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回顾了建构主义的由来,比较了和普外传统教学模式的异同,介绍了建构主义在普外教学中的应用。教师充分调动学生的主动性,又不忽视自身对学生的引导和帮助,鼓励学生从已有的知识体系出发,温故知新,借助多种手段主动学习,使知识构架不断丰富和完善。 相似文献
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大容量人乳腺癌单链抗体库的构建与初步鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的利用细胞内重组技术构建大容量人乳腺癌单链抗体(scFv)库。方法收集30例乳腺癌外周转移淋巴结,依次提取总RNA、mRNA,RT-PCR扩增全套可变区基因(VL、VH),各自克隆到T载体,构建T载体库。然后从T载体上酶切VL、VH分步克隆到噬粒载体pDAN5,经电转化TG1得到初级库。辅助性噬菌体感染初级库,使噬菌体抗体表面呈现。提纯噬菌体抗体,滴定浓度后感染大肠杆菌BS1365进行细胞内重组。噬菌体挽救后再次提纯滴定噬菌体,感染大肠杆菌DH5αF',得到次级库,并测序验证。结果VH、VLT载体库分别为3.5×108和1.7×108,初级库库容量2.5×109。次级库库容量为2.5×1011。结论所采用的引物能够高效扩增目的片段,T载体的应用能够提高抗体基因的克隆效率,细胞内重组将进一步扩大库容量及增加其多样性,这种基于RT-PCR、T载体过渡、细胞内重组的路线能够构建大容量抗体库。 相似文献
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噬菌体呈现技术近年来得到不断改进和完善。基于loxP-cre系统的细胞内重组技术是最为重要的改进。从双载体系统到单载体系统,从大样本抽样测序到肉眼直观判断,它使大库容量天然抗体库的构建变得简单易行,并有利于高亲和力抗体的获取。现对其改进和完善过程进行综述。 相似文献
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目的:探讨survivin的亚细胞定位与临床病理特征的关系。方法:收集行乳腺癌改良根治术、保乳手术和(或)腋窝淋巴结清扫手术,病理诊断为浸润性乳腺癌的患者标本80例。采用免疫组织化学方法对样本survivin表达水平进行检测,分析乳腺癌中survivin的亚细胞定位与临床病理特征之间的关系。结果:乳腺癌组织中survivin的阳性率为76%,其中26%定位于细胞核,15%定位于细胞浆,两者染色均阳性为35%。亚细胞定位差异与淋巴结转移相关(P<0.05),与病例分级、ER表达、肿瘤大小无关(P>0.05)。结论:survivin在乳腺癌表达具有亚细胞定位差别,并且与淋巴结转移相关,提示该基因的不同定位在乳腺癌发生和转移过程中发挥着不同的作用。 相似文献
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两种菌落聚合酶链反应在抗体库筛选中的应用比较 总被引:3,自引:1,他引:2
摘要:目的:探讨两种菌落PCR方法在抗体库筛选中的应用价值。方法:分别以5个阳性克隆细菌菌落直接悬浮于去离子水中及悬浮于含0.1%的TritonX-100后经水浴煮沸作为模板,进行PCR反应。同时提取质粒DNA,进行双酶切鉴定。结果:5个克隆的菌落PCR及酶切鉴定均检测到目的基因。结论:菌落PCR可用于筛选阳性重组克隆。菌落直接加入去离子水中作为模板进行PCR反应的方法可在大规模阳性重组DNA的筛选鉴定中推广应用。 相似文献
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胰岛素样生长因子Ⅱ及其受体在肝组织中的表达意义 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:研究胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)及其受体(IGFR)在不同肝组织中的表达及与肝癌病理学分级及乙肝病毒感染的关系。方法:采用免疫组织化学方法,检测10正常肝标本,28例肝血管瘤标本、13例肝硬化标本和42例原发性肝癌中的IGF-Ⅱ及IGFR的表达水平,分析其阳性率及与乙型肝炎病毒(HBV)感染和Edmondson分级的关系。结论:正常肝、肝硬化、肝血管瘤和肝癌中IGF-Ⅱ阳性率分别为10%,76.9%,46.4%,76.2%,IGFR阳性率分别为20%,92.3%,64.2%,61.9%,与正常肝组织相比,各阳性率有显著性差异(P<0.05),对于肝癌而言,IGF-Ⅱ及IGFR的表达在HBV阳性与阴性之间有显著差异(P<0.05);在Edmondson分级Ⅰ-Ⅱ与Ⅲ-Ⅳ之间有显著差异(P<0.05)。结论:IGF-Ⅱ和IGFR的表达可能参与了肝硬化及肝脏肿瘤的发生。在肝癌中,其表达与HBV感染及肝癌Edmondson分级亦有一定关系。 相似文献
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目的研究女性月经期前后电阻抗乳腺扫描(EIS)检查图像的变化。方法60例身体健康、25~45岁、不在孕期和哺乳期、未绝经的女性志愿者接受EIS。每人每周接受1次EIS常规检查,并且在每次月经周期前、后几天内也接受EIS检查,共持续14个月。观察月经期前后EIS成像的变化以及异常EIS成像与年龄的关系。统计分析采用配对卡方检验和卡方检验。结果观察发现异常亮斑(假阳性)在月经期前(月经期前3~5d)的EtS成像中出现,通常异常亮斑仅存在1周,到第3周(月经期后3~7d)后基本消失,并且成像结果更趋于均匀的灰度图。本组受试者中81.7%(49/60)的EIS成像在月经期前后发生变化。但也有18.3%(11/60)受试者的检查结果没有变化。60例受试者月经前3—5d与月经后4—7d的EIS检查成像比较差异有显著的统计学意义(P=0.000)。经期前、后EIS成像的变化与年龄无关(P〉0.050)。结论女性月经前EIS成像可出现假阳性表现。为了能获得正确EIS检查结果建议进行EIS检测时应避开月经期前的时间段。 相似文献
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目的:探讨survivin和Bcl-2蛋白在甲状腺癌发生发展中的作用及其临床意义.方法:用免疫组化ABC法对40例甲状腺癌组织进行survivin和Bcl-2蛋白的检测,并与20例正常甲状腺组织进行对照研究.结果:Survivin和Bcl-2在甲状腺癌组织中表达阳性率分别为67.5%、45%,而在正常甲状腺组织中未见survivin表达(P<0.05).Spearman相关分析表明survivin与Bcl-2蛋白表达呈正相关(P<0.05).结论:Survivin和Bcl-2蛋白的表达与甲状腺癌的发生发展密切相关,联合检测survivin和Bcl-2蛋白有助于甲状腺肿瘤的诊断及预后评估. 相似文献