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目的对表皮葡萄球菌VraSR进行生物信息学分析并原核表达VraR蛋白,为表皮葡萄球菌VraSR系统功能研究奠定基础。方法 PCR扩增表皮葡萄球菌SE1457菌株vraR基因,PCR片段经酶切后连入载体pET28a,构建重组表达质粒pET28a-vraR,并转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达。重组蛋白His;-VraR经Western blot鉴定后采用Ni-NTA柱纯化。采用DNAMAN、SMART、Megalign等软件对VraSR系统进行生物信息学分析。结果成功构建重组表达质粒pET28a-vraR,在22℃、0.5 mmol/L IPTG诱导12 h高效表达重组蛋白His;-VraR。分析重组His;-VraR序列,与金黄色葡萄球菌VraS/VraR核苷酸同源性皆为82%,氨基酸同源性分别为92%/94%,氨基酸组成差异主要存在VraS的胞外区和VraR的CheY结构域。结论成功表达并纯化表皮葡萄球菌VraR蛋白,生物信息学分析表皮葡萄球菌VraSR的功能,可能不同于金黄色葡萄球菌。 相似文献
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BIO-RAD质控物的基质效应浅析 总被引:1,自引:0,他引:1
自 1 974年基质效应首次报道以来[1 ] ,基质效应对测定的干扰越来越受到重视。实验室在分析时不用考虑新鲜标本的基质效应 ,而以其他不同于新鲜标本的物质 (如质控物 )作为样本测定时 ,由于其具有不同的物理、化学特性 ,就会使测定结果产生偏差 [2 ]。本实验室存在几种生化检测系统 ,使用的方法不一样 ,经常需用质控品比较不同仪器和不同方法间结果的一致性 ,由于基质效应的存在 ,质控物在两种检测系统结果一致并不说明各仪器、方法间没有误差 ;而测定结果不一致 ,是仪器、方法本身的误差造成的 ,还是由于质控物的基质效应引起的 ,也很难判… 相似文献
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目的:研究晨尿和随意尿标本蛋白与肌酐比值(Pr/Cr)在显著性蛋白尿预测中的作用.方法:选取本院门诊及住院患者82例,分析其晨尿、随意尿标本pr/Cr与24 h尿蛋白定量(Pr24h)的相关性,作出晨尿、随意尿、24 h尿标本Pr/Cr的误差条形图和晨尿、随意尿标本Pr/Cr对显著性蛋白尿(Pr24h>0.3 g)诊断的受试者工作特征曲线(ROC曲线),并确定诊断界值,计算敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比.结果:晨尿、随意尿标本Pr/Cr与Pr24h)高度相关;晨尿、随意尿Pr/Cr与其相应蛋白浓度相比,离散程度明显缩小;晨尿、随意尿标本Pr/Cr对显著性蛋白尿诊断的ROC曲线下面积分别为:0.903、0.892,诊断界值分别为:34.3 g/mol、34.9 g/mol,以此界值计算敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比分别为:0.864、0.864,0.826、0.783,4.97、3.98,0.165、0.174.结论:晨尿、随意尿标体Pr/Cr是诊断显著性蛋白尿的良好指标,尤其是作为排除非显著性蛋白尿的初筛试验价值更大. 相似文献
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目的研究骨化三醇(calcitriol)对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化作用的影响。方法实验分为4组:对照组、calcitriol组、BMP9组、calcitriol联合BMP9组。通过PNPP法检测各组碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性;通过RT-PCR和Western blotting方法检测成骨分化标记物骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达变化,同时检测AKT和β-catenin磷酸化水平以及和ALP活性水平;茜素红染色检测矿化结节形成。此外,用原子力显微镜测试MSCs成骨分化过程中细胞形态及细胞弹性模量改变。结果 calcitriol单独作用对MSCs成骨分化过程无明显作用,但是calcitriol可以增强BMP9诱导MSCs的ALP、OCN、OPN表达和矿化结节形成。同时,calcitriol和BMP9作用均不影响细胞弹性模量数值。BMP9和calcitriol联合作用可以增强AKT和β-catenin磷酸化水平,而PI3K抑制剂应用以后可以抑制这种磷酸化变化,并抑制联合作用后的ALP活性。calcitriol作用以后不影响BMP9诱导的BMP/Smad信号通路。结论 calcitriol通过激活PI3K/AKT信号通路从而协同BMP9促进MSCs成骨分化。研究不同调控因子对MSCs成骨分化的作用及机制对于骨质疏松等疾病的治疗和骨组织工程的发展有一定意义。 相似文献
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〔摘 要〕 目的:探究电离辐射对宫颈癌患者肠道菌群的影响特点及菌群变化与放射性肠炎发生的相关性。方法:选取
福建医科大学附属泉州第一医院 2019 年 1 月至 2020 年 1 月收治的 30 例宫颈癌患者,在其调强放射治疗的不同时间点收
集其粪便样本,分析肠道微生态的生物标志物,用 MoBio PowerSoil 试剂盒提取肠道菌群 DNA,用 MiniSeq 对肠道菌群
16S rRNA 的 V4 区进行测序及生物信息学分析。差异度采用 Wilcoxon 秩和检验等分析。结果:宫颈癌患者放射治疗后肠
道微生物群的 α 多样性比放疗前高,同时放疗前后微生物群落组成(即 β 多样性)存在一定差异,但差异均无统计学意义
(P > 0.05);但是在宫颈癌患者放疗后微生物组成中普雷沃氏菌和链球菌较放疗前有显著变化(P < 0.05)。结论:宫颈
癌患者放疗前后微生物成分存在差异,但有待大规模的前瞻性队列研究证实。 相似文献
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心肌酶谱水平变化结合心电图对新生儿窒息临床诊断的意义 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 探讨新生儿窒息心肌酶谱水平变化及心电图对临床诊断的意义.方法 窒息新生儿74例,其中轻度窒息29例,重度窒息45例,健康新生儿20例作为对照组,分别测定血清心肌酶活性及心电图检查,并进行对比分析.结果 结果窒息组血清心肌酶谱明显高于对照组,两者比较有差异有统计学意义(P<0.05);重度窒息组明显高于轻度窒息组(... 相似文献
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目的了解医院住院患者医院感染现状,为改进医院感染监控措施提供依据。方法采用横断面调查方法,对某医院2010年10月14日所有住院者进患者进行了24 h医院感染现患率调查与分析。结果该医院调查当日共有住院患者818例,发生医院感染25例、29例次,医院感染率为3.06%、例次感染率为3.55%。医院感染主要部位为皮肤软组织,例次感染率构成比为34.5%,呼吸道例次感染率构成比为37.9%;医院感染高发科室为外科重症监护室。住院患者抗菌药物使用率为45.72%,以外科住院患者使用率最高,为53.80%。结论现患率调查结果比较接近实际,该医院住院患者医院感染率较低,皮肤软组织感染率较高,其原因值得探讨。 相似文献
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目的加强社会化洗涤污染织物收集转运过程的医院感染质量管理,预防污染织物引起的院内感染。方法深入了解医院病房污染织物收集暂存、病区工作人员与社会化洗涤公司人员交接过程中存在的感染控制问题,对污染织物收集、转运人员进行医院感染知识培训,对污染织物分类、收集、转运过程,医院感染危害点进行控制,加强感染科、护理部、总务科协同监督及考核。结果对污染织物实施规范管理,可减少因污染织物收集转运不当造成二次污染。结论加强医院社会化洗涤污染织物收集转运过程的监管,对有效控制医院感染的发生有着重要意义。 相似文献