小RNA干扰骨桥蛋白抑制人U251细胞的体外生长与侵袭

目的:研究慢病毒载体介导的骨桥蛋白(OPN) RNA干扰对人U251神经胶质瘤细胞体外生长和侵袭的影响,并探讨其对神经胶质瘤生长、侵袭的可能机制.方法:应用本实验室已构建并鉴定的OPN特异性短发卡RNA慢病毒表达载体(LV-OPN shRNA)感染U251神经胶质瘤细胞.RT-PCR检测干扰前、后U251细胞OPN mRNA的表达;免疫印迹法检测干扰前、后U251细胞OPN、MMP-2、MMP-9、uPA蛋白表达;MTT法检测细胞增殖能力的变化;Transwell体外侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化;细胞划痕实验观察细胞迁移能力的变化.结果:与未感染组、空载体感染组相比,LV-OPN shRNA感染组OPN mRNA、OPN蛋白及MMP-2、MMP-9、uPA蛋白表达均明显下降;LV-OPN shRNA感染组细胞增殖、侵袭能力及迁移能力也明显下降.结论:慢病毒载体介导的骨桥蛋白RNA干扰在体外能抑制U251细胞OPN mRNA和蛋白表达, 进而抑制U251细胞在体外的生长及侵袭,因此可以推测OPN是促进胶质瘤增殖和侵袭的基因之一,为胶质瘤的治疗提供新的靶点.     

结肠癌及结肠腺瘤细胞核形态计量指标的逐步判别分析

目的 检测结肠上皮异型增生的形态计量指标，探讨其在诊断学中的应用。方法 应用图像分析技术对５３例例结肠癌、３０例结肠腺瘤及１０例正常肠粘膜进行细胞核８项参数的测定。结果 多数九在各组间差异具有显著性（Ｐ〈０．０１），其中核面积、核最大宽径、平均光密度是判别结肠癌变的最佳数，由此建立的判别函数回代符合率达８２．９５％。结论 应用图像分析技术对结肠癌前病变及癌病变进行形态计量分析，可作为鉴别诊断中的重     

还原型辅酶I四唑氮还原酶的染色方法

还原型辅酶 四唑氮还原酶 (NADH- TR)染色技术是区分 、 型肌纤维结构的重要方法 ,是神经肌病诊断的主要指标之一。该染色方法简便 ,但如果没有把握好一些细节问题 ,将影响染色效果。现将体会介绍如下。1　材料与方法1.1　材料　肌病患者的肱二头肌或股四头肌活检组织 ,OCT包埋 ,经液氮预冷的异戊烷速冻 ,用 CM30 0 0型恒冷切片机 (德国莱卡公司 )在 - 2 2℃下切片 ,厚度为 4 μm,于- 2 0℃保存。1.2　孵育液的配制　 (1) 0 .2 mol/ L Tris- HCl缓冲液 (p H7.4± 0 .1) 10 ml;加氯化硝基四唑氮 (NBT) 10 m g,电炉加热并搅拌 ,加热…     

肌球蛋白三磷酸腺苷酶的染色技术

肌球蛋白三磷酸腺苷酶(mlyosin ATPase)定位于骨骼肌，ATP酶染色是鉴别肌纤维类型及分布的最理想的应酶，对神经性肌萎缩和肌源性肌萎缩的诊断有重要的价值。目前要用钙激活法，该方法较为轻典，但其染色效果受多种因素影响；没有一定的经验，每次实验并不一定都能成功。笔者经过多年的实践与摸索，获得较为稳定且满意的结果，现介绍如下。     

小心脏伴冠状动脉发育不良猝死1例报告

1尸检资料死者,男性,26岁,与他人发生纠纷争执时突然倒地,神志不清,在送往医院抢救途中(约十几分钟内)死亡。据了解,死者生前身体健康,无心脏病史。死后13 h尸检。主要尸检所见:青年男性,身高168 cm,身体质量42 kg,发育正常,外观明显消瘦,背部及下肢见1.5 cm×0.1 cm、0.5 cm×0.5 cm两处表皮剥脱。解剖见心脏横径8 cm,质量150g;其余脏器形态正常,各脏器、组织肉眼未见机械性损伤征象。心脏病理解剖示:左、右心室及室间隔厚度分别为1.3,1.3及0.3 cm,冠状动脉各分支显著细小。镜下见心肌纤维横纹不清,左、右心室心肌细胞灶性肥大,部分变性,心…     

脂质沉积性肌病一家系二例报告

先证者，女性，17岁。以“进行性肢体无力，肌肉变细3年”入院。3年前患者无诱因出现双下肢无力，易疲劳，下蹲站立时困难，双上肢逐渐出现无力，不能举重物，渐出现肌肉萎缩，无晨轻暮重，无肌肉跳动、疼痛。查体：肩胛带肌及四肢肌肉萎缩，颈屈肌肌力Ⅲ级，双上肢近端肌力Ⅳ级，远端肌力Ⅴ级。双下肢近端肌力Ⅲ 级，远端肌力Ⅴ级，无假性肥     

骨骼肌活检组织恒冷切片技巧

骨骼肌活检技术在 186 8年由 Duchenne首创 [1 ] ,现已广泛应用于临床 ,成为诊断神经肌肉疾病的手段之一。为了避免肌肉活检组织经固定、脱水、包埋等引起人为的变化 ,目前多采用速冻与恒冷切片 ,进行各种肌酶染色 ,对肌病的病理诊断和研究都具有十分重要的意义。但可因速冻或冷冻切片不理想 ,产生冰晶或切片皱折、破损等现象而影响观察与诊断。为克服这些现象 ,笔者认为把握好速冻及冷冻切片两个环节的技巧最为关键 ,现介绍如下 :1　材料与方法1.1　材料　活检组织取自患者的肱二头肌、三角肌、股四头肌或腓肠肌 ,大小约 0 .8cm× 0 .5 cm…     

新形势下病理学教学形式与探索

为了提高病理学教学水平和教学质量,文中分析了现阶段病理教学所存在的问题,提出了更新教学内容,增设肿瘤病理学课程,采用高科技手段,加强形象化教学,建立教学网络．开展远程教学等设想。     

过碘酸-Schiff染色法与苏丹黑B双重染色在肌病诊断中的应用

在肌病病理诊断过程中,对骨骼肌活检标本冰冻切片进行H-E染色后,观察时发现有空泡现象的组织切片,除排除冰晶以外,一般考虑是否有糖原累积或脂质沉积,需要分别进行糖原染色与脂肪染色,以做进一步的鉴别诊断.过碘酸-Schiff染色法(periodic acid schiff,PAS),是一种常用的糖原染色方法;苏丹黑B是常用脂肪染色方法之一.笔者尝试将这2种染色方法在同一张切片上先后进行染色,实验结果表明,方法可行、结果满意;并且给观察提供方便.