哺乳动物细胞siRNA表达载体的构建及鉴定

目的：构建哺乳动物细胞siRNA表达载体。方法：用PCR的方法扩增人源性的U6启动子的序列，并将其克隆入pUC18载体中，进一步将针对绿色荧光蛋白的编码siRNA的DNA克隆入U6启动子的下游，通过限制性酶切和测序对该重组表达载体进行鉴定。结果：限制性酶切和测序结果表明成功构建了哺乳动物细胞siRNA表达载体pUC18U6。结论：哺乳动物细胞siRNA表达载体pUC18U6的构建为进一步利用siRNA研究基因的功能及治疗疾病奠定了基础。     

基于CRISPR/Cas9技术构建严重联合免疫缺陷小鼠

目的 应用CRISPR/Cas9技术靶向敲除编码小鼠T、B细胞的Rag2基因及编码NK细胞的IL2rg基因,构建T、B细胞及NK细胞联合免疫缺陷小鼠。方法 根据Genbank报道的Rag2及IL2rg基因序列,分别针对其外显子设计25 bp左右的sgRNA并进行合成, sgRNA退火后克隆入pX330载体。Rag2-sgRNA、IL2rg-sgRNA及Cas9重组质粒体外转录为mRNA后显微注射入BALB/c小鼠受精卵细胞,受精卵细胞移植到受体动物获得子代小鼠,首建鼠（F0）与野生型小鼠交配获得F1代小鼠,突变的F1代小鼠互交后筛选F2代纯合子小鼠。通过基因测序、流式细胞技术及接种人源性肿瘤细胞系方法检测子代小鼠基因型和表型。结果 成功构建了Rag2-sgRNA、IL2rg-sgRNA重组质粒并对其进行了体外转录,mRNA显微注射并移植后获得57只F0小鼠。连续交配后,获得F2代纯合子小鼠。序列分析表明子代小鼠中IL2rg有两个基因型,分别是10 bp和11 bp的缺失突变;而Rag2只有一个基因型,为8 bp的缺失突变。与野生型BALB/c小鼠相比,小鼠外周血中CD3、B220及NKp46阳性细胞数量明显降低。接种人乳腺癌细胞系SKBR-2HL后,肿瘤生长良好,且随着时间延长肿瘤组织逐渐增大。结论 利用CRISPR/Cas9技术可有效实现BABL/c小鼠体内Rag2、IL2rg基因突变,并导致小鼠T、B及NK细胞功能异常。     

七甲川菁近红外荧光染料对胃癌原位移植模型的靶向识别

目的 研究七甲川菁近红外荧光（NIRF）染料在胃癌原位移植模型活体成像中的应用效果。方法 将标记荧光酶素的人胃癌细胞系HepG2原位移植裸鼠建立肿瘤模型,同时诱发制备胃溃疡模型;对上述模型分别采用生物发光成像和NIRF成像,观察胃癌组织对近红外荧光染料的吸收;探索缺氧和阴离子转运肽（OATP）对胃癌组织吸收NIRF染料的影响,明确NIRF染料靶向识别肿瘤细胞的特异性。结果 NIRF信号与生物发光信号在胃癌原位移植模型活体成像中具有较好的相关性。胃癌组织部位可获得较强的NIRF荧光信号,而胃溃疡部位未检测到荧光信号。缺氧能够增强胃癌细胞对NIRF染料的吸收,而阴离子转运肽特异性抑制剂磺溴酞钠（BSP）能够显著降低肿瘤细胞对NIRF染料的吸收。结论 七甲川菁近红外荧光染料能够靶向识别胃癌原位移植模型。     

宽甸县卫氏肺吸虫宿主感染情况调查

目的了解宽甸县卫氏肺吸虫中间宿主蝲蛄和保虫宿主犬的感染现状,为当地肺吸虫病防治工作提供依据。方法采集蝲蛄,镜检卫氏肺吸虫囊蚴;收集流行区犬粪,镜检卫氏肺吸虫卵。结果在宽甸县硼海镇和牛毛坞镇采集的中间宿主蝲蛄体内均未检获卫氏肺吸虫囊蚴;当地村庄重要保虫宿主犬粪中也未检出卫氏肺吸虫卵。结论调查发现宽甸县卫氏肺吸虫病防治已基本达到传播阻断标准。     

甘草酸磷脂复合物自乳化制剂处方筛选

目的 对甘草酸磷脂复合物自乳化制剂(self-emulsifying drug delivery system,SEDDS)进行处方筛选及制备。方法 用溶解性实验,处方配伍实验和伪三元相图等方法进行甘草酸磷脂复合物SEDDS制备研究,优选乳化剂,油相和助乳化剂;确定处方组分比例,考察处方自乳化效率。结果 最佳甘草酸磷脂复合物SEDDS处方为Labrafil 1944 cs∶Cremophor EL35∶Transcutol HP =45∶40∶15,处方载药量为27.3%;该处方能形成具有乳光透明乳液,粒度分布均匀。结论 该方法可成功制备甘草酸磷脂复合物自乳化制剂。     

微创脂肪抽吸围手术期护理

微创脂肪抽吸是作为传统的依靠机械负压吸脂以达到重塑体形的吸脂方法,由于操作简单、安全性高、疗效确切等优点,已在国内外广泛使用[1].我们通过对223例脂肪抽吸受术者护理,取得较为满意的结果.     

膳食营养行为护理联合推拿手法对小儿厌食症的应用价值

〔摘 要〕 目的：探究膳食营养行为护理联合推拿手法对小儿厌食症的应用效果及其价值。方法：在河南省中医 院 2018 年 1 月至 2021 年 1 月期间收治的小儿厌食症中抽取 80 例,通过电脑分组法随机将所有患儿分为对照组和观 察组,各 40 例。对照组给予常规膳食营养行为护理,观察组在此基础上增加推拿手法,比较两组患儿的相关检查指 标变化、整体恢复情况、配合进食的依从评分、免疫功能指标和预后生活质量评分。结果：治疗后观察组患儿的血 红蛋白、血锌、尿 D– 木糖排泄率均高于对照组,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。观察组患儿的治疗总有效率为 92.5 %,高于对照组的 75.0 %,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。治疗后观察组患儿的依从评分高于对照组,差 异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。治疗后观察组患儿的 CD3+、CD4+、CD4+ /CD8+ 均高于对照组,差异具有统计学意 义（P ＜ 0.05）。治疗后观察组患儿的生活质量评价量表（SF–36）生活质量评分高于对照组,差异具有统计学意义 （P ＜ 0.05）。结论：膳食营养行为护理联合推拿手法应用于小儿厌食症,能够明显改善患儿的厌食症状,优化相关 临床指标,促进患儿的健康成长。     

高效液相色谱法测定鸡骨草胶囊中相思子碱的含量

目的 建立鸡骨草胶囊中相思子碱的含量测定方法.方法 采用反相高效液相色谱法测定鸡骨草胶囊中相思子碱的含量.色谱柱为Phenomenex-ODS(250 mm×4.0 mm,5 μm)柱;流动相为甲醇-0.5%(体积分数)冰乙酸溶液,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为270 nm;温度为室温.结果 相思子碱...     

紫金牛属植物研究近况

对国内外近５年来紫金牛属植物的化学、主要药理和临床应用的研究进展作一综述，以利于进一步开发应用。     

应用计算机技术实现人体寄生虫学教学最优化

计算机多媒体技术和网络教学是当今计算机应用于教学的两大热点。我们充分利用这二者各自的优势 ,取长补短 ,优化教学资源和教学过程 ,取得了较好的教学效果