Survivin及其剪接变异体在脑胶质瘤中的表达

目的 探讨凋亡蛋白抑制因子Survivin及其剪接变异体Survivin-Δex3、Survivin-2B在脑胶质瘤发生发展中的作用.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Survivin及其剪接变异体Survivin-Δex3、Survivin-2B mRNA在62例脑胶质瘤和10例正常脑组织标本中的表达水平.结果 Survivin、Survivin-Δex3及Survivin-2B mRNA在脑胶质瘤中表达阳性率分别为67.7%、30.6%和17.7%,三者在正常脑组织中均无表达;Survivin和Survivin-Δex3 mRNA表达阳性率在脑胶质瘤及正常脑组织之间分别具有极显著差异(P=0.000<0.01)和显著差异(P=0.010<0.05);Survivin mRNA表达阳性率在低恶性度和高恶性度脑胶质瘤之间以及脑胶质瘤不同病理级别间分别具有极显著差异(P=0.002<0.01,P=0.004<0.01).结论 Survivin在脑胶质瘤发生发展过程中具有重要作用,其剪接变异体Survivin-Δex3、Survivin-2B也发挥一定作用;Survivin可作为脑胶质瘤生物治疗的一个良好分子靶点.     

大型听神经瘤术后并发症的预防及护理

大型听神经瘤是指肿瘤直径超过 30mm者[1 ] 。听神经瘤位于后颅窝桥脑小脑角 ,首先压迫位听神经和面神经。随着肿瘤的长大 ,临床症状逐渐加重并增多。向小脑桥脑隐窝发展压迫三叉神经 ,向下发展压迫舌咽、迷走、副神经 ,向内发展压迫小脑 ,引起共济失调 ,严重的压迫脑干 ,使脑干移位 ,造成颅内高压。由于解剖位置关系复杂 ,手术难度高 ,术后并发症多 ,对疾病的康复极为不利。近年来 ,我科不断探讨总结经验 ,使并发症的发生率逐渐减少 ,收到了良好的效果。现将预防和护理措施介绍如下。1　临床资料1 .1　一般资料　自 2 0 0 0年 1月～ 2 0 0 …     

BALB/c小鼠C6脑胶质瘤模型的建立及生长特性观察

目的建立BALB/c小鼠C6脑胶质瘤模型,观察其生长特性.方法将体外培养的细胞数为1×103,1×104,5×104个分别悬浮于无血清DMEM培养液10μl中的C6胶质瘤细胞接种于BALB/c小鼠左顶枕区,观察不同C6细胞浓度实验鼠的生存状态及肿瘤生成率.对自然死亡荷瘤鼠行组织病理学和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组织化学检查.另外,在实验3 d、6 d、9 d、12 d、15d、20 d时解剖实验鼠,对肿瘤体积进行统计测量.结果该方法建立的胶质瘤动物模型在组织病理学上接近人脑胶质瘤,且颅内生长稳定.3组成瘤率分别为65%、75%、80%.未见颅外转移病灶,实验周期短,重复性较好.结论BALB/c小鼠C6脑胶质瘤模型的肿瘤生长特性及病理特征与人脑胶质瘤相似,可作为临床胶质瘤基础研究的理想模型.     

脑胶质瘤自杀基因疗法研究进展

自杀基因疗法是近年来备受关注的一种治疗胶质瘤的方法，可分为单自杀基因疗法和融合基因疗法．本对这两种自杀基因疗法的原理及其在治疗胶质瘤中的运用进行综述，并介绍了其临床运用和进一步发展方向．胶质瘤(gnoma)是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤，其传统治疗以手术为主，辅以放疗、化疗等辅助治疗，疗效欠佳．基因治疗(gene therapy)作为治疗胶质瘤的一种新的辅助手段，逐渐受到人们的重视和关注．自杀基因疗法(suicide genetherapy)是众多基因治疗策略中疗效最明显的一种，也是最有前途的治疗策略之一.本就近年来胶质瘤自杀基因疗法研究进展作一综述。     

体外培养大鼠脑皮层神经元机械性损伤后mGluR1a及Homer蛋白的表达及其意义

目的：研究体外培养大鼠脑皮层神经元机械性损伤后mGluRla及Homer1a蛋白表达及其意义．方法：实验分为损伤与对照组，将SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7d．损伤组以微量移液器塑料滴头在培养孔内“十”字形划割，造成机械性损伤，伤后不同时间点(10，30min，1，3，6，12，24h)行神经元免疫组化染色；对照组除不进行“十”字形划伤培养神经元外，其他处理同损伤组．结果：损伤组神经元mGluRla与Homerla蛋白免疫组化染色均呈阳性，自伤后10min持续至伤后24h，阳性染色颗粒分布于胞质、胞膜及突起；对照组mGluRla与Homerla蛋白免疫组化染色均呈弱阳性．结论：体外培养大鼠脑皮层神经元机械性损伤后mGluRla及Homerla蛋白表达时间与分布规律基本一致，提示Homerla与mGluRla可能共同参与了神经元损伤过程。     

神经干细胞原代培养及GABA能神经元的诱导分化

目的探讨神经干细胞的原代培养及γ-氨基丁酸(GABA)能神经元的诱导分化.方法取孕16 dWistar大鼠的胚鼠全脑,进行体外培养,并对培养的神经干细胞以及诱导分化的GABA能神经元进行鉴定.结果培养24h后,出现2～4个细胞的细胞球.分化2d后,神经球贴壁后伸出细长突起,并可和周边神经球伸出的突起连接.神经球周边可见大量散在贴壁的双极或多极细胞.免疫荧光染色可见神经球均有nestin、NF200、GFAP阳性细胞.取第3代神经球行GABA能神经元定向分化.分化24h后,实验组细胞球贴壁.3d后,实验组细胞球周边有大量散在分布细胞贴壁生长,胞体圆形较大,有1～2个细长突起.免疫荧光显示,实验组周边散在的贴壁细胞多为GAD65阳性细胞.GAD65阳性细胞分化率实验组(85.97±2.78)%、对照组(18.16±2.29)%,P<0.01.结论本实验利用寡核苷酸序列特异性阻断了bHLH基因家族的调控因子之一Hes1,解除了其对bHLH的抑制,促进了神经干细胞向神经元的分化.实验还发现,阻断Hes1后大大提高了神经干细胞向GABA神经元分化的比率.     

EGF、bFGF、NGF、RA对小鼠神经干细胞定向分化的调控

目的 观察EGF、bFGF、NGF、RA对小鼠神经十细胞(NSCs)增殖及定向分化的影响。方法 用无血清培养与单细胞克隆技术对小鼠胚胎脑组织进行分离、培养，随后分别加人EGF、bFGF、NGF、RA等因子观察其对NSCs定向分化的影响。结果 EGF培养的小鼠NSCs，2d后见细胞集落形成(典型克隆球)；克隆球中的细胞成圆形，形态规则，未见细胞突起，呈桑椹状聚集；经血清诱导分化后，则主要为星形胶质细胞，仅有个别的神经元。而bFGF培养的NSCs，生长良好，但克隆球数目较EGF组少，克隆球体积略小。3bFGF与EGF共同培养的NSCs，除诱导分化后，分化的细胞性质与EGF组的不同外，其余同EGF组。NGF对神经球的形成无明显的影响。RA组的克隆球数目量很少，形态以球形为主，部分细胞贴壁并出现突起。结论 EGF，bFGF对NSCs的增殖及分化种类均有一定的影响。而NGF与RA则主要影响其细胞的分化，且两者的共同点都是促使其向神经元方向分化。     

Cyclin D1/D2/D3 在大鼠脑胶质瘤组织中的表达

目的探讨细胞周期素(cyclin)D1/D2/D3在大鼠脑胶质瘤动物模型肿瘤组织中的表达.方法将体外培养大鼠C6胶质瘤细胞(细胞数为3×105个),借助动物立体定向仪接种于Wistar大鼠左侧尾状核区,解剖标本,行组织病理学检查,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化定性监测.随后检测肿瘤组织中cyclin D1/D2/D3蛋白表达.结果 cyclinD1/D2/D3均呈阳性表达.cyclin D1/D3主要在细胞核表达;cyclinD2则主要在胞浆表达,部分细胞核呈阳性,不同存活期荷瘤鼠其瘤组织中cyclin D1/D2/D3表达量不同.结论 cyclinD1/D2/D3的过分表达,对大鼠脑胶质瘤细胞增殖的失控起着一定的调节作用.荷瘤鼠生存期与cyclin D族的表达量呈负相关关系.     

循证护理在显微神经外科临床中的应用体会

总结分析循证护理在显微神经外科临床工作中的实施体会。其具体过程为显微神经外科临床循证护理的内容程序和基本技能。充分发挥循证护理的科学性优势，实现最佳护理。     

人脑胶质瘤组织中cyclin D1和cyclin E表达的研究

目的：研究人脑胶质瘤中细胞周期素(cyclin) D1和cyclin E的表达与肿瘤病理等级的关系。方法：采用免疫组织化学法检测52例人脑胶质瘤和8例正常脑组织标本中cyclin D1和cyclin E的表达。结果：人脑胶质瘤组中有29例cyclin Dl的表达。随着胶质瘤病理分级增高，高、低恶性度胶质瘤的“阳”性率和平均标记指数均正著升高，两者差异有统计学意义，P<0．05。cyclin Dl与cyclin E的平均标记指数之同呈明显正相关，Pearson相关系数r-0．644，P<0．0l。结论：cyclin Dl与cyclin E在胶质瘤中被异常表达，是肿瘤发生和恶性转化的重要促进因子。