粉尘螨蛋白致敏小鼠肺部变应性炎症模型的建立

目的　研究以粉尘螨蛋白建立小鼠肺部变应性炎症模型的方法。方法　将C57BL/6小鼠分为对照组和实验组。实验组在第1、3、5、7、9和11d采取腹腔注射进行致敏,再用粉尘螨提取液多次雾化激发（第13、16、19、20和21d）,最后1次雾化24 h后对小鼠作肺泡灌洗。对照组用生理盐水替代。观察肺组织病理变化与支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数和分类,用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定BALF和脾细胞培养上清中IL-4与IFN-γ含量,用BCA法测定BALF中蛋白的含量。结果　实验组C57BL/6小鼠肺组织呈明显炎症病理改变;BALF中细胞总数、淋巴细胞数和嗜酸性粒细胞计数明显升高（P<0.01）;BALF中IL-4明显升高（P<0.01）,IFN-γ显著降低（P<0.01）;脾细胞培养上清IL-4也明显升高,（P<0.01）,IFN-γ显著降低（P<0.01）。结论　用腹腔注射粉尘螨蛋白致敏后再雾化激发的方式能够在C57BL/6小鼠体内成功构建肺部变应性炎症模型。     

一种新的半数效量测定方法——简化随机逼近法

目的：本文根据序贯法原理设计了一种新的测定药物半数效量的方法：简化随机逼近法。并初步探讨了该法的可靠性和优缺点。方法：采用简化随机逼近法测定了普鲁卡因和戊四氮腹腔注射对小鼠的LD50,并与经典的Bliss法进行比较。结果：简化随机逼近法测得的普鲁卡因和戊四氮的LD50分别为207.5mg/kg、107.2mg/kg,而Bliss法测得的LD50分别为206.1mg/kg和101.2mg/kg。两法测定结果相近,但简化随机逼近法更为省时、省动物且计算简便。结论：简化随机逼近法适用于药效反应快、终点判定所需时间短的药物LD50或ED50的测定。     

藏药红景天对大鼠肺纤维化保护作用及机制探讨

目的观察红景天对肺纤维化大鼠肺组织I型胶原、转化生长因子β1(TGF-β1)及其信号通路分子Smad4表达的影响,探讨红景天对大鼠肺纤维化的防治作用与机制。方法健康SD大鼠40只随机分为4组:模型组(A组),正常对照组(B组),红景天14d治疗组(C组),红景天28d治疗组(D组)各10只。博莱霉素(BLM)气管内滴入建立大鼠肺纤维化模型,正常对照组气管内滴入生理盐水。在造模的第2日治疗组予红景天0.21g/kg灌胃干预,于第14,28日取肺组织,运用组织芯片结合图象分析技术,通过苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理学改变,用免疫组化检测I型胶原蛋白和TGF-β1的表达,实时荧光定量RT-PCR检测I型胶原和TGF-β1的mRNA表达,原位杂交技术对Smad4 mRNA进行定位定量分析。结果红景天在两时相皆抑制I型胶原,TGF-β1的表达。C组I型胶原蛋白的IOD值为(0.362±0.241),D组I型胶原蛋白IOD值为(0.334±0.122),与A组(0.513±0.384)相比有统计学意义(P均<0.05)。C组TGF-β1蛋白的IOD值为(0.062±0.013),D组TGF-β1蛋白IOD值为(0.058±0.011),与A组(0.100±0.005)相比有统计学意义(P均<0.05)。C组I型胶原mRNA相对表达量为(0.041±0.017),D组I型胶原mRNA相对表达量为0.040±0.021,与A组0.071±0.054相比有统计学意义(P均<0.05)。C组TGF-β1 mRNA相对表达量为(0.0025±0.0013),D组TGF-β1 mRNA相对表达量为(0.0030±0.0005),与A组(0.0170±0.0157)相比有统计学意义(P均<0.05)。肺组织Smad4 mRNA表达呈局灶性,在炎症和胶原沉积部位表达较明显,而治疗组和模型组比较无统计学意义(P均>0.05);治疗组Smad4 mRNA表达量与正常对照组(0.165±0.099)比较亦无统计学意义(P>0.05)。结论红景天对大鼠肺纤维化具有一定治疗作用,其机制可能是通过抑制I型胶原及TGF-β1表达,从而干扰TGF-β-Smads信号通路对基因表达、蛋白合成的调节而实现的。     

龙血竭对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β/Smads信号通路分子mRNA表达的影响

目的 观察龙血竭对肺纤维化大鼠肺组织 TGF-β信号通路分子TGFβRⅡ及Smad4 mRNA表达的影响,探讨其防治肺纤维化的作用及机制. 方法将30只SD大鼠随机分为3组:肺纤维化模型组,龙血竭治疗组和正常对照组,每组10只,雌雄各半.模型组和治疗组大鼠均以博来霉素(5 mg/kg)气管内滴入诱导肺纤维化;对照组以等量生理盐水气管内滴入.从第2 d起,治疗组大鼠给予龙血竭(180 mg/kg,溶于2 mL生理盐水中)灌胃,对照组和模型组大鼠则以等量生理盐水灌胃.所有大鼠于第29 d早晨处死.HE染色检测肺组织病理改变;原位杂交检测肺组织TGFβRⅡ及Smad4 mRNA表达;免疫组化法(S-P法)检测Ⅰ型胶原纤维. 结果模型组肺组织内炎性细胞计数为22243.60±5011.55,治疗组为12913.78±5640.12,两组比较差异有统计学意义(P＜0.01).经龙血竭治疗后大鼠肺内TGFβRⅡ mRNA表达较模型组降低(P＜0.01).治疗组Smad4 mRNA表达与模型组比较差异无统计学意义.治疗组和模型组比较,Ⅰ型胶原纤维表达减弱(P＜0.01). 结论龙血竭能有效地减轻肺纤维化大鼠的纤维化程度,其机制可能与抑制肺内TGFβRⅡ mRNA的表达,从而阻止Ⅰ型胶原过度沉积有关.     

海产品中甲醛的测定

《食品卫生法》和食品添加剂管理办法规定，食品在加工过程中不准加入甲醛。但一些不法制售单位和个体，为了防腐，在某些海产品的加工制作过程中加入甲醛，对人民健康造成极大危害。目前食品中甲醛测定无国家标准方法，2005年4月本文对食品中甲醛测定方法进行了研究，回收率、精密度和准确度基本达到要求，检出限为0．5μg重现性好，用于食品中甲醛测定结果满意。     

绿色荧光蛋白标记的恶性组织细胞增生症瘤细胞眼前房移植模型

目的建立绿色荧光蛋白(GFP)标记的恶性组织细胞增生症瘤细胞cy15在眼前房生长及浸润的模型,探讨cy15细胞在前房生长的规律及GFP标记活细胞的优势。方法将带有GFP的逆转录病毒MP71-GFP-PRE转入cy15瘤细胞,获得稳定表达GFP的cy15GFP细胞系。20只BALB/C小鼠(20只眼)每只眼前房注入2μl细胞密度为2×106个/ml的cy15GFP瘤细胞悬液,术后分别在裂隙灯和荧光显微镜下观察瘤细胞在前房的生长情况,连续观察30d,分别在瘤细胞植入前房后第15d、20d、30d时处死小鼠做眼球HE病理切片。结果成功地建立了稳定表达GFP的cy15GFP细胞系。接种的20只BALB/c鼠眼前房均可见肿瘤细胞生长,借助于荧光显微镜能动态地观察到肿瘤细胞在活体小鼠眼前房的生长浸润过程。结论建立的GFP标记的肿瘤细胞眼前房接种模型为研究眼内肿瘤细胞生长与浸润的规律以及抗肿瘤药物的筛选提供了一种新的手段。     

红景天对大鼠肺纤维化治疗作用初探

目的探讨红景天对大鼠肺纤维化的治疗作用。方法采用SD大鼠进行博莱霉素（BLM）气管内滴注，建立肺纤维化动物模型。肺组织行苏木精伊红（HE）和胶原纤维染色，光镜下观察其病理变化，原位杂交检测转化生长因子β1受体ⅡmRNA（TβB．ⅡmRNA），图像分析技术对肺部炎症细胞核数、胶原纤维、T阻ⅡmRNA表达的积分光密度（IOD）值定量。结果通过对肺组织病理学观察、比较模型组和对照组炎症细胞核数（P〈0．05）及胶原纤维IOD值（P〈0．05），提示大鼠肺纤维化模型复制成功。红景天治疗组和模型组的肺组织病理学改变、炎症细胞核计数（P〈0．05）及胶原纤维IOD值（P〈0．05）比较，均有明显差异。TβR Ⅱ mRNA呈局灶性表达，TβR ⅡmRNA IOD值统计学上无明显差异（P〉0．05）。结论红景天对大鼠肺纤维化有一定治疗作用。     

沐舒坦治疗慢性阻塞性肺病的临床疗效

目的:评价沐舒坦治疗慢性阻塞性肺病患者咳嗽、咳痰的疗效及安全性。方法:观察40例慢性阻塞性肺病患者治疗前后咳嗽、咳痰(排痰难易程度、痰性状、痰黏度)等临床症状的变化。结果:(1)沐舒坦组治疗慢性阻塞性肺病临床症状、体征的临床疗效有效率为47.5％;祛痰作用为95％。患者在临床疗效、祛痰作用和综合临床评价等方面其治疗后积分都较治疗前有显著改善(P<0.05)。(2)对部分病例观测了治疗前后肺功能的变化情况,有完整治疗前后肺功能检查病例22例(占55％),治疗后有效率为27.27％。结论:沐舒坦用于慢性阻塞性肺病咳嗽、咳痰的临床疗效明显,特别是痰液黏稠、排痰困难患者其祛痰疗效确切,使用安全,值得临床进一步推广使用。     

工作场所空气中17种元素的电感耦合等离子体质谱测定法

目的建立电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测定工作场所空气中锑、砷、铍、镉、铬、钴、铜、铅、锰、钼、镍、硒、铊、钍、铀、钒、锌共17种元素及其化合物的方法。方法用微孔滤膜、浸渍后的微孔滤膜采集工作场所空气中元素及其化合物,用硝酸湿法消解或者用10%硝酸溶液60℃水浴超声提取,电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定。结果待测元素在实验选定的范围内(0μg/L～200μg/L、0μg/L～100μg/L、0μg/L～50μg/L)具有良好的线性关系,r均 0. 999;检出限为0. 001 281μg/L～3. 517μg/L,最低检出浓度为3. 416×10-7mg/m3～9. 380×10-4mg/m3(以采集75 L空气计算);各元素的平均回收率在90. 2%～109. 5%,RSD在2. 1%～6. 91%。国家标准参考物质的分析结果在标准值范围内。样品在室温下As、Tl、Th、U至少可以保存14 d,其他13种元素可长期保存。结论本方法简便、快速、准确且灵敏度高,可用于工作场所空气中17种元素及其化合物监测。     

左炔诺孕酮宫内缓释系统对增生过长子宫内膜IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ表达的影响

目的：探讨左炔诺孕酮宫内缓释系统（LNG-IUS）对增生过长子宫内膜胰岛素样生长因子（IGF）的影响。方法：应用免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物（SABC）方法分别对20例子宫内膜增生过长患者宫腔内置入LNG-IUS前及置入3个月后子宫内膜IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ的表达及20例口服炔诺酮3个月后的增生过长宫内膜IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ的表达。结果：与治疗前比较，增生过长的子宫内膜官腔内置入LNG-IUS3个月后，IGF-Ⅰ表达下降，IGF-Ⅱ的表达上升（P均〈0.05）。LNG-IUS治疗后子宫内膜IGF-Ⅰ表达下降比炔诺酮治疗后的子宫内膜IGF-Ⅰ表达下降明显，两者比较差异有显著性（P〈0．05），IGF-Ⅱ在LNG-IUS治疗后的子宫内膜的表达高于炔诺酮治疗后的子宫内膜，间质细胞尤为明显，但统计学无显著性意义。结论：LNG-IUS可通过下调增生过长子宫内膜IGF-Ⅰ表达及上调IGF-Ⅱ的表达促使子宫内膜分化，逆转增生过长现象。