛋白表达无关。     

静脉输注地尔硫治疗冠状动脉搭桥术前不稳定性心绞痛

目的 :评价静脉输注地尔硫治疗冠状动脉搭桥 (CABG)术前不稳定性心绞痛的疗效和安全性。方法 :68例CABG术前不稳定性心绞痛病人停服肾上腺素 β受体阻滞剂、钙通道阻滞剂及抗血小板药物 ,静脉给予地尔硫 ,以 33～ 167μg·min- 1,持续微泵注入 72h以上。观察心绞痛症状、心电图、血压、心率及不良反应。结果 :65例 (96% )病人有效。与用药前相比 ,心绞痛发作平均次数减少 (5 .4±s 1.8)次·d- 1(P <0 .0 1) ,发作持续时间缩短 (7.6± 2 .5 )min(P <0 .0 1)。心肌耗氧指数降低。心电图异常者ST T明显改善 ,4 9例病人在病情稳定后 1wk内接受CABG。无严重不良反应。结论 :静脉输注地尔硫为CABG术前不稳定性心绞痛提供了一种较为安全有效的药物治疗手段     

中国汉族人群遗传性聋基因座位STR位点的遗传多态性研究

目的 研究中国汉族人群10个遗传性聋基因座位的短串连重复序列(STR)的遗传多态性。方法 应用PCR方法对10个位点进行扩增，变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，记录基因型。采用PPAP软件计算正常人各STR位点等位片段频率、基因型频率、预期基因型频率、多态信息量(PIC)和Hardy-Weinberg平衡吻合性检验。结果 中国汉族人群D6S287、D8S1132、D13S1275、D15S130、D1S2726、D4S3038、D2S2380、D22S282、D14S1042、D7S529各位点分别检出10个、9个、8个、7个、7个、7个、6个、6个、6个及5个等位片段，多态性分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律。各位点PIC值分别为0．879、0．854、0．864、0．821、0．686、0．794、0．764、0．732、0．773、0．712；杂合度均高于0．7。结论 中国汉族人群10个位点STR均具有较高的杂合度和多态信息量，是较理想的遗传标记。     

电视监视下纤维鼻咽喉镜诊治的护理配合

目的 探讨电视监视下纤维鼻咽喉镜诊治的护理配合和纤维镜的清洁、消毒、管理方法，以确保检查和治疗的清晰、准确，并对检查过程中病人可能出现的并发症进行分析处理。方法 采用日本欧林巴斯ENF—T3型纤维咽喉镜及配套的活检钳，EPSON STYLuS PHOT0 T90彩色打印机一部。OES Video System图象处理系统一套，对10000例患者进行检查。结果 经病理确诊为鼻咽癌134例，其它诊治病种有：鼻咽炎、慢性咽炎、鼻炎、付鼻窦炎、声带小结、声带息肉、声带麻痹、声带囊肿、会厌囊肿、喉癌、慢性喉炎等；检查过程中病人可能出现的并发症有：鼻出血、晕厥、喉痉挛、麻药过敏等。结论 纤维鼻咽喉的检查具有照明度强、镜体软、操作简单、安全等特点，检查部位能清晰地在荧屏上放大，能发现细微的病变，病变的大小、位置、形态及活动情况，同时可以将检查内容包括图片永久性贮存，利于复查时的对照。熟练掌握检查护理配合对顺利完成检查、治疗，避免和处理检查引起的并发症起着重要的作用。     

慢性肾衰继发性甲旁亢iPTH水平变化的临床意义及罗钙全疗效观察

目的探讨慢性肾功能衰竭(CRF)并发继发性甲状旁腺机能亢进(SHPT)血中全段甲状旁腺激素(iPTH)水平变化的临床意义及小剂量罗钙全对慢性肾衰继发甲旁亢早期的疗效观察。方法分别采用免疫放射法、苦味酸法、偶氮胂Ⅲ法、直接紫外法测定60例健康体检者和94例CRF患者血iPTH、Cr、Ca、P含量;取iPTH含量87.5～295ng/L的SHPT病人随机分为观察组和治疗组各23例,治疗组每天口服罗钙全0.25ug。结果血iPTH水平随肾功能损害的加重而逐渐升高,与Cr成正相关,P亦逐渐升高,Ca则逐渐降低;治疗组服药3个月后,血iPTH显著降低(P<0.05),Ca明显升高(P<0.05),P无显著性差异(P>0.05),观察组血iPTH显著升高(P<0.05)。结论iPTH可作为早期诊断CRF继发性甲旁亢的敏感指标且其水平与肾功能损害程度一致;口服小剂量罗钙全治疗早期SHPT的疗效与iPTH水平有关。     

清远地区孕妇及其新生儿血铅含量分析

目的了解清远市孕妇及其新生儿血铅水平的现状与相关因素。方法选取1364对孕妇及其新生儿静脉血采用BH2100型原子吸收光谱法进行血铅含量的测定并对铅中毒的相关因素的调查。结果孕妇血铅中毒率26％，中位教76.8μg／L，新生儿中毒率27．5％，中位数80．6μg／L，孕妇血铅与新生儿铅含量正相关性(P＜0．05)调查表66.7％的铅中毒孕妇有相关因素。结论孕妇血铅含量高低与其新生的血铅值呈正相关且由于胎儿期生长发育需求，铅高于母亲。     

激光多普勒血流成像技术对针灸效果的观察

目的　应用激光多普勒血流成像系统显示艾灸的治疗效果 ,了解这一新的医学影象技术在针灸经络研究中的应用价值。方法　使用激光多普勒血流成像仪 ,对 12例健康人体艾灸前后体表出现的血流变化予以大范围地显像 ,分析体表血流分布与艾灸作用的关系。结果　 (1)艾灸内关穴后 ,手掌部血流的增加以大小鱼际和内关穴区为主。(2 )艾灸外关穴后 ,指根部的血流增加显著。 (3)不艾灸对照组在 30 min内前臂、手掌和手背血流的自然波动较小。结论　艾灸可以引起手部微循环血流量的增加 ,激光多普勒血流成像仪能够以大范围成像方式显示该过程 ;新的血流成像技术将在针灸经络的研究中具有实用价值     

海珠益肝胶囊治疗HBV前C区基因突变患者的疗效观察

目的　观察海珠益肝胶囊治疗HBV前C区突变慢性乙肝患者的近期疗效。方法观察海珠益肝胶囊治疗 32例HBV突变株患者的疗效 ,并同野生株组做对照 ,比较 2组肝功能、HBV -DNA定量和近期应答率的变化。结果　 2组治疗后肝功能复常率、近期应答率及HBV-DNA定量下降程度相近 ,经统计学比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　海珠益肝胶囊对HBV前C区突变株及野生株均有作用 ,2组的近期疗效相似