山西省HIV-1主要流行株外膜蛋白env基因gp120区变异特性的研究

目的 研究山西省艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)主要流行株env基因gp120区变异特性及其分子流行病学的意义.方法 应用套式聚合酶链反应(Nested-PCR)对山西省56份HIV-1毒株的gp120区进行扩增,使用ABI测序仪测序,应用BLAST、GCG和MEGA等序列分析软件,对gp120区序列进行分析.结果 山西省HIV-1主要流行株在系统进化树上与国际参考株B.CN.RLA2_U71182汇聚在一起.山西省56份HIV-1毒株gp120区的共享序列与同源性较高的国际参考株B.CN.RL42_U71182相比,N-糖基化位点增加了5个,并在V1-V5、C2、C3、C5区段存在独特的特征性氨基酸位点.V3顶端四肽存在着9种类型:GPGQ(39.29%)、GPGR(19.64%)、GPGK(17.86%)、GQGR(10.71%)、GLGR(5.36%),GQGQ、GPGA、RLRR与RPRK分别为1.79%.结论 在山西省HIV感染者中,HIV-1主要流行株仍为B'亚型,其HIV感染者中流行毒株的基因变化较大,gp120基因N-糖基化位点的增加和特征性氨基酸的存在,以及多种V3顶端四肽的存在,表明在较长的流行时间里已经有形成自己独特的序列特征模式的倾向.     

采用流式细胞仪检测艾滋病病毒1型膜蛋白小鼠免疫后IFN-γ的表达

目的通过流式细胞技术检测艾滋病病毒1型(HIV-1)Gp120膜蛋白免疫小鼠后的IFN-γ的表达。方法 构建表达HIV-1gp120基因的复制型重组痘苗病毒。与DNA疫苗联合免疫小鼠,用流式细胞仪检测小鼠脾淋巴细胞中IFN-γ的表达。结果 获得表达中国HIV-1流行株gp120基因的重组痘苗病毒rVVgp120、rVVM304,能正确表达Gp120蛋白。与DNA疫苗p120-VRC、pM304-VRC联合免疫小鼠后,用流式细胞仪检测到小鼠脾淋巴细胞能特异性的表达IFN-γ。结论 用流式细胞检测技术成功检测到免疫小鼠的脾淋巴细胞特异性的表达IFN-γ,用此方法可方便快捷地检测小鼠的细胞免疫效果。     

基于HIV-1 pNL4-3构建含CRF07_BC V3的嵌合分子克隆

目的在感染性克隆pNL4-3骨架上构建含CRF07_BC V3的嵌合分子克隆。方法通过融合PCR将CRF07_BC pXJDC13的V3环与pNL4-3的env骨架进行融合并克隆至pNL4-3上。经过鉴定后将阳性V3嵌合克隆pNL4-3/XJDC13V3转染到293T细胞进行病毒包装并检测病毒的感染性。V3嵌合病毒的细胞嗜性分别用Ghost细胞系和MT-2细胞进行测定。结果利用融合PCR克隆方法在pNL4-3骨架上成功构建了含CRF07_BC pXJDC13 V3的嵌合分子克隆pNL4-3/XJDC13V3。该嵌合病毒利用的辅助受体为CCR5,不能利用CXCR4,也不能在MT-2细胞上诱发合胞体。结论在pNL4-3骨架上成功构建了含CRF07_BC pXJDC13 V3嵌合分子克隆pNL4-3/XJDC13V3。该嵌合分子克隆为进一步研究CRF07_BC嗜性转变中V3关键位点提供了有利工具。     

MSM HIV感染者外周血中ADCC反应水平与HIV-1感染早期病毒载量的关系

目的在艾滋病病毒（HIV）感染早期,观察HIV-1特异性抗体依赖的细胞毒性作用（ADCC）与病程进展的关系。方法利用HIV-1特异性多肽刺激和多色流式技术,对前期采集的、感染时间在1年以内的男男性行为人群（MSM）标本进行ADCC检测。结果共采集HIV-1感染者标本58份,CD4＋T淋病细胞计数与外周血病毒载量呈明显负相关（r=-0.281 6,P=0.032 3）。ADCC检测结果显示,病毒载量与HIV-1Pol特异性CD2＋IFN-γ＋细胞占CD3-细胞的比例呈显著的正相关（r=0.260 7,P=0.046 2）;而病毒载量与HIV-1Gp120特异性CD2＋CD107a＋细胞占CD3-[A1]细胞的比例呈显著负相关（r=-0.342 9,P=0.009 0）。结论在HIV-1感染早期,感染者体内即可产生针对Pol和Env蛋白的ADCC反应,其中针对Gp120蛋白的ADCC反应具有控制病程进展的作用。     

第十一届国际艾滋病大会药物与疫苗研究进展及其评价

第十一届国际艾滋病大会药物与疫苗研究进展及其评价邵一鸣中国预防医学科学院病毒学研究所（北京１０００５２）第１１届国际艾滋病大会于今年７月在加拿大温哥华召开。在来自１９９４年横滨第１０届会议上的一片返回基础研究的呼声中，病毒学界在过去的两年里的确取得了...     

HIV中和抗体的免疫机制、诱导和检测

HIV中和抗体的研究在各方面都取得令人鼓舞的进展，为中和抗体机制疫苗的研究注入新的活力。本文综述了中和抗体的作用机制，讨论了疫苗构建时如何广泛而有效地诱导中和抗体，并介绍了中和抗体检测技术方面的进展。     

四川省现场静脉吸毒人群队列招募和保持方法初步报道

由于艾滋病病毒(HIV)高危人群是社会弱势群体,在社会生活中他们的隐蔽性和流动性很大,针对这些群体开展的队列招募和随访会遇到比一般人群更多的困难,而失访者在社会人口学和行为学指标上可能与保持在队列中的研究对     

中国南方四省区流行的HIV-1 CRF01_AE病毒株基因特征研究

Objective To analyze the genetic characteristics of HIV-1 CRF01_AE strains prevailing in. the four provinces of southern China. Methods Plasma samples were collected from the newly diagnosed HIV-1 individuals reported in 2006 in Guangdong, Guangxi, Jiangxi and Hunan province. The gag and env gene fragments were amplified from RNA template extracted from plasma using RT and nested PCR methods. CRF01_AE sequences were analyzed by phylogcnetie methods and characterized by calculating the genetic distance and Entropy analysis. Results Two main epidemic clusters were found to exist in the CRF01 AE strains from 210 HIV-1 CRF01 AE infected individuals collected in the 4 provinces, southern China. It was found that no international reference strain was closely correlated with cluster Ⅰ , which including 123 samples. The strains in cluster Ⅱ, consisting 57 cases of samples, were closely related with the strains identified in Vietnam. Genetic distance analysis of gag and env genes showed that the diversity of cluster Ⅰ was obviously less than that of cluster Ⅱ. Data on nucleotide polymorphism showed that nucleotides compositions of 42 sites in gag and 40 sites in env wer esignificantly different between the two clusters. When compared with cluster Ⅱ , the polymorphism decreased at 61 nucleotide sites but increased at 21 sites in cluster Ⅰ. Conclusion This was the first report describing that two main epidemic clusters were existed in CRF01_AE strains prevailing in the 4 provinces, Southern China. The vires in cluster Ⅰ was the dominant strain in this region, with shorter period of circulation and higher proportion seen in the HIV-infected population, which might belong to CRF01_AE strain with certain features facilitating the spread of the virus. The virus in cluster Ⅱ was highly homology with the CRF01_AE strains from Vietnam, and seemed to have had several events of epidemics in populations in border regions of China and Vietnam.     

我国艾滋病疫苗研制的进展

正自1983年首次发现艾滋病病毒(HIV),全球科学界投入大量资源研究艾滋病疫苗,至今未有重大突破,艾滋病疫苗已成为最难攻克的人用疫苗之一。我国的艾滋病疫苗研究采用了创新的技术路线,在激烈竞争的国际研究中独树一帜。尽管研究的历程较常规路线疫苗长,但其生命力也更强,正在当前艾滋病疫苗临床试验中发挥着不可替代的作用。1疫苗设计策略疫苗研究的第一步就是选择合适的疫苗毒株。