应用γ钉治疗转子间骨折的并发症

目的 探讨应用γ钉治疗转子间骨折并发症的原因。方法 2000年1月～2004年12月,我院应用γ钉治疗转子间骨折76例,随访1年以上,13例出现并发症,发生率为17.1%（13/76）。参照Evans分型,Ⅲ型6例,Ⅳ型7例。结果 骨折延迟愈合1例,肺部感染2例,泌尿道感染1例,深静脉血栓1例,褥疮1例,拉力螺钉穿透股骨头2例,继发性股骨骨折1例,髋内翻3例,远端螺钉放置失败1例;无主钉或锁钉断裂等并发症发生。经相应处理,均获得骨性愈合。结论 应用γ钉治疗转子间骨折,并发症的出现是由多方面原因所致,但只要早发现、及时正确地处理,一般能获得良好的预后。     

胰岛素对大鼠急性脊髓损伤后细胞凋亡及诱导型一氧化氮合酶、环氧化酶-2表达的影响

目的:研究胰岛素对大鼠急性脊髓损伤(SCI)后细胞凋亡及相关炎症因子诱导型一氧化氮合酶(in-duciblenitricoxidesynthase,iNOS)、环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达的影响。方法:60只SD大鼠随机分为损伤对照组和胰岛素治疗组,每组30只,采用改良Allen's法建立SCI模型。SCI后30min内治疗组经腹腔注射普通速效胰岛素1IU/kg·d+50%葡萄糖1g/kg·d,分3次给药,每8h1次,连续给药7d;对照组给予等量生理盐水。伤后8h、1d、3d、7d、14d每组各处死6只动物取材,采用原位末端标记(TUNEL)和免疫组织化学染色方法观察脊髓细胞凋亡及iNOS、COX-2表达的变化。结果:SCI后各时间点胰岛素治疗组TUNEL阳性细胞数明显少于损伤对照组,差异有显著性(P<0.05或P<0.01);胰岛素治疗组iNOS、COX-2的表达率均明显低于对照组,差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:胰岛素对大鼠急性脊髓损伤有保护作用,抑制炎症因子iNOS、COX-2的表达可能是其作用机制之一。     

转化生长因子-β1基因转染鼠成骨细胞的研究

目的　研究转化生长因子 - β1 (TGF- β1 )基因转染鼠成骨细胞对其生物学特性的影响。方法　将TGF- β1 基因导入成骨细胞 ,通过原位杂交检测和成骨细胞培养上清液 TGF- β1 活性测定 (水貂肺上皮细胞生长抑制试验 ) ,了解转染细胞 TGF- β1 的表达。检测基因转染及转染细胞上清对成骨细胞增殖和碱性磷酸酶 (AL P)活性的影响 ,观察 TGF- β1 基因转染成骨细胞生物学活性的变化。结果　原位杂交检测基因转染成骨细胞可明显表达TGF- β1 。上清液 TGF- β1 活性检测结果显示 1∶ 1、1∶ 2、1∶ 4复合培养基对 Mv1抑制率分别为 16 .3%、2 2 .7%和2 8.2 % ,上清中 TGF- β1 含量越高 ,活化后对 Mv1抑制作用越明显。 TGF- β1 基因转染对成骨细胞生物学活性无明显影响 ,而转染细胞上清活化后可促进成骨细胞增殖 ,抑制 AL P活性。结论　 TGF- β1 基因转染鼠成骨细胞可显著促进 TGF- β1 表达 ,转染细胞生物学特性保持稳定 ,为骨缺损基因治疗的体内研究奠定了基础     

膝关节弥漫性色素沉着绒毛结节性滑膜炎的联合治疗

目的 探讨联合疗法治疗膝关节弥漫性色素沉着绒毛结节性滑膜炎的临床效果.方法 对18例影像学及病理确诊的患者,采用关节镜切除关节内病变,有限切开辅助性开放性手术切除关节外病变,术后结合放疗.术后随访3-67个月,平均36个月.结果 除1例患者术后23个月复发外,其余患者膝关节活动度为0°～140°,患膝关节未出现复发症状,部分患者复查MRI未发现有复发迹象.术前Lysholm膝关节功能平均评分为（36.2±4）分,术后为（89±3.4）分.结论 关节镜联合有限切开辅助性开放性手术对弥漫型病变的切除较好,结合术后辅助放疗,可取得较好治疗效果.     

TRAIL联合多柔比星作用于骨肉瘤的实验研究

背景与目的：肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TNF related apoptosis inducing ligand，TRAIL）是近年发现的肿瘤坏死因子家族新成员，显著特点是它仅诱导肿瘤细胞凋亡，对正常细胞无毒性作用。TRAIL可作为骨肉瘤靶向治疗的潜在有效药物，但单独使用时已被证明作用有限。而多柔比星可对肿瘤细胞产生广泛的生化效应，为细胞周期非特异性药物，有强烈的细胞毒性作用，可嵌入DNA而抑制核酸的合成导致细胞死亡。本研究旨在探讨TRAIL联合低剂量化疗药物多柔比星对骨肉瘤MG-63细胞的凋亡诱导效应。方法：MTT法测定TRAIL和多柔比星对MG-63细胞单独及联合作用的细胞凋亡率，DNA凝胶电泳及流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：1000ng／ml的TRAIL与4．3μmol／mL多柔比星合用于MG63细胞24h时后，测细胞抑制率为36．65％，明显高于单用TRAIL（1000ng／ml）时的21．67％及单用多柔比星（4．3μmol／ml）时的10.25％（P〈0．01）。细胞超微结构观察及凋亡率测定均显示，合用比单用有更多的骨肉瘤细胞凋亡。TRAIL联合应用多柔比星能显著增强对MG-63的杀伤、抑制增殖及诱导凋亡作用，明显高于单独应用TRAIL组或多柔比星组（P〈0．05），并且这种作用随培养时间延长及药物浓度增加而增强。结论：TRAIL是一种有望应用于临床的新型生物制剂。TRAIL与多柔比星对诱导骨肉瘤细胞凋亡具有协同作用，能高效杀灭骨肉瘤细胞。     

骨形态发生蛋白-7基因转染骨髓基质细胞后的表达

为了观察重组人骨形态发生蛋白-7(rhBMP-7)基因转染骨髓基质细胞（BMSCs）后的表达及表达产物对BM-SCs增殖的影响，用脂质体介导法将rhBMP-7基因转染BMSCs，用逆转录PCR技术和免疫组化SABC法分别检测其瞬时表达和稳定表达；再用^3H-TdR掺入法检测基因表达产物对正常培养的BMSCs增殖的影响。结果表明：转基因细胞能高效表达外源基因，且表达时间长达4周；基因表达产物能明显促进BMSCs的增殖。该结果为基因增强的组织工程技术用于关节软骨缺损的修复提供了理论依据。     

TGF-β1基因修饰的间充质干细胞/仿生基质材料复合移植修复兔关节软骨缺损

目的 :探讨转化生长因子 β1(TGF β1)基因转染间充质干细胞 (MSCs)能否提高关节软骨缺损的修复质量和远期疗效。方法 :把组织工程学与分子生物学有机结合 ,体外将具有促进MSCs增殖分化、抑制多种炎性介质活性及免疫排斥反应等多重生物学效应的TGF β1基因转入关节软骨组织工程首选种子细胞MSCs,并与涂覆多聚赖氨酸的聚DL乳酸可降解多孔仿生基质材料复合移植 ,修复同种异体兔关节软骨缺损。以单纯空载体转染MSCs为对照 ,通过组织学、电镜及免疫组化等方法检测。结果 :转基因细胞 /仿生基质材料体外复合培养扫描电镜观察证实TGF β1基因修饰的MSCs增殖分化活性明显优于对照组。体内实验组织学及透射电镜结果显示实验组新生组织为透明样软骨 ,关节面平整 ,软骨下骨完全再生 ,与宿主骨软骨结合紧密 ,未见免疫排斥反应 ;对照组则新生软骨质量欠佳 ,与宿主骨整合欠佳 ,有不同程度的免疫排斥反应。免疫组化结果显示转基因细胞可继续表达TGF β1至少 4周以上。结论 :利用分子组织工程学 ,使TGF β1持续高效发挥作用 ,使提高关节软骨缺损、特别是创伤和骨关节炎关节软骨缺损的修复质量和远期疗效成为可能。     

碱性成纤维细胞生长因子基因转染对间充质干细胞生物学行为的调控

为探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因转染对间充质干细胞(MSCs)增殖、定向分化等生物学行为的调控作用，本文将体外具有促进MSCs增殖分化及毛细血管增殖等多重生物学效应的bFGF基因转入骨组织工程首选种子细胞——MSCs，通过免疫组化SABC法检测其瞬时与稳定表达，并检测转基因细胞增殖活力及碱性磷酸酶(ALP)与骨钙素(OC)合成情况。结果表明，bFGF基因能被转入MSCs并得到稳定表达，转基因细胞增殖与OC合成明显增强，ALP活性无明显变化。因此，转基因MSCs可使bFGF持续高效发挥作用，克服了使用外源性bFGF半衰期短，需反复大剂量给药的缺点；bFGF基因转染可促进MSCs增殖并调控其定向分化，使其获得良好的生物学活性；从而为把组织工程学与分子生物学有机结合，用分子组织工程学技术高质量地修复骨缺损奠定了良好的基础     

分子生物学在组织工程学研究中的应用前景

近几年来 ,分子生物学在组织工程学各研究领域中的应用越来越广泛 ,其地位和影响越来越重要。我们对这一进展进行了综述 ,并提出了”分子组织工程学”这一概念。一、组织工程学亟待解决的问题组织缺损或器官功能障碍是人类保健中发生最频繁、危害性最大、花费最高的问题之一。人们通过器官移植、外科重建及诸如肾透析之类的机械装置虽然取得了一些效果 ,但还存在许多问题。12年前 ,随着生命科学与工程学的飞速发展 ,一门崭新的交叉学科———组织工程学 (ｔｉｓｓｕｅｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ)诞生了。它是应用工程学和生命科学的原理和方法…     

转化生长因子β1基因修饰成骨细胞复合仿生基质材料治疗骨缺损

背景：通过分子生物学技术与组织工程技术相结合以修复骨缺损，是骨科当前重要的研究方向之一。转化生长因子β1作为重要的骨形成因子，在骨代谢和骨损伤修复中发挥着极为重要的作用。 目的：观察转化生长因子βl基因修饰的成骨细胞复合仿生基质材料修复鼠胫骨骨缺损的治疗效果。 设计：随机对照实验。 单位：华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科。 材料：实验于2003-03／08在华中科技大学同济医学院附属协和医院完成。选用健康SD大鼠20只，雌雄不限，由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。 方法：将转化生长因子βl基因转染的成骨细胞与涂覆多聚赖氮酸的聚DL乳酸仿生基质材料复合，植入鼠胫骨骨缺损模型，术后摄X射线片和组织学检查观察修复情况。 主要观察指标：术后4，8周X线摄片和组织学检查情况。 结果：20只SD大鼠均进如结果分析，无脱失。①实验组：4周时X线片可见骨痂形成，组织学观察有类骨组织和新骨形成，成骨细胞贴附于基质材料表面。8周时缺损基本修复，新骨密度与自体骨接近。②对照组：4周时X线片未见骨痂形成，组织学观察没有类骨组织形成，基质材料表面成骨细胞贴附较少，材料腔隙中有大量淋巴细胞浸润。8周时植入材料基本吸收，为纤维组织替代。 结论：将分子生物学和组织工程学结合修复骨缺损，获得理想的治疗效果。