人白细胞介素-4单克隆抗体的制备及其鉴定

应用脾内一次免疫法,免疫BALB/c小鼠,进行细胞融合,获得了两株分泌抗人白细胞介素-4单克隆抗体的杂交瘤细胞株。此杂交瘤分泌的单克隆抗体(Mc-Ab)具有很强的特异性,对E、Coli表达的重组1L-4,商品化的1L-4及天然1L-4呈阳性反应,与E、Coli及重组的人1L-2,1L-3,INF_α,TNF无     

830nm半导体激光照射荷瘤小鼠脾区的抑癌作用

激光照射机体产生的生物效应一直是激光生物学与激光医学研究的重点，目前普遍认为适当剂量的激光照射能增强机体的免疫功能。我们以荷乳腺癌小鼠为实验对象，观察了激光照射荷瘤小鼠脾区对肿瘤生长的抑制作用，并探讨其作用机制。材料和方法１－实验动物和肿瘤瘤源　采用本室培育的近交系ＴＡ２系雌性小鼠５０只。其中４０只接种本室建立的小鼠乳腺癌瘤株ＭＡ７３第４００代。２－激光照射　采用我校生物医学工程系研制的波长８３０ｎｍ半导体激光治疗仪，以功率２０ｍＷ的激光照射荷乳腺癌小鼠脾区，每天１次，每次２０ｍｉｎ，连续照射８…     

人滑膜细胞的分离培养与鉴定

[目的]建立人滑膜细胞体外分离培养的方法，为进一步的实验研究奠定基础。[方法]分别用胶原酶消化法及组织块培养法分离和培养人滑膜细胞，并通过形态学和免疫组化进行鉴定。[结果]培养的滑膜细胞具有成纤维细胞的形态和特征；免疫组化染色显示Vimentin阳性，CD68阴性，滑膜细胞呈长梭形极向生长。[结论]两种方法均成功的培养出了人滑膜细胞，适合做为实验研究的靶细胞。     

人重组IL—6在COS7细胞中的表达

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）和脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）重组技术，构建了人白细胞介素６（ＩＬ－６）重组表达载体ｐＴＳＭＩＬ－６。利用ＤＥＡＥ－Ｄｅｘｔｒｏｎ法将该表达载体转染ＣＯＳ７细胞，获得了有生物活性ＩＬ－６的暂时性高效表达。对收集的上清进行检测检测表明：ＩＬ－６的生物活性转染后２４小时为１４２０８ＩＵ／ｍｌ，４８小时为４７７０ＩＵ／ｍｌ；ＳＤＳ－聚丙稀酰胺电泳证明有ＩＬ－６糖蛋白区带，分子量为２５     

脑梗塞及脑出血患者外周血单个核细胞IL－6和TNF_α分泌水平及其意义

对３２例脑梗塞患者及１８例脑出血患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）ＩＬ－６和ＴＮＦα分泌水平进行了测定。结果表明：脑梗塞及脑出血患者ＩＬ－６水平分别为６３６．１３±７３．６２ｕ／ｍｌ和５６１．１１±８６．７２ｕ／ｍｌ；ＴＮＦα水平分别为１０５．２２±１８．１４ｕ／ｍｌ和７１．９４±１０．６４ｕ／ｍｌ。２４例健康老年人及２０例健康献血员ＩＬ－６水平分别为２６９．４６±３７．４９ｕ／ｍｌ和１６．７６±３．１６ｕ／ｍｌ；ＴＮＦα水平分别为２２．２０±４．６２ｕ／ｍｌ和９．１２±２．１４ｕ／ｍｌ。各组之间Ｐ值均小于０．０１，有显著差异。提示ＩＬ－６及ＴＮＦα与脑梗塞及脑出血的发病有一定相关性；老年人ＩＬ－６及ＴＮＦα水平有所改变。     

人IL—1,IL—1ra及IL—6在人胚雪旺细胞中的表达

分别用LRBM33Ia5、HT－2和KD83细胞株检测人胚雪旺细胞（SC）IL-1和IL-6分泌水平，用原位杂交技术检测上述细胞因子及白细胞介素-1受体拮抗剂（IL－1ra）的mRNA表达。结果表明：人胚雪旺细胞能自发分泌IL－1及IL－6活性蛋白，24h在培养上清中即可出现IL－1和IL－6活性，72h分泌达高峰，IL－1和IL－6分泌水平分别为26．30±8．10和57．40±12．40U／ml；人胚雪旺细胞具有IL－1、IL－1ra及IL－6mRNA的表达。提示IL－1、IL－1ra及IL－6可能参与神经系统的发育、修复等过程。     

大肠杆菌肽脱甲酰基酶的表达、纯化及活性检测

肽脱甲酰基酶(peptide deformylase,PDF)是原核生物生长、代谢、繁殖必不可少的关键酶,而在人类和其他哺乳动物中不发挥明显作用,因而被视为新一代广谱抗生素药物筛选的理想靶点.最早被发现并进行研究的是大肠杆菌的PDF,但其体外活性非常低且不稳定,20世纪90年代以来人们一直在对不同金属离子形式的PDF进行研究,以获得既稳定活性又高的PDF.     

人IL-6受体胞外区真核表达载体的构建及体外表达

目的 构建人IL-6受体(IL-6R)胞外区真核表达载体,检测其在体外培养细胞中的表达.方法 利用PCR扩增IL-6R胞外区,克隆到pcDNA3.1(+)中,用双酶切、测序鉴定.重组质粒通过脂质体转染HL-60细胞,用G418进行筛选,利用Western印迹检测IL-6R蛋白表达.结果 PCR扩增出1 218 bp的目的 片段,双酶切和测序结果显示重组质粒正确.Western印迹结果显示转染细胞能够表达目的 蛋白.结论 成功构建了人IL-6R胞外区真核表达载体,并且能够在真核细胞中表达.     

高糖对THP-1人单核细胞表达iNOS和IL-1β的影响

糖尿病是由多种病因引起的以慢性高血糖为特征的代谢紊乱.已有的研究结果表明,糖尿病高血糖可以影响单核细胞趋化、粘附作用,促进细胞凋亡.本文在体外培养人单核细胞株(THP-1)的基础上,以高浓度葡萄糖刺激,通过检测细胞表达诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和IL-1β的情况,探讨高糖状态下免疫细胞功能的变化.