鼻咽癌组织中HO-1蛋白表达与放射敏感性及预后的关系

放射治疗是鼻咽癌(NPC)首选的治疗手段,但不同患者的治疗效果却有较大差异,除了受病理类型、分期早晚、患者年龄、体质等的影响外,个体放射敏感性的差异是一个重要的因素.     

抑制CDC25A表达的siRNA真核表达载体的构建

目的 在哺乳动物细胞中构建并鉴定抑制CDC25A表达的siRNA真核表达载体.方法 根据CDC25A的基因序列,设计特异性的siRNA,将合成的siRNA 核酸片段退火形成双链后连接到经Bam HI和HindⅢ双酶切后的psilencer4.1真核表达载体,命名为psilencer4.1-CDC25A以及psilencer4.1-Control,并进行酶切及测序鉴定.结果 通过酶切鉴定和序列测定,成功地构建出抑制CDC25A表达的siRNA载体及其阴性对照载体.结论 成功构建和验证了siRNA真核表达载体,为下一步研究奠定了良好的基础.     

miR-6732-3p对鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2R放射敏感性的影响

目的 探讨miR-6732-3p表达对人鼻咽癌CNE-2R细胞放射敏感性的影响。方法 采用RT-qPCR检测miR-6732-3p在CNE-2和CNE-2R细胞株中的表达。用miR-6732-3p慢病毒转染CNE-2R细胞后，将CNE-2R细胞分为三组，分别为CNE-2R组（正常对照组）、miR-6732-3p NC组（转染对照组）、miR-6732-3p inhibition组（转染组）。RT-qPCR检测各组细胞中miR-6732-3p的表达，CCK-8、流式细胞术和克隆形成实验分别检测转染前后的细胞增殖、凋亡能力及放射敏感性。结果 RT-qPCR检测结果显示，miR-6732-3p在CNE-2R细胞中的表达量明显高于CNE-2细胞（P=0.036）。采用慢病毒转染CNE-2R细胞后，转染组细胞miR-6732-3p 的表达量均较转染对照组和正常对照组低（P＜0.05）。CCK-8法检测结果显示，与两个对照组相比，转染组细胞生长受抑制（P＜0.001）；在不同照射剂量下，转染组细胞的存活分数均明显降低（P＜0.001）。流式细胞仪检测结果显示，未经照射（0 Gy）和接受8 Gy照射后转染组细胞凋亡率均较转染对照组及正常对照组明显升高（P＜0.05）。克隆形成实验结果显示，转染组的放射生物学参数D0、Dq、SF2值均低于两个对照组（P＜0.05）；在不同照射剂量下，转染组细胞存活分数亦低于两个对照组（P＜0.001）。结论 沉默miR-6732-3p可提高鼻咽癌CNE-2R细胞的放射敏感性，为鼻咽癌放射抗拒的分子靶向治疗提供新思路。     

不同给药據剛脉疗浙鼻輔麵受性研究简

目的：评价顺铂不同给药方案同期放化疗治疗鼻咽癌的急性毒副反应及耐受性.方法：2012年3月-10月共160例患者进入本研究,按顺铂不同给药方案随机分为八组（A组、DDP100mg/m2,d1,q4w;B组、DDP100mg/m2,分三天用,q4w;C组、DDP80mg/m2,d1,q4w;D组、DDP80mg/m2,分三天用,q4w;E组、DDP100mg/m2,d1,q3w;F组、DDP100mg/m2,分三天用,q3w;G组、DDP80mg/m2,d1,q3w;H组、DDP80mg/m2,分三天用,q3w）,均行2周期化疗.各组放疗方案相同,采用常规放疗或调强适形放疗,原发肿瘤和阳性淋巴结总剂量为62~78Gy.结果：主要的急性毒副反应包括：白细胞减少（A组：85%,B组：90%,C组：95%,D组：90%,E组：95%,F组：90%,G组：95%,H组：90%;χ2=5.312,P=0.622）,贫血（A组：95%,B组：85%,C组：90%,D组：85%,E组：100%,F组：95%,G组：80%,H组：100%;χ2=13.543,P=0.060）,呕吐（A组：100%,B组：100%,C组：100%,D组：100%,E组：100%,F组：100%,G组：90%,H组：90%;χ2=22.534,P=0.068）,体重下降（A组：100%,B组：100%,C组：95%,D组：95%,E组：100%,F组：95%,G组：95%,H组：100%;χ2=9.150,P=0.821）,皮肤反应、粘膜反应、口干各组发生率均为100%.各组急性毒副反应发生率无显著差异,所有的并发症经对症支持治疗后均能恢复.结论：顺铂100mg/m2与80mg/m2及不同的剂量分割和间隔时间同步化疗治疗鼻咽癌的急性毒副反应发生率无显著差异,患者均能耐受.     

蛋白芯片技术筛选鼻咽癌血清特异性蛋白质及其临床意义

目前临床上主要采用EB病毒相关抗体检测作为鼻咽癌早期筛查手段.为寻找一种更为有效的血清学诊断方法,笔者采用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(surface enhanced laser desorption ionization-time of flight-mass spec-trometry,SELDI-TOF-MS)技术研究鼻咽癌、鼻咽良性疾病患者和正常人血清标本的蛋白质表达差异,以探讨该技术在鼻咽癌诊断中的意义.     

鼻咽癌移植瘤Annexin A3和Nm23-H1蛋白表达与放射敏感相关性的研究

目的:探讨不同放射敏感性鼻咽癌移植瘤中Annexin A3和Nm23-H1蛋白的表达及意义。方法:将不同放射敏感性鼻咽癌细胞CNE-2R和CNE-2分别注射到裸鼠后肢皮下成瘤。成瘤后以X射线分次照射16Gy,计算肿瘤体积及肿瘤倍增时间。采用免疫组化法检测移植瘤中Annexin A3和Nm23-H1蛋白的表达水平。结果:未受照射CNE-2R和CNE-2移植瘤倍增时间分别为4.8和3.9d,受照射CNE-2R和CNE-2移植瘤倍增时间分别为6.2和17.1d。未受照射CNE-2R移植瘤组织Annexin A3蛋白表达明显低于未受照射CNE-2移植瘤组织,MOD值分别为0.035±0.012和0.062±0.009,P=0.000;受照射CNE-2R移植瘤组织明显低于受照射CNE-2移植瘤组织,MOD值分别为0.029±0.007和0.051±0.009,P=0.000。未受照射CNE-2R移植瘤组织Nm23-H1蛋白明显高于未受照射CNE-2移植瘤组织,MOD值分别为0.056±0.007和0.043±0.007,P=0.022;受照射CNE-2R移植瘤组织明显高于受照射CNE-2移植瘤组织,MOD值分别为0.079±0.009和0.046±0.007,P=0.000。结论:CNE-2R移植瘤组织Annexin A3蛋白明显低于CNE-2移植瘤组织,受照射CNE-2R移植瘤组织Nm23-H1蛋白明显高于受照射CNE-2移植瘤组织,与体外实验结论一致,提示与鼻咽癌放射抗拒有关,可作为鼻咽癌放射治疗的新标志。     

鼻咽癌放射抗拒相关的信号通路

目的 研究具有不同放射抗拒性的人鼻咽癌细胞株CNE-2R与CNE-2的基因表达谱差异,筛选与鼻咽癌放射抗拒相关的基因信号通路.方法 验证已构建的鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2R的放射抗拒性,选用Human-6v3.0全基因组表达谱微珠芯片,筛选这2种细胞的差异表达基因.对差异基因进行生物信息学分析,寻找与鼻咽癌放射抗拒...     

p16基因多态性与鼻咽癌发生的相关性

目的探讨广西南宁鼻咽癌患者p16基因单核苷酸多态性(SNP)与鼻咽癌发生的关系。方法以200例鼻咽癌患者,200例正常人群为研究对象。选取p16基因SNP rs80235406位点作为遗传标记,用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和测序方法检测p16基因多态性及其基因突变分布频率。结果鼻咽癌组p16基因rs80235406突变率为26.5%(53/200),正常人群p16基因rs80235406突变率为9.0%(18/200)。rs80235406位点等位基因及基因型频率在鼻咽癌人群与正常对照组之间分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论 p16基因SNP rs80235406位点多态性与鼻咽癌存在显著的相关性。     

应用蛋白质的相互作用网络图筛选鼻咽癌放射抗拒相关基因

目的 应用蛋白质相互作用网络图,寻找鼻咽癌放射抗拒相关的分子标志物,探讨鼻咽癌放射抗拒机制.方法 应用全基因组表达谱芯片,初步筛选出2种不同放射敏感性细胞株CNE-2R与CNE-2的差异表达基因.采用计算机软件随机选取4个差异表达基因,分别设计引物,用半定量RT-PCR技术检测验证.将2次实验中均出现的差异有统计学意义的基因导入SNOW在线数据库进行分析,绘制差异基因相互作用网络图,网络中心节点作为鼻咽癌放射抗拒相关分子标志物;进一步采用Western blot检测关键节点STAT1在CNE-2R与CNE-2表达差异.结果 CNE-2R与CNE-2相比,2次芯片实验中均出现的差异基因374个,其中差异有统计学意义的基因197个;随机选取的4个差异表达基因RT-PCR结果与芯片扫描结果相似,具有相同的方向性.197个共有的差异有统计学意义的基因编码蛋白经SNOW分析存在相互作用,并构成一个复杂的相互作用网络图,寻找到了关键性的节点为STAT1和JUN.Western blot结果显示,STAT1-d在CNE-2R中表达明显高于CNE-2(t =4.96,P＜0.05).结论 关键性的节点STAT1和JUN可能是引起鼻咽癌放射抗拒的分子标志物,STAT1-α可能与鼻咽癌放射抗拒发生密切相关.     

Ku蛋白及DNA-PK与肿瘤治疗敏感性关系的研究进展

Ku蛋白及DNA-PK通过激活非同源末端连接途径,参与体内DNA双链断裂缺口的修复,近年来其在肿瘤的预后、发生、发展、诊断和治疗等研究中引起人们越来越多的重视。本文就其在肿瘤组织内的异常表达、肿瘤放射增敏作用及抗肿瘤药物增敏作用等有关方面的研究进展进行综述。