乏氧/辐射双敏感启动子介导分泌型人TRAIL基因对肺腺癌A549细胞凋亡的影响

目的:构建乏氧(HRE)/辐射(Egr1)双敏感启动子介导的分泌型人TRAIL(shTRAIL)基因表达载体pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL,观察其对肺腺癌A549细胞周期及增殖的影响.方法:利用化学合成HRE上下链,PCR扩增得到双链HRE;利用基因重组技术构建含有HRE/Egr1双敏感启动子介导shTRAIL的表达载体pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL,经酶切、PCR和测序鉴定正确后,干扰质粒经脂质体介导转染肺腺癌A549细胞,利用流式细胞术和TUNEL检测细胞凋亡变化;利用蛋白质印迹法检测Caspase-3蛋白表达.结果:质粒大小为6 282 bp,BamH Ⅰ和Sma Ⅰ酶切,所得片段大小分别为1 284和4 998、2 292和3 990 bp;以载体为模板,Egr1和shTRAIL引物进行PCR扩增,可得到469 bp和820 bp产物;将pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL进行测序,所得结果与设计一致,说明构建正确.转染肺腺癌A549细胞后,乏氧与辐射能够增加细胞凋亡的百分比(P<0.05或P<0.01),两者联合,作用更明显,P<0.01;而且乏氧与辐射也能诱导Caspase-3表达的增强(P<0.05或P<0.01),两者联合作用,表达增加更明显,P<0.01.结论:乏氧/辐射双敏感启动子介导分泌型人TRAIL基因在乏氧和辐射条件下能够增加肺腺癌A549细胞的凋亡,诱导Caspase-3蛋白表达的增加,两者联合作用效果更明显.     

老年胃癌患者的外科治疗

目的探讨老年胃癌患者的外科手术治疗方法及其治疗效果。方法回顾性分析我院1999年6月至2003年6月226例65岁以上老年胃癌患者行手术治疗的临床资料。胃癌根治性切除122例(D157例,D232例,D333例),姑息性切除56例,行远端胃切除术107例,近端胃切除术51例,全胃切除术15例,联合器官(脾、胰尾、横结肠)切除5例,未切除41例。结果围手术期死亡率为3.1%,手术并发症发生率为17.3%。随访207例,平均随访时间37(12~60)个月。总体中位生存时间32.5个月;根治性切除组平均为37个月,姑息性切除组为19个月,未切除组为8个月;5年生存率根治性切除组为28.0%,姑息性切除组为2.1%,未切除组为0。根治性切除者的术后生存时间明显长于姑息性切除者,差异有显著意义(P<0.01)。结论老年胃癌术后并发症发生率高。对老年胃癌患者积极行根治性切除术,能延长生存期,改善患者生活质量,但应做好围手术期处理。     

我院静脉用药调配中心差错分析与防范措施

目的提高静脉用药调配中心输液质量,保证临床用药安全性和合理性。方法对我院静脉用药调配中心常见的各种差错进行分析总结,并提出防范措施。结果通过防范措施的实行,我院静脉用药调配中心的差错呈明显下降趋势。结论防范措施的出现,提高了我院临床用药的质量。     

人参皂苷Rg3联合X射线照射对黑色素瘤细胞生长的抑制作用

目的：观察人参皂苷Rg3联合X射线照射对黑色素瘤细胞生长的抑制作用。方法：建立黑色素瘤C57BL/6J小鼠动物模型,观察Rg3联合照射对小鼠体内肿瘤生长的影响;通过黑色素瘤B16细胞体外培养,观察Rg3对其细胞受照后存活率的影响。结果：小鼠接种B16细 胞第6天,Rg3给药组肿瘤体积明显缩小,与对照组比较差异有显著性（P<0.001）;照射后12 d,照射组和给药加照射组肿瘤均明显缩小,后者缩小更为显著（P<0.05）;同时,Rg3联合X线照射使其细胞存活率下降,与其他3组比较差异有显著性(P<0.05)。结论：人参皂苷Rg3具有抑制肿瘤细胞生长的作用,联合X射线照射对抑瘤具有放射增敏作用。     

2种海拔地区静脉留置针输液的效果观察

目的 比较2种海拔地区患者使用静脉留置针的效果.方法 纳入使用静脉留置针进行静脉输液患者为研究对象,选取收治于海拔高度为3828 m的喀喇昆仑山某医疗站的军人患者78例作为观察组;收治于海拔高度为800 m新疆乌鲁木齐市某医院的军人患者78例为对照组.2组患者静脉穿刺方法及操作者均相同.比较2组患者穿刺成功率、留置时间、并发症发生率及患者满意度情况.结果 观察组留置针穿刺成功率、留置时间和患者满意度均低于对照组(P<0.05),而静脉炎、液体渗出、局部感染和管路堵塞并发症发生率高于对照组(P<0.05),2组患者导管脱出发生率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 高海拔地区患者使用静脉留置针的效果低于平原地区患者,穿刺成功率较低,留置时间较短,并发症发生率较高.     

利用RRLC-QqQ-MS^n方法分析比较青皮、陈皮提取物在大鼠尿液及粪便中代谢及排泄过程北大核心CSCD

考察青皮、陈皮醇提物经灌胃给药后,黄酮及香豆素等特征性多酚类成分在大鼠尿液及粪便中的代谢及排泄过程。分别对大鼠灌胃给予青皮及陈皮70%乙醇提取物,收集尿液和粪便。利用RRLC-QqQ-MS^n技术,比较多酚类成分在醇提物、大鼠尿液及粪便中的含量。通过与对照品比较,从青皮、陈皮醇提物中共鉴定了30个多酚类成分,包括黄酮及其苷类、二氢黄酮及其苷类、黄酮醇及其苷类、多甲氧基黄酮类、柠檬苦素类及香豆素类等。各种不同类型化合物,入血后经体循环代谢及肾脏排泄在尿中的检测,较经肠道代谢及排泄在粪便中的检测存在差异。分析结果表明,多甲氧基黄酮类和二氢黄酮苷元类化合物主要经过尿液排出体外,二氢黄酮苷类和柠檬苦素类化合物主要经过粪便排出体外,香豆素类化合物可能经体内代谢转化,在粪便和尿液中几乎均未检测到。     

环氧合酶-2对胃癌淋巴管形成的影响

目的探讨环氧合酶-2（COX．2）对胃癌淋巴管形成及预后的关系。方法2004年2月-2004年10月临床资料完整的手术切除的并经病理证实的胃癌患者63例,采用免疫组化方法检测63例胃癌组织中COX-2、VEGF-C、受体VEGFR-3的表达及微淋巴管密度（MLD）。逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测人胃癌细胞SGC-7901分别加入不同浓度的COX-2抑制剂尼美舒利与加入外源性前列腺素E2（PGE2）后VEGF-CmRNA及蛋白的变化。结果63例胃癌石蜡标本中COX-2、VEGF-C阳性表达率为77．6％、72．9％。COX-2与VEGF-C、淋巴管密度、淋巴结转移呈正相关（P〈0．01）。COX-2与胃癌生存率呈负相关,COX-2表达阴性组5年生存率显著高于其表达阳性组（P〈0．05）。尼美舒利以剂量依赖性方式下调VEGF—CmRNA表达,而PC肥以剂量依赖性方式上调VEGF．CmRNA表达。结论COX-2可能通过上调VEGF-C的表达,促进胃癌的淋巴管形成和淋巴结转移,并影响胃癌患者的预后。     

HRE对A549细胞中Egr-1启动子辐射诱导表达的影响

目的构建乏氧/辐射双敏感启动子介导的增强型绿色荧光蛋白表达载体,探讨HRE对A549细胞中Egr-1启动子在乏氧和常氧条件下辐射诱导表达的影响。方法利用化学合成HRE上、下链,PCR扩增得到双链HRE;利用基因重组技术构建HRE/Egr-1双敏感启动子介导增强型绿色荧光蛋白的表达载体pcDNA3.1-HRE/Egr-1-EGFP,经酶切、PCR和测序鉴定正确后,质粒经脂质体介导转染肺腺癌A549细胞,不同剂量照射和不同浓度乏氧后,流式细胞术检测EGFP的表达,以此反映Egr-1的表达特性。结果酶切、PCR和测序鉴定pcDNA3.1-HRE/Egr-1-EGFP质粒构建正确。流式细胞术结果显示常氧条件下,不同剂量X射线照射后,A549细胞中EGFP表达在随着时间延长而逐渐增加,2Gy和4 Gy照射后12 h时达到最大,而6 Gy、8 Gy和10 Gy照射后在8 h时达到最大,而后逐渐降低,与0 h表达比较具有显著性差异(P0.05,P0.01)。0.1%-2.5%的氧浓度条件下,EGFP表达随着氧浓度和剂量的增加而逐渐增加,在1%氧浓度时表达量最大,与常氧条件下不同剂量照射后8 h表达比较具有显著性差异(P0.05,P0.01);在5%-10%氧浓度条件下,EGFP表达与常氧条件下基本一致。结论 HRE具有增强A549细胞中Egr-1启动子诱导表达的特性,对肿瘤基因-放射治疗具有参考意义。     

斯普林治疗放、化疗所致血小板减少和改善症状的临床观察

目的观察斯普林治疗放、化疗所致恶性肿瘤患者骨髓抑制的近期疗效及改善一般状况的情况.方法自2000年1月～2003年10月本院收住的178例骨髓不同程度抑制的放、化疗患者随机分为两组,治疗组90例(斯普林 放、化疗),对照组88例(维生素B6 肌苷 放、化疗).两组放、化疗方法、剂量基本相同.治疗组行斯普林静脉点滴,连续应用7天.分别观察第3、5、7天178例肿瘤患者外周血象变化以及一般状况的改善情况.结果治疗后第3天,治疗组患者外周血中血小板数目有增多的趋势,但无统计学意义.第5天及第7天血小板较对照组明显增多,有统计学意义(P＜0.05).治疗后第7天,患者外周血中白细胞数目明显增多,与对照组相比,有统计学意义(P＜0.05).血红蛋白和红细胞数目与对照组比较,没有明显变化.但治疗组的一般状况的改善较对照组有显著性的差异(P＜0.05).结论斯普林是一种可治疗放、化疗所致血小板数目减少的药物,同时对放、化疗引起的白细胞减少也有一定疗效,并在一定程度上改善了患者的一般状况,提高了患者的生活质量.     

多次小剂量pEgr-IFN-γ基因-放射治疗的抑瘤效应及其机制的研究

目的:探讨多次小剂量pEgr-IFN-γ基因-放射治疗对接种B16黑色素瘤小鼠的抑瘤效应及其免疫学机理.方法:肿瘤局部注射脂质体包裹的重组质粒pEgr-IFN-γ后36 h,接受不同剂量X射线照射,观察各组小鼠照后不同时间肿瘤生长速率和平均存活时间.照后第3天用RT-PCR法检测瘤内IFN-γ转录水平,ELISA法检测小鼠血清中IFN-γ含量,并于照后第15天检测小鼠部分免疫学指标.结果:照后第9～15天,4次(质粒 5Gy)组小鼠肿瘤生长速率明显低于质粒 20 Gy组,且平均生存时间明显延长;照后第3天质粒 20Gy组瘤内IFN-γ转录水平明显高于质粒组,照后第1,3天血清中IFN-γ含量明显高于质粒组和对照组,照后第15天脾脏NK细胞毒活性、IL-2和IFN-分泌活性均明显高于20 Gy照射组.结论:多次小剂量基因-放射治疗的抑瘤效应优于单次大剂量基因-放射治疗.基因-放射治疗组可能通过诱导瘤内IFN-γ表达增强,使血液中IFN-γ浓度升高,从而提高荷瘤机体免疫功能和抗肿瘤能力.