溶质载体家族成员SLC25A39基因促进乳腺癌细胞线粒体分裂

目的 构建带Flag标签的人溶质载体家族成员蛋白SLC25A39基因的真核表达载体,在获得Flag?SLC25A39融合蛋白表达后,研究SLC25A39表达对人乳腺癌细胞线粒体稳态的影响.方法 以人乳腺文库为模板采用PCR技术扩增出人SLC25A39的编码区序列,双酶切后将其插入到带Flag标签的pcDNA3.0载体上...     

翻转课堂在高职五年制护理专业人体解剖学教学中的应用

人体解剖学教学是一门教学内容比较繁杂、抽象难懂的医学基础课,传统教学模式比较僵化和枯燥乏味,学生被动学习容易厌倦,学生的学习效率并不是很高,有必要转变以往的教学模式[1].本研究选取的学生的年龄比较小,自身的基础比较差,翻转课堂作为新兴教学模式,摈弃了以往学生为客体的教学观念[2].本研究分析翻转课堂在高职院校人体解剖学教学中的应用,从而达到提高教学质量的目的,报道如下.     

人细胞周期蛋白H基因的真核表达载体构建和表达及功能检测

<正>细胞周期蛋白H(cyclin H)是一种含323个氨基酸,相对分子质量(Mr)为38 000的细胞周期调控蛋白,普遍存在于真核细胞中,可与细胞周期蛋白依赖性激酶7(cyclin-dependent kinase 7,CDK7)共同参与细胞周期和基因转录的合理调控,其复合体可以催化各种CDK分子的活化,从而影响细胞增殖[1]。Cyclin H可催化多种CDK(如CDK2、CDK4、     

Flag-Tinagl1真核表达载体的构建及功能验证

目的 构建带Flag标签的肾小管间质性肾炎抗原样蛋白1(Tinagl1)基因真核表达载体,检测其对肝癌细胞HepG2 ERK/AKT磷酸化、生长和迁移的影响.方法 以人乳腺cDNA文库为模板,PCR扩增Tinagl1基因片段,将其插入pcDNA3.0载体,经双酶切和测序验证后,将重组质粒转染到肝癌HepG2细胞中,采用Western印迹检测重组蛋白对ERK和AKT磷酸化水平的影响,生长曲线和划痕实验检测其对肝癌细胞HepG2生长和迁移的影响.结果 双酶切和Western印迹结果表明,pcDNA3.0-Flag-Tinagl1真核表达质粒构建成功,Tinagl1可降低ERK和AKT的磷酸化水平;生长曲线和划痕实验表明Tinagl1抑制肝癌细胞HepG2生长和迁移.结论 构建了带Flag标签的Tinagl1真核表达载体,并能抑制肝癌细胞HepG2中ERK/AKT磷酸化、生长和迁移,为进一步研究Tinagl1在肝癌细胞中的功能奠定了基础.     

慢病毒介导的敲低UBC9表达抑制ERβ类泛素化修饰水平

目的建立稳定敲低UBC9蛋白表达的293T细胞株,检测其对雌激素受体β(ERβ)类泛素化修饰水平的调节作用。方法构建4条针对人UBC9基因的慢病毒短发夹RNA(shRNA)的干扰载体,将其与慢病毒包装辅助质粒共转染293T细胞后,收集病毒上清,感染293T细胞,经嘌呤霉素(puromycin)筛选后获得稳定表达慢病毒介导UBC9 shRNA的混合细胞集落,分别用实时(real-time)PCR和Western印迹方法检测UBC9的表达情况,瞬时转染方法检测UBC9表达水平对ERβ类泛素化修饰水平的影响。结果建立了稳定敲低UBC9的293T细胞株,UBC9降低能够抑制ERβ类泛素化修饰水平。结论 UBC9在ERβ类泛素化修饰反应中发挥重要作用。     

基于microRNA的活体显像研究进展

MicroRNA (miRNA)是一类新型的非编码RNA,可对靶向mRNA的转录后水平进行调控.MiRNA在众多生物过程中发挥重要作用,特别与恶性肿瘤的发生、发展、侵袭和转移密切相关.针对内源性miRNA表达及功能的研究,往往局限于Northern blot或实时定量PCR等体外检查手段.这些检查有创,且针对同一样本不能重复检查.近年来活体显像技术的发展,为miRNA在活体表达水平的无创性监测提供了有效手段.笔者介绍目前miRNA体内示踪的报告基因显像、反义光学显像、纳米荧光显像及多模态显像的最新研究进展.     

经皮肝穿光动力疗法治疗晚期胆管癌的前瞻性研究和胆管内超声在评估疗效方面的作用

背景与目的:本文评估了晚期胆管癌患者经皮肝穿光力疗法(PD T)的疗效,同时调查了PD T术后运用胆管内超声(IDU S)来评估疗效及定期随访的情况。方法:先行经皮肝穿刺胆管引流(PTBD),待PTBD通路扩张畅通后施行经皮PD T疗法。在静脉内注射血卟啉衍生物2d后经皮经肝通过胆管镜使管腔内光敏化。PDT后所有患者均置经皮胆汁引流管。每月在PDT之前和之后例行IDU S检查评估肿l瘤的厚度。结果:24例晚期胆管癌患者接受PD T治疗。PD T治疗3个月后,肿瘤的平均厚度已经由8.7±3.7m m缩小至5.8±2.0m m(P<0.01)。PDT治疗4个月后,肿瘤的厚度…     

胃食管反流症状的医疗咨询:原因及其相关因素

目的:评价胃食管反流症状(G O RS)的医疗咨询频度,并确定咨询的原因和相关因素。方法:应用有效问卷电话调查了2500名受试者。用多因素Logistic回归分析数据,其中因变量为GO RS咨询频度,自变量为社会人口统计因素和GO RS的临床特征。结果:在存在GO RS的个体中,28%在过去的一年中曾向他们的内科医生咨询。寻求医学建议的主要原因是:48%担心诱发GO RS,42.6%是由于GO RS的强度。医疗咨询的独立相关因素有:家庭主妇(O R1.9,95%CI1.1～3.4)、退休(OR2.3,95%CI1.3～4.1)、GO RS频繁发作(O R2.4,95%CI1.6～3.5)、严重的GO RS(O R…     

弥漫性食管痉挛能否发展为食管失弛缓症:一项前瞻性队列研究

弥漫性食管痉挛(DES)与食管失弛缓症有共同的临床和测压特点。一些报道支持了D ES发展为食管失弛缓症的观点,但是目前还缺乏前瞻性资料支持这一理论。为了前瞻性评估DES发展为食管失弛缓症的概率,对1992—2003年间诊断为DES患者的食管压力描记进行了独立盲法回顾,并由两名食管病专家达成一致。将愿意进行食管压力重复测定的患者纳入研究队列。随访期间的食管压力描记由相同两名专家各自独立、单盲评价,并用食管压力测定确定D ES发展为食管失弛缓症概率,而且作者对食管压力进展的预测因素进行了评估。1992-2003年间诊断为D ES的32例…