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背景:慢病毒载体是一个能够在原代培养的人树突状细胞中进行RNA干扰的有效工具,但目前国内对RNA干扰技术应用于人树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3-结合非整合素分子的研究却少有报道。
目的:拟构建人树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3-结合非整合素基因RNA干扰慢病毒载体,为调控人树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3-结合非整合素表达水平提供有利的工具。
方法:根据人树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3-结合非整合素基因的mRNA序列选择4条靶序列,设计合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经Age Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切后的pGCSIL-GFP载体连接产生DC-SIGN慢病毒载体,采用PCR及测序鉴定,应用Western blot技术外源性筛选干扰效率高的有效靶序列。用慢病毒包装系统pGCSIL-GFP、pHelper 1.0和pHelper 2.0共转染包装293T细胞,包装产生慢病毒,以系列稀释法测定病毒滴度。
结果与结论:PCR扩增和测序结果显示,人树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3-结合非整合素核苷酸链序列插入正确,外源性筛选确定两条干扰效率高的有效靶序列。利用筛选确定的有效靶序列,包装产生慢病毒,其浓缩病毒悬液的滴度为1× 109 TU/mL。证实实验成功构建了DC-SIGN基因慢病毒载体。
关键词:慢病毒载体;RNA干扰;DC-SIGN基因;树突状细胞;结核病 相似文献
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118例颅脑损伤合并高血压病人24h动态血压监测及护理 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]研究颅脑损伤合并高血压病人动态血压变化特点,指导制定相应护理预防对策。[方法]采用德国Mobi-O-Graph型动态血压监测仪对118例颅脑损伤合并高血压病人(A组)在受伤后第1天、第3天、第7天各行24h动态血压监测,并与年龄、性别相匹配的106例原发性高血压病人(B组)进行比较。[结果]A组病人动态血压均值高于B组(P〈0.05)。A组24h血压的昼夜变化已失去"杓型"变化的规律,血压负荷值明显增大,夜间血压升高,无血压低谷时间,血压昼夜节律变化不明显。[结论]颅脑损伤初期血压升高,是一种应激反应,以后血压呈自然下降趋势,要保持血压的稳定,避免加重脑细胞损伤。24h动态血压监测可以了解颅脑损伤合并高血压病人血压变化规律,做出预见性治疗和护理,减少心脑血管不良事件发生。 相似文献
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84.
目的:探讨手术室护理工作的不安全因素,制定相对应的防范措施。方法:分析手术室实际工作中潜在的不安全因素,然后提出护理措施。结果:使手术室护理工作制度化、标准化、规范化,从而减少护理缺陷、差错、事故的发生。结论:手术室的工作与病人的生命息息相关,加强不安全因素的管理是保障手术质量和患者生命安全的前提;加强手术室护理安全管理是手术室护理工作的重点。 相似文献
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白内障超声乳化术以切口小,不缝线,手术时间短及术后视力恢复好且快而广泛被国内眼科界认可.随着我国人民生活水平的提高,糖尿病的患病率高达2.5%<'[1]>,且有逐年增加的趋势.随着超声乳化设备的更新和不断完善,白内障超声乳化技术不断提高,糖尿病已不再是手术禁忌证.我院2005年1月~2008年7月对糖尿病并发白内障76例(88眼)行白内障超声乳化吸除联合人工晶体植入术,疗效满意,现报告如下. 相似文献
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目的:为了解女性海洛因依赖者的人口统计学特征,滥用海洛因状况及在吸毒者中的比例。方法:对539例女性海洛因依赖者进行回顾性调查和统计分析。结果:35岁以下94.8%;无业或个体经营者80.7%;工人、干部、学生12.06%;中学文化94.06%;好奇寻求刺激和不良环境为吸毒主要原因占93.69%;单纯静脉注射占26.53%(94年以前为3.8%);在吸毒者中女性占25.33%(94年为5.4%)。提示:女性吸毒者年龄以青少年为主并向低龄扩散;以无业者、社会闲散人员或个体经营者为主,但已涉及到工人,干部及学生;文化程序偏低;用药方式有烫吸向静脉注射发展的趋势;女性吸毒者的比例呈上升趋势。 相似文献
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近年来结核病复燃呈上升趋势,为进一步搞好部队结核病防治工作,对我院2001-2007年收治的肺结核病例进行了回顾性分析。1资料与方法(1)资料来源:为我院2001年1月-2007年12月收治的177例武警官兵肺结核病例。均经临床X线、痰菌等检查确诊。(2)方法:按1999年全国结核病分型法进行分类、分型统计处理。 相似文献
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2型糖尿病患者骨密度的变化 总被引:1,自引:0,他引:1
本文采用了高精度的双能X线骨密度仪对30例2型糖尿病男性患者和30例年龄、性别和体重指数相匹配的非糖尿病健康者腰椎(L2~4)和股骨近端骨密度进行了检测,发现糖尿病患者腰椎和股骨近端骨密度明显降低(P<0.01~0.05),同时对其骨密度的变化与年龄、糖尿病病程的关系进行了分析。提示老年糖尿病患者骨丢失率增加,且随着病程的延长骨量丢失以腰椎椎体为著。 相似文献
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