家兔中央颈核向小脑的投射—放射自显影研究

本研究采用放射自显影顺行追踪法研究了家兔脊髓中央颈核向小脑的投射。将~3H-亮氨酸注入6只家兔脊髓C_2 节段灰质中央颈核所在部位,经放射自显影处理后,观察银颗粒标记的纤维及末梢在小脑内的分布。标记的苔藓末梢主要见于小脑前叶Ⅰ—Ⅳ小叶,其分布呈与正中矢状面平行的纵行条带,并均匀存在于叶片的深部和浅部。少数末梢还见于后叶蚓部的Ⅷ小叶 B 部、Ⅸ小叶 A 部和旁正中小叶。标记末梢出现在双侧小脑,但以注射部位的对侧为主。标记纤维还见于对德脑干和小脑上脚。本文结果提示,家兔中央颈核直接发出纤维投射到小脑,其机能可能与接受来自颈部皮肤外感受器的输入和来自肌腱、关节的本体感受性输入有关。     

慢性帕金森病模型猴脑131Ⅰ-epidepride显像研究

多巴胺(DA)系统与帕金森病(PD)发病的机理、治疗及预后关系非常密切。笔者在以前研究基础上,对DA能神经毒素N-甲基4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)损毁30个月慢性PD模型猴进行D2受体研究。现报道如下。一、资料与方法Epidepride显像剂前体(江苏省原子医学研究所提供);Picker/MarconixIRIX二探头SPECT仪(Picker公司)。实验     

Nurrl基因在大鼠体外培养骨髓基质细胞的表达

目的：为获得高效表达孤儿核受体(orphan nuclear receptor，Nurrl)基因的骨髓基质细胞。方法：采用分子克隆技术，构建携带Nurrl基因的重组腺相关病毒(adeno-associated virus，AAV)载体；与包装质粒pAAV-RC和辅助质粒phelper一起用磷酸钙法转染包装细胞HEK293制备具有感染活性的AAV-Nurrl病毒粒子；用病毒上清液感染原代培养的大鼠骨髓基质细胞(Marrow stromal cells，MSCs)，并用免疫细胞化学方法检测阳性细胞。结果：经酶切鉴定和DNA测序，得到了序列正确的重组pAAV-Nurr1；感染HTl080细胞进行病毒滴度测定，每mL病毒贮存液可达10^12个阳性细胞；获得了Nurrl阳性的骨髓基质细胞，阳性率在60％以上。结论：重组AAV携带的Nurrl基因能够在MSCs中表达，本文为进一步探讨将该细胞用于帕金森病基因治疗的可能性研究奠定了基础。     

慢性帕金森病模型猴脑^131I-epidepride显像研究

多巴胺（DA）系统与帕金森病（PD）发病的机理、治疗及预后关系非常密切。笔者在以前研究基础上，对DA能神经毒素N-甲基4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶（MPTP）损毁30个月慢性PD模型猴进行D2受体研究。现报道如下。     

Nurr1在MN9D细胞中的过表达及其对酪氨酸羟化酶的影响

目的 :观察MN9D细胞中Nurr1的表达和分布及Nurr1过表达对酪氨酸羟化酶的影响。 方法 :应用高压液相色谱、免疫细胞化学、转基因、Westernblot和Northernblot等方法检测了MN9D细胞中多巴胺及其代谢物的水平和Nurr1蛋白在细胞中的分布 ,建立了过表达Nurr1的细胞株并观察了Nurr1过表达对TH基因的影响。结果 :MN9D细胞裂解液中含有大量多巴胺及其代谢物 ;Nurr1蛋白主要分布在MN9D细胞的胞质中 ,尤以核周最多 ;MN9D细胞中有Nurr1的mRNA存在和蛋白质的表达 ;过表达Nurr1的MN9D细胞A1株酪氨酸羟化酶表达增高。结论 :Nurr1与多巴胺能神经元发育有关 ,有可能用于帕金森病的基因治疗。     

神经元和胶质细胞的相互作用与帕金森病

帕金森病是黑质多巴胺能神经元变性坏死而引起的神经系统退行性疾病。胶质细胞介导的免疫炎症反应是导致该疾病发生的主要因素之一。活化的小胶质细胞和星形胶质细胞释放的多种炎症因子不仅发挥着保护和(或)损伤神经元的作用,而且存在着复杂的相互联系和作用。不仅如此,神经元也可以反过来调控胶质细胞的活性。因此,在帕金森病的发病机理中,神经元和胶质细胞共同构成了一个复杂的神经系统网络。     

BEHAVIOR AND ACTIVITIES IN THE CENTRAL NERVOUS SYSTEM AFTER ACTIVATION OF L-TYPE CALCIUM CHANNELS IN MICE

The dimribmion of the immediave eazly gene c-fos expression in the mouse central nervous system after subcutaneous injection of Bay K 8644 was observed immunohlstochemlcally. Half an after after injection,cfos proecein(FOS) was expzessed in the piriform cortex,sensorimotor cortex,caudate Imtamen,thalamic paraventriculsr nucleus and striate cortex, etc. Intense FOS immunoreactlve (FOS-ir) cells were seen during 2～4 h after injection. The ;results suggested that the distribution of FOS-ir cells aftel subcutaneous injection of Bay K 86LL4 was coincident with that of L-type calcium chentmls ;.rt the different areas of tee CNS. After Bay K 8644 injection, mice appeared seizure-like behavior. The percentage of cells double-labelled by FOS and CaBP immunoreactivities in the observed regions was about 60. 2～72. 8% in CaBP-ir cells. It suggested that most CaBP-ir cells may have L-type calcium channels.     

乙酰胆碱酯酶在家兔小脑内的分布

研究了11只家兔小脑内AChE活性的分布。采用改良的经典组织化学技术来显示AChE活性。小脑皮质颗粒层一般有很强的AChE活性,而浦肯野细胞层的分子层的浅部则呈AChE反应阴性。分子层的深部和小脑白质的AChE活性较弱。而且有很多阳性神经元出现在后叶的分子层中,以X小叶最为密集。在小脑白质中,发现5条与正中面相平行的AChE活性较强的纵带。其中蚓状正中面上的正中带出现在除Ⅵ、Ⅶ小叶以外的各小叶中;对称分布的内侧带出现在前叶的Ⅱ到Ⅴ小叶和后叶的Ⅷ、Ⅸ小叶;外侧带只出现在Ⅸc和Ⅸd分叶。小脑中央核显示很强的AChE活性。在颗粒层的胶质细胞和白质中发现有丁酰胆碱酯酶(BuChE)的活性,而且在近颗粒层的白质活性更强。     

人脑肿瘤c-erb B基因扩增的研究

以 erb B 基因(0.5 kb)为探针,用斑点吸印转移和杂交的方法对21例中枢神经系统肿瘤进行了 erb B 基因扩增的研究。结果显示7例脑膜瘤标本均存在 erb B 基因的扩增,扩增倍数为16～64倍;14例脑胶质瘤(Ⅲ或Ⅳ级)中10例出现了 erb B 基因的扩增,扩增倍数为16～32倍。该结果提示 erb B 基因的扩增可能在人肿瘤的形成中起重要作用,且其扩增程度可能与肿瘤的恶性度和临床预后有关。     

经侧脑室注射脂多糖诱导大鼠黑质部位小胶质细胞激活及多巴胺能神经元损伤的研究

目的观察经脑室注射脂多糖(LPS)后大鼠的黑质部小胶质细胞激活及多巴胺(DA)能神经元的变化,探讨脑内炎性反应在黑质DA能神经元慢性变性过程中的作用。方法健康雄性SD大鼠30只,随机分为生理盐水(NS)对照组和LPS组,分别向大鼠右侧脑室注射20μL NS或50μg LPS,40周后用免疫组织化学方法检测大鼠黑质小胶质细胞是否激活、激活的程度(OX-42及OX-6抗体水平),以及酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元的形态和数量。以Fluoro-Jade B(FJB)染色法检测黑质部位神经元变性情况。结果 (1)NS对照组大鼠黑质部位OX-42阳性小胶质细胞呈静息状态,染色浅。LPS组大鼠黑质部OX-42阳性小胶质细胞呈部分激活状态,染色深。两组大鼠黑质部位均未发现OX-6阳性小胶质细胞。(2)NS对照组大鼠黑质部位有大量深染的TH阳性神经元。LPS组大鼠黑质部位TH阳性染色神经元数目(99.11±20.31)比NS对照组(189.52±12.12)减少47.7%(P<0.01)。(3)两组大鼠黑质部位均未见FJB阳性染色神经元。结论经侧脑室单次注射LPS可能造成大鼠黑质部位小胶质细胞长期慢性激活及DA能神经元慢性迟发性功能性损伤。