雷米普利诱导大鼠延迟相心脏保护作用及蛋白质组学研究

目的 :研究雷米普利延迟相药理性预适应心脏保护作用 ,及其对心肌组织蛋白表达的影响。方法 :雄性Wistar大鼠分为2组 ,分别用生理盐水 (NS组 )和雷米普利 (1mg/kg) (RAM组 )灌胃 ,24h后冠脉左前降支行30min缺血/2h再灌注。观察缺血/再灌注期间心率、血压、心电图ST -段变化 ,记录室性心律失常的发生情况。测定麻醉后及再灌注2h血浆肌酸激酶水平。再灌注2h行心肌HE染色和TTC染色 ,定性和定量测定心肌梗死情况。每组各2只大鼠于预处理后24h取心室肌组织进行蛋白质组学研究。结果 :与NS组比较 ,RAM组缺血期ST -段抬高幅度明显降低 (P<0.01) ,室早、室速出现时间推迟 (P<0.001) ,持续时间缩短 (P<0.001) ,室颤发生率降低 (P<0.001) ,再灌注2h血浆肌酸激酶升高的程度降低 (P<0.05) ,心肌梗死范围缩小 (P<0.001)。双向电泳及凝胶染色后 ,对表达有显著性变化的12个蛋白点进行质谱分析 ,初步鉴定RAM组一种未命名蛋白表达增加。结论 :雷米普利在大鼠整体模型诱导延迟相心脏保护作用 ,此作用可能与一种未命名蛋白的表达增加有关     

房颤合并肝硬化患者的口服抗凝药物选择及抗栓策略研究

目的 探讨房颤合并肝硬化患者临床治疗中口服抗凝药物的选择及安全性。方法 在1例房颤合并乙型肝炎肝硬化患者房间隔修补术后抗栓方案的制定中,通过查阅指南和文献,总结、分析房颤合并肝硬化患者口服抗凝药物的疗效及安全性评价现状。结果 通过综合评估患者情况,停用华法林,予达比加群酯110 mg,bid,联合氯吡格雷75 mg,qd抗栓6个月,之后达比加群酯110 mg,bid长期抗凝治疗。结论 房颤合并肝硬化患者抗栓治疗,应充分评估血栓及出血风险,制定个体化的抗栓策略。房颤合并Child-Pugh A级肝硬化,新型口服抗凝药均可使用;合并Child-Pugh C级肝硬化,口服抗凝剂均不建议使用;合并Child-Pugh B级肝硬化,出血风险高的患者长期抗凝治疗中可选用小剂量达比加群酯。     

牛磺酸增强渐增再灌注心肌保护作用的实验研究

目的研究牛磺酸对渐增再灌注处理的离体大鼠缺血/再灌注损伤心肌的保护作用。方法采用Langendorff离体心脏灌流法制备离体大鼠心肌缺血/再灌注模型。SD大鼠随机分为7组:正常对照组(Nor)、缺血/再灌注组(I/R)、渐增再灌注组(GR)、牛磺酸低浓度组(T20)、牛磺酸高浓度组(T40)、渐增再灌注联合牛磺酸低浓度组(GT20)、渐增再灌注联合牛磺酸高浓度组(GT40)。记录平衡末及再灌注90min心功能,TTC染色法测定心肌梗死面积,检测冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)活性及心肌组织中Caspase-3活性,TUNEL法检测心肌细胞凋亡。结果与缺血/再灌注组比较,GR、牛磺酸能够改善心功能,减少心肌梗死面积,减少LDH漏出,降低心肌Caspase-3活性并减少心肌细胞凋亡;相比单纯应用GR及牛磺酸,渐增再灌注联合牛磺酸的保护作用更强,且GT40组保护作用最强。结论 GR和牛磺酸均能减轻大鼠离体缺血/再灌注心肌的损伤,牛磺酸,特别是高浓度牛磺酸能够增强渐增再灌注对心肌的保护作用,抗凋亡可能是二者发挥心肌保护作用的机制之一。     

一氧化氮介导白细胞介素1β对人类卵泡颗粒层—黄体细胞雌激素合成的抑制作用

为研究白细胞介素1β(IL-1β)对取自接受体外受精妇女的人类卵泡颗粒层-黄体细胞中一氧化氮(NO)生成和类固醇生成的作用,借助生殖技术从接受标准化卵巢刺激方案卵母细胞回输的妇女收集卵泡细胞。无红细胞污染的卵泡抽吸物离心后,将沉淀冷冻保存,用于RNA提取。用Ficallpaque收集卵泡颗粒层-黄体细胞,置于DEME培养基中孵育。每孔1×10~6个细胞在含10％胎牛血清(FCS)的DMEM培养基中于37℃ 5％CO_2～95％空气大气压下孵育过夜后,卵泡颗粒层细胞分别在含有6种不同浓度(0,0.05,0.5,5,50,100ng/ml)IL-1β、5ng/ml IL-1β与1mM NO合酶(NOS)抑制剂N~G-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)、5ng/ml IL-1β与     

黄芪苷Ⅳ通过PI3K/Akt信号通路抗H_2O_2诱导的H9c2细胞氧化损伤

目的研究黄芪苷Ⅳ对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用及其作用机制。方法建立H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤模型,MTT法检测细胞存活率,DNA抽提及琼脂糖凝胶电泳、Hoechst 33258染色、caspase-3活性检测细胞凋亡,Western blotting检测t-Akt和p-Akt蛋白的表达。结果与H2O2组比较,10、20mg/L的黄芪苷Ⅳ均显著提高细胞存活率,降低caspase-3活性,减轻细胞凋亡;且均显著上调p-Akt蛋白的表达;PI3K/Akt抑制剂LY294002部分阻断10、20 mg/L黄芪苷Ⅳ的保护作用。结论黄芪苷Ⅳ部分通过PI3K/Akt通路发挥对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用。     

五行音乐疗法克服手术患者术前焦虑的效果分析

目的 探讨五行音乐疗法对手术患者术前焦虑的影响.方法 选取我院2014年1月至2015年1月手术的100例患者,随机分为治疗组和对照组各50例,对照组给予对照术前护理,治疗组在对照护理的基础上应用五行音乐疗法护理,比较两组患者术前1d、术前30 min汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、焦虑自评量表(SAS)测评结果及促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇水平的变化情况.结果 治疗组术前30 min ACTH、皮质醇水平均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗组术前30 min HAMA、SAS评分均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 五行音乐疗法的应用可改善患者术前焦感情绪,减轻术前应激反应.     

miR-139-5p低表达重组慢病毒的构建及其在H9c2细胞的表达验证

目的构建miR-139-5p低表达慢病毒载体,检测其在H9c2细胞的表达效果。方法根据大鼠miR-139-5p序列,设计合成其靶点序列,并合成寡核苷酸双链,克隆入慢病毒载体p GC-LV,与p Helper 1.0和p Helper 2.0共转染293T细胞,包装病毒。收取病毒上清液,纯化后感染H9c2细胞。荧光倒置显微镜下观察感染效率,实时定量PCR检测慢病毒感染后H9c2细胞中miR-139-5p的相对表达量。结果成功构建miR-139-5p低表达慢病毒载体,病毒感染H9c2细胞的效率超过95%,miR-139-5p表达明显减少。结论成功构建了miR-139-5p低表达慢病毒载体,包装的病毒可在H9c2细胞中实现抑制miR-139-5p表达的效果。     

大鼠寡霉素敏感相关蛋白原核表达载体的构建

目的:克隆大鼠寡霉素敏感相关蛋白(OSCP)基因全长cDNA,构建原核表达载体pQE30-Xa-OSCP。方法:利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从大鼠脑组织中扩增出目的基因,先以A-T连接方式克隆到pTA2载体中,再将其克隆到原核表达载体pQE30-Xa中,并进行酶切、测序鉴定。结果:RT-PCR扩增出约700bp特异性片段,重组原核表达载体经酶切鉴定结果同预期相符,经测序鉴定序列同源性与GeneBank报道一致。结论:成功构建了重组原核表达载体pQE30-Xa-OSCP。     

影响超声乳化白内障预期效果的常见原因及护理

超声乳化白内障吸除术、人工晶体植入术具有痛苦少、时间短、创伤小等优势，深受广大医患欢迎，但由于白内障患者的特殊性，如年龄大、多病种等，术前疾病及术后的并发症较多，使现代的超声乳化技术的预期效果受到影响。本文仅对特殊群体患者出现的症状及护理进行讨论。     

黄芪苷Ⅳ通过 PI3K/Akt 信号通路抗 H2O2 诱导的H9c2 细胞氧化损伤

目的 研究黄芪苷Ⅳ对H2O2诱导的 H9c2 细胞氧化损伤的保护作用及其作用机制。 方法 建立H2O2诱导的 H9c2 细胞氧化损伤模型，MTT 法检测细胞存活率，DNA 抽提及琼脂糖凝胶电泳、Hoechst 33258 染色、caspase-3 活性检测细胞凋亡，Western blotting 检测 t-Akt 和 p-Akt 蛋白的表达。 结果 与H2O2组比较，10、20 mg/L 的黄芪苷Ⅳ均显著提高细胞存活率，降低 caspase-3 活性，减轻细胞凋亡；且均显著上调 p-Akt 蛋白的表达；PI3K/A kt 抑制剂 LY294002 部分阻断 10、20 mg/L 黄芪苷Ⅳ的保护作用。 结论黄芪苷Ⅳ部分通过 PI3K/Akt 通路发挥对H2O2诱导的 H9c2 细胞氧化损伤的保护作用。