鼻咽癌组织中高表达的GSDME对TME免疫浸润和患者预后的影响

目的：探究细胞焦亡相关基因GSDME在鼻咽癌组织中的表达及其对肿瘤微环境（TME）和患者预后的影响。方法：从TCGA数据库获得548例鼻咽癌患者的基因表达数据及临床资料,运用R语言对GSDME进行差异表达分析、GO-KEGG富集分析;从人类蛋白质图谱（HPA）数据库中获取GSDME蛋白在鼻咽癌组织和相应癌旁组织中的表达数据,通过STRING数据库探究与GSDME相互作用的蛋白质网络;应用ssGSEA算法分析GSDME在鼻咽癌组织中的表达及其与24种免疫细胞浸润的相关性,运用Spearman法分析GSDME与免疫检查点分子的相关性,通过TISIDB数据库分析GSDME表达与细胞因子基因表达的相关性。单因素和多因素COX回归分析筛选预后风险因素,基于风险因素GSDME绘制预后预测列线图和校准图,根据GSDME的表达水平对鼻咽癌患者进行生存分析和风险分析。qPCR法验证中国人鼻咽癌组织中GSDME及4种趋化因子mRNA的表达。结果：数据库数据分析显示,与癌旁组织相比,鼻咽癌组织中GSDME呈高表达（P<0.01）,GO-KEGG富集分析显示GSDME参与免疫反应、细胞焦亡相关信号通路,GSDME表达与免疫细胞浸润、细胞因子及免疫检查点分子表达等相关,qPCR检查结果验证了中国人鼻咽癌组织中GSDME呈高表达。GSDME表达量、N分期和M分期是鼻咽癌患者预后的风险因素,基于风险因素建立的列线图和校正图能较好地预测鼻咽癌患者OS,鼻咽癌组织中GSDME高表达的患者预后差。结论：GSDME在鼻咽癌癌组织中呈高表达且是患者预后风险因素,基于GSDME建立的列线图预测预后效能良好;GSDME高表达与TME免疫浸润有关,其可能是免疫治疗的潜在靶点。     

艾叶提取物对大鼠口腔溃疡的治疗作用

目的：体外研究艾叶提取物抑菌能力,初步探索艾叶提取物对大鼠口腔溃疡模型的治疗效果及其机制。 方法：用浸出法提取艾叶挥发油及水提液混合物;体外研究艾叶提取物对口腔常见菌群的抑菌能力;以NaOH灼烧大 鼠唇内侧造口腔溃疡模型,观察2.0,1.0,0.5 g/mL生药浓度的艾叶提取物对大鼠口腔溃疡模型愈合时间、溃疡修复 程度的影响;运用ELASA法检测各组血清肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量,免疫组织化学法检测溃 疡局部病变组织增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达情况。结果：艾叶提取物对金黄色葡萄 球菌和链球菌生长具有显著的抑制作用;使用NaOH晶体成功构建大鼠口腔溃疡模型,2.0和1.0g/mL艾叶提取物均可 有效缩短口腔溃疡愈合时间(P<0.01),显著降低血清TNF-α表达(P<0.01)及提高溃疡局部PCNA表达水平(P<0.01),有 效减轻局部炎症反应并促进组织修复。结论：艾叶提取物能通过抑制细菌生长,降低血清TNF-α含量及提高溃疡局部 PCNA表达来促进大鼠口腔溃疡的愈合。     

丹参酮ⅡA对人胎盘间充质干细胞向心肌细胞分化的诱导作用及其机制

目的：探讨丹参酮ⅡA （TanⅡA）对人胎盘间充质干细胞（hPDMSCs）向心肌细胞分化的诱导作用及其机制,为TanⅡA作为心肌细胞分化诱导剂提供实验依据。方法：采用不同浓度TanⅡA （0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0和10.0 mg·L^-1）处理hPDMSCs,MTT法筛选出无毒剂量的TanⅡA （0.1 mg·L^-1）用于实验。hPDMSCs培养体系分为对照组、5-氮胞苷（5-aza,10μmol·L^-1）诱导组和TanⅡA （0.1 mg·L^-1）诱导组。培养20d后,免疫组织化学法检测各组细胞中α-横纹肌肌动蛋白（α-SCA）的表达;免疫荧光法检测各组细胞中心肌肌钙蛋白I （cTnI）的阳性表达率,计算心肌细胞分化率;Western-blotting法检测各组细胞中心肌转录调节因子4（GATA4）、心钠素（ANF）、cTnI、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）和β-连环蛋白（β-catenin）的蛋白表达水平。结果：hPDMSCs的生物学特性符合间充质干细胞。MTT法,当TanⅡA浓度大于0.1 mg·L^-1时,细胞存活率随浓度的增加而降低。对照组细胞在培养12 d以前呈快速增长趋势,培养12 d后细胞增殖活性降低;与对照组比较,5-aza诱导组和TanⅡA诱导组细胞增殖活性明显降低（P<0.05）。免疫组织化学染色,对照组细胞不表达α-SCA,5-aza诱导组和TanⅡA诱导组细胞均表达α-SCA,且TanⅡA诱导组更明显。与对照组比较,5-aza诱导组和TanⅡA诱导组细胞中GATA4（t_5-aza=2.937,P_5-aza<0.05;t_TanⅡA=4.769,P_TanⅡA<0.05）、ANF （t_5-aza=3.728,P_5-aza<0.05;t_TanⅡA=5.912,P_TanⅡA<0.05）、cTnI （t_5-aza=3.623,P_5-aza<0.05;t_TanⅡA=7.153,P_TanⅡA<0.05）和GSK-3β（t_5-aza=2.995,P_5-aza<0.05;t_TanⅡA=5.420,P_TanⅡA<0.05）蛋白表达水平明显升高,β-catenin （t_5-aza=2.985,P_5-aza<0.05;t_TanⅡA=6.951,P_TanⅡA<0.05）蛋白表达水平明显降低;与5-aza诱导组比较,TanⅡA诱导组GATA4、ANF和GSK-3β蛋白表达水平进一步升高（P<0.05）。结论：TanⅡA能诱导hPDMSCs分化为心肌细胞,且效果优于5-aza,其机制可能与TanⅡA能抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。     

大黄素缓解球囊损伤致大鼠颈动脉狭窄及其机制

目的 观察大黄素对颈动脉狭窄的影响,并对狭窄变化的分子机制进行初步探讨.方法 选取72只SD大鼠(200 g)采用随机数字表法分为3组:假手术组(n=24)、损伤组(n=24)、大黄素+损伤组(n=24).损伤组及大黄素+损伤组利用球囊建立颈动脉狭窄模型;假手术组除无球囊抽拉损伤外其余处理与其他两组一致.术后大黄素+损伤组灌胃大黄素(70 mg/kg);其余两组灌胃等体积溶剂(生理盐水含二甲亚砜).于第14天取下3组颈总动脉行HE染色;另取第14天3组颈总动脉行二氧乙啶(dihydroethidium,DHE)测量活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,免疫组化染色检测平滑肌肌动蛋白(oα-smooth muscle actin,α-SMA)、Ki67及c-myc表达变化,Western blot检测3组胞浆MEK1/2、p-MEK1/2、ERK1/2、p-ERK1/2及核内c-myc含量变化.结果 HE染色显示颈动脉狭窄模型建立成功,14 d新生内膜增殖速度为3个时间点最快(P＜0.01).新生内膜成分主要为平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs).与假手术组比较,损伤组ROS表达量急剧升高(P＜0.01),大黄素+损伤组显著下调ROS水平(P＜0.01).与损伤组比较,大黄素+损伤组显著下调增殖蛋白Ki67表达(P＜0.01),抑制新生内膜中VSMCs的增殖(P＜0.01),降低MAPK-ERK通路活化(P＜0.01),减少核内c-myc活化(P＜0.01).结论 大黄素能够缓解大鼠颈动脉狭窄,其机制可能是大黄素下调ROS/MAPK/ERK/c-myc通路活化,降低增殖蛋白Ki67表达,从而抑制新生内膜中VSMCs的过度增殖.     

酮康唑致中毒性肝炎一例

患者女,28岁,1994年9月34日因乏力、纳差、眼黄一周入院.1990年9月1日因治疗甲癣口服酮康唑(西安杨森制药有限公司产)每天1次,240mg/次.     

门静脉转流下入肝血流阻断动物模型的建立及评价

目的：设计一种可避免门静脉淤血的动物模型,排除门静脉淤血对肝脏功能恢复的影响,从而为肝脏耐受缺血时限的实验研究提供理想的实验模型。方法：利用大鼠肝脏解剖特点,分别阻断肝左、中、右叶肝蒂（ 约占全肝９５ ％ ） ,造成受累肝叶完全缺血;保留尾叶血供作为肝蒂阻断期间门静脉血经肝脏回流入下腔的通道,到预定观察终点,去除肝蒂阻断夹即恢复肝脏血流,切除尾状叶。经血管造影及染料示踪法观察肝蒂阻断后门静脉流出道的完整性及肝脏缺血的完全性以及肝蒂阻断前后血液动力学变化;并观察了肝脏再灌流后２４ ｈ 的病理变化及动物７ ｄ 存活率,与单纯入肝血流阻断组做对照。结果：这种新设计的门静脉转流下入肝血流阻断动物模型,肝脏缺血可靠,门静脉流出道完整,阻断肝蒂前后血液动力学稳定;肝脏病理变化及动物术后７ ｄ 存活率转流组与单纯入肝血流阻断组有明显差异,前者好于后者。结论：该模型复制方法简单、重复性高、对机体附加创伤和生理干扰小,是研究大鼠对入肝血流阻断耐受时限的理想模型。     

提高《临床微生物学检验》实验教学效果的探索

摘要:实验教学不仅是《临床微生物学检验》课程的教学方法之一,更是培养学生掌握与实习和工作接轨的实践能力的重要教学手段。因此,为提过实验教学效果,我们从实验教学内容、实验教学方式及考核方案等方面进行了改革的探索与尝试。教学实践证明,从实验教学的正确定位出发,以该课程中的核心知识和技能为切入点进行模拟临床检验过程,能大大激发学生的学习兴趣,培养学生自主学习和自主操作的能力。     

尿沉渣分析仪在预防泌尿系统结石中的作用

[目的]探讨UF-100i尿沉渣分析仪在预防及诊断泥沙样泌尿系统结石中的作用。[方法]对因食用三聚氰胺污染奶粉来我院就诊的2787例儿童,分别应用UF-100i尿沉渣分析仪筛查尿结晶,彩色多普勒超声仪筛查泌尿系统结石或结晶,并对两种方法的检查结果进行比较。[结果]尿结晶占18%,超声诊断结石和结晶占4%。两者相比差异有统计学意义(P﹤0.05);超声诊断结石和结晶与尿结晶符合率随着尿结晶量增加而明显增高,尤其尿结晶值在大于220/μl时,符合率达83%,趋势χ2检验P﹤0.005。[结论]尿沉渣分析仪可为泌尿系统结石的早期发现及预防提供重要依据。     

富血小板血浆对颗粒脂肪移植的影响

背景：较高的远期吸收率极大地影响了脂肪移植在临床的广泛应用。富血小板血浆中含有丰富的促进组织修复与再生的生长因子。 目的：观察富血小板血浆对颗粒脂肪移植效果的影响,并初步探索其作用机制。 方法：将10只6周龄的裸鼠随机选择左侧或右侧背部皮下组织作为富血小板血浆组(0.5 mL人颗粒脂肪+0.1 mL富血小板血浆)受区,另外一侧作为对照组(0.5 mL人颗粒脂肪+0.1 mL磷酸盐缓冲液)受区。于植入后10,90 d各选择5只裸鼠,处死后取出移植物进行大体形态观察、体积测定及组织学检测。此外,体外实验中,从人离体脂肪组织中分离培养脂肪干细胞,分别通过Cell Counting Kit-8和Real Time-PCR检测富血小板血浆对脂肪干细胞体外增殖和成脂分化的影响。 结果与结论：比较植入后10,90 d所得的移植物发现,富血小板血浆组存活体积明显多于对照组(P < 0.05),组织学上也含有更多的正常脂肪细胞(P < 0.05)及微血管数目(P < 0.05)。体外实验中,富血小板血浆显著促进了脂肪干细胞的增殖,同时在其诱导的脂肪干细胞中检测到成脂分化相关基因表达升高。说明富血小板血浆能够提高脂肪移植的成活,这可能与富血小板血浆促进脂肪干细胞的增殖及成脂分化以及促进移植脂肪组织的血管化密切相关。     

覆盆子不同提取部位对小鼠记忆障碍的改善作用研究

目的:观察覆盆子不同提取部位对东莨菪碱、亚硝酸钠及40%乙醇造成的小鼠记忆障碍模型的影响,探索覆盆子对这3种记忆障碍模型的有效部位,为进一步研究覆盆子对学习记忆改善作用的机制提供依据。方法:昆明种小鼠130只,随机分成13组,每组10只。即正常组,模型组,阳性组,覆盆子全药高剂量和低剂量组,三氯甲烷部位高剂量和低剂量组,正丁醇部位高剂量和低剂量组,乙酸乙酯部位高剂量和低剂量组,水提部位高剂量和低剂量组。给药组小鼠分别以高、低剂量(24,12 g·kg~(-1))ig覆盆子全药、三氯甲烷部位、正丁醇部位、乙酸乙酯部位、水提部位;阳性药组给银杏叶制剂量为7.6 mg·kg~(-1),正常组和模型组给予等量的蒸馏水,连续12 d。7 d后除正常组外,东莨菪碱所致模型测试前30 min ip 1 mg·kg~(-1),亚硝酸钠所致模型训练后ip 120 mg·kg~(-1),40%乙醇所致模型测试前30 min ig 0.1 m L·kg~(-1),检测小鼠在Morris水迷宫的定位航行能力和空间探索能力。结果:与正常组比较,3种记忆障碍逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数明显缩短(P0.05);与模型组比较,覆盆子全药、三氯甲烷部位、正丁醇部位、乙酸乙酯部位、水提部位均可缩短3种记忆障碍逃避潜伏期,增加其穿越平台次数(P0.05)。结论:覆盆子水提部位高剂量组对东莨菪碱、亚硝酸钠造成的小鼠记忆障碍模型改善效果最优;覆盆子全药高剂量组对40%乙醇造成的记忆障碍小鼠模型改善效果最优。