NY-ESO-1和热休克蛋白70融合基因的构建和原核表达

目的 构建热休克蛋白(HSP)70和肿瘤睾丸抗原NY-ESO-1融合基因,并在大肠杆菌中诱导表达. 方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从人肝癌细胞株HepG2扩增HSP70基因,测序后插入pGEX-ESO1质粒中,构建NY-ESO-1与HSP70的N端融合基因原核表达质粒pGEX-ESO1-HSP70,IPTG诱导含有该质粒的大肠杆菌BL21(DE3)表达目的蛋白,Western blot 鉴定蛋白的特异性. 结果 扩增得到长度为1 917 bp的人HSP70全长基因,测序结果表明与GenBank公布的序列一致;获得pGEX-ESO1-HSP70融合基因原核表达质粒,经IPTG诱导,在BL21(DE3)中表达分子量约106 kD的融合蛋白(包括GST 26 kD,NY-ESO1 10 kD,HSP70 70 kD),Western blot检测该蛋白可与HSP70特异性结合. 结论 成功构建pGEX-ESO1-HSP70重组表达质粒,并获得高效表达的ESO1-HSP70融合蛋白,为HSP70-多肽疫苗在肿瘤免疫治疗中的作用奠定基础.     

安其格纳芬致迟发性重度过敏反应

患者女,32岁,因右侧腰痛2月余,于2000年8月6日上午来院就诊,尿常规:蛋白(++)、红细胞(+++),随行肾脏CT增强扫描及造影剂安其格纳芬(Angiografin)过敏试验:过敏试验结果阴性,观察20min无不良反应.11:40分,CT扫描同时用高压注射器以2.5ml·sec-1速度注射安其格纳芬100ml,注射完毕,5min后,患者感全身瘙痒,面、颈、体、四肢皮肤出现斑丘疹.立即肌注异丙嗪25mg,静注地塞米松10mg,30min后症状缓解.16:30min患者突然出现胸闷、气短、心慌.查体:P 146次·min-1、R 32次·min-1、BP 90/60mmHg.立即肌注0.1%肾上腺素1ml、异丙嗪50mg、静注地塞米松20mg,吸氧,静脉输入5%葡萄糖注射液500ml+氢化考的松100mg,30min后,症状缓解并趋于平稳,2h后,体征恢复正常.     

购置螺旋CT需要注意的几个问题

通过对购置螺旋CT应需要注意的几个问题进行阐述,为CT机购买用户提供一定的参考。     

208名船员常见航海疾病的调查分析

为了探讨船员在船舶航行期间的疾病发生情况 ,以加强防治工作 ,我们于 1997年 1月～ 2 0 0 0年 12月对广海集团下属的某船务公司 2 0 8名船员发生在航行期的疾病进行了调查分析 ,现将结果报告如下。一、对象与方法1.对象 :2 0 8名在近海与远洋船舶上因患病而离船住院治疗的男性船员 ,年龄 2 0～ 5 9岁 ,平均 (39.4± 8.7)岁 ,航龄6个月～ 39年。职业分工 :甲板部工 117人 (5 6 .2 % ) ,轮机工91人 (43.8% )。2 .方法 :本组 2 0 8例中 185名经国内港口二级以上综合性医院确诊 ,2 3名经国外医院确诊 ,其中 4 9例经手术或病理确诊。二、结果1.…     

腹腔负压引流负压值的研究

在动物实验和临床观察基础上，探讨腹腔负压引流适宜的负压值。结果表明，腹腔负压引流负压值范围可由传统的５．６～１６ｋＰａ提高至５８．８６～７３．１５ｋＰａ。其中，以５８．８６ｋＰａ左右为好。     

胆矾散治疗宫颈糜烂300例

自1995年以来，笔者用胆矾散对我院妇科门诊就诊者中的宫颈糜烂患者进行治疗，均获满意疗效，现总结如下。     

骨骼肌活检组织恒冷切片技巧

骨骼肌活检技术在 186 8年由 Duchenne首创 [1 ] ,现已广泛应用于临床 ,成为诊断神经肌肉疾病的手段之一。为了避免肌肉活检组织经固定、脱水、包埋等引起人为的变化 ,目前多采用速冻与恒冷切片 ,进行各种肌酶染色 ,对肌病的病理诊断和研究都具有十分重要的意义。但可因速冻或冷冻切片不理想 ,产生冰晶或切片皱折、破损等现象而影响观察与诊断。为克服这些现象 ,笔者认为把握好速冻及冷冻切片两个环节的技巧最为关键 ,现介绍如下 :1　材料与方法1.1　材料　活检组织取自患者的肱二头肌、三角肌、股四头肌或腓肠肌 ,大小约 0 .8cm× 0 .5 cm…     

患者与护理人员发生纠纷的原因及处理对策

患者与医护人员之间难免或多或少会产生一些矛盾 ,作为护理人员不但要有丰富的专业知识和过硬的技能 ,以及优质的服务 ,良好的护患沟通 ,才能处理好存在的矛盾与纠纷 ,才能更好的提高医疗护理质量。我科 1999～ 2 0 0 0年患者与医护人员发生纠纷经统计有 8起 ,现将发生的原因及