长链非编码RNA ZFAS1在非小细胞肺癌患者组织中表达及作用

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中锌指结构反义转录本1(zinc finger antisense 1,ZFAS1)表达水平,探讨ZFAS1在NSCLC进展中的生物学作用。方法实时荧光定量RT-PCR检测ZFAS1在NSCLC患者癌组织和癌旁组织中的表达水平。RNA干扰ZFAS1在A549细胞中表达,细胞计数和克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式分析检测细胞周期和细胞凋亡,Transwell迁移和基质胶侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量RT-PCR检测Cyclin D1、Bcl2、N-cadherin、ZEB1、Slug和Twist基因表达水平变化。结果 ZFAS1在NSCLC患者癌组织中的平均表达水平[0.01(0.002,0.054)]较癌旁组织[0.002(0.001,0.012)]明显升高(Z=-2.638,P0.01)。ZFAS1基因敲减后,A549细胞增殖能力明显减弱(P0.01);A549细胞周期G1期比例升高,S期比例下降(P0.01);A549细胞凋亡比例明显增加(P0.01);A549细胞迁移和侵袭能力明显下降(P均0.01);A549细胞中Cyclin D1、Bcl2、N-cadherin、ZEB1、Slug和Twist基因表达水平均降低(P均0.05)。结论 ZFAS1在NSCLC患者癌组织中呈高表达。ZFAS1基因敲减诱导细胞周期阻滞、凋亡和抑制上皮-间质转变(EMT),减弱NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭能力。     

中性粒细胞促进胃癌细胞体外迁移能力

目的探讨中性粒细胞体外对胃癌细胞生物学特性的影响及机制。方法采用胃癌细胞条件培养基作用于中性粒细胞,实时荧光定量PCR检测其炎症因子基因(IL-8、CCL2、TNF-α)表达情况。用活化后的中性粒细胞条件培养基作用于胃癌细胞,MTT实验检测胃癌细胞增殖情况,流式细胞术分析胃癌细胞的细胞周期,细胞划痕实验检测胃癌细胞迁移能力,western blot检测胃癌细胞信号通路蛋白表达情况。结果经胃癌细胞条件培养基作用后,中性粒细胞IL-8、CCL2和TNF-α等炎症因子基因表达明显上调(P0.05);活化的中性粒细胞条件培养基能够显著促进胃癌细胞体外迁移(P0.01),但对胃癌细胞增殖无明显影响(P0.05);经活化的中性粒细胞条件培养基作用后,胃癌细胞STAT3和ERK1/2信号通路蛋白磷酸化增加(P0.05)。结论胃癌细胞条件培养基能够诱导中性粒细胞活化,通过分泌炎症因子激活胃癌细胞STAT3和ERK1/2信号通路促进其体外迁移能力。     

干细胞因子Nanog在肿瘤中的研究进展

Nanog是维持胚胎干细胞自我更新和多能性的关键转录因子。Nanog在分化的细胞中表达逐渐降低或缺失。研究发现肿瘤细胞中Nanog异常激活,并且与肿瘤发生、发展和转移密切相关。Nanog通过调控肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭、肿瘤干性以及肿瘤免疫逃逸等多种机制参与肿瘤生长、转移和耐药。临床研究证据提示Nanog在肿瘤患者中异常高表达,可作为预后评估的独立指标。本文就Nanog在肿瘤中的作用、分子机制和临床应用的研究进展作一综述。     

海洋生物活性药物BA-TPQ和FBA-TPQ对胃癌细胞的作用

目的:观察两种海洋生物活性药物BA-TPQ和FBA-TPQ对人胃癌细胞株BGC-823的作用与机制.方法:采用四唑氮蓝(MTT) 法测定不同浓度BA-TPQ和FBA-TPQ对BGC-823细胞的生长作用,应用流式细胞术检测BA-TPQ和FBA-TPQ对 BGC-823细胞增殖和细胞周期的影响,应用蛋白质印迹法检测BA-...     

中西医结合治疗输尿管结石30例临床观察

输尿管结石为临床常见病、多发病,输尿管结石多来自肾脏,常滞留在输尿管的狭窄部位,引起梗阻、肾绞痛、肾积水及肾功能损害。在祖国医学中,输尿管结石属于“石淋”、“血淋”范畴。基本病机为“肾虚膀胱热”,治疗以“实则清利,虚则补益”为基本治疗原则。笔者自1994年以来,运用中西医结合治疗输尿管结石30例,取得了显著疗效,现报告如下。1 临床资料 本组共46例输尿管结石患者。其中男性:31人,女性15人。年龄最大者58岁,最小者21岁。疗程1天至11年。将46例患者随机分成中西医结合治疗     

人Nanog基因重组腺病毒载体的构建及其在人脐带间充质干细胞中的表达

摘要:目的：构建重组人Nanog基因腺病毒载体(Ad-Nanog),转染人脐带间充质干细胞（hucMSCs）,用于后续研究。 方法：设计含有KpnⅠ及XhoⅠ酶切位点的引物,PCR扩增Nanog基因,将扩增产物亚克隆到pAdTrack-CMV穿梭质粒上,经双酶切和基因测序鉴定,重组穿梭质粒经PmeⅠ线性化后,在含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183中同源重组,筛选获得Ad-Nanog重组腺病毒质粒。经PacⅠ酶切线性化,脂质体转染293A细胞,包装和扩增病毒,并感染hucMSCs。 结果：重组腺病毒质粒经PCR和双酶切鉴定正确,测序结果和设计片段的序列一致。荧光显微镜下观察在感染的hucMSCs中绿色荧光蛋白高效表达。 结论：成功构建了Nanog腺病毒表达载体,能高效转染hucMSCs,可用于后续转基因的研究。     

脐带间质干细胞心肌样分化中干细胞标志物的表达

目的:探讨人脐带间质干细胞 (human umbilical cord mesenchymal stem cells,hucMSCs)在体外特定条件下是否可以定向分化为心肌样细胞及干细胞标志物的表达变化.方法:采用脐带组织块贴壁培养方法分离人脐带间质干细胞,用第2代hucMSC进行体外心肌细胞诱导分化;采用 RT-PC...     

尿液足状突细胞标志蛋白的检测及在肾病中的临床意义

Podocalyxin(PCX)是一种CD34相关性唾液酸糖蛋白,主要由肾脏上皮细胞(足状突细胞)和内皮细胞合成[1].足状突细胞表面分布的podocalyxin通过其所携带的电荷之间的排斥作用参与肾小球电荷屏障的形成,保持足状突细胞滤过隙膜的开放和结构的稳定.本文检测30例健康体检者和56例肾病患者的尿PCX、RBP(视黄醇结合蛋白)及α1-M(α1微球蛋白),观察PCX对肾病患者肾损伤早期诊断的临床价值.     

乳鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性检测方法初探

目的探讨乳鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性的检测方法,为研究骨代谢异常及骨质疏松症等骨病提供简便可靠的检测手段.方法采用经体外培养的乳鼠成骨细胞,制备上清液、裂解液和冻融液样本,分别用二乙醇胺、2-乙基氨基乙醇、2-氨基-2-甲基-1-丙醇3种不同缓冲液的试剂方法,测定其碱性磷酸酶活性,并作比较分析.结果使用二乙醇胺缓冲液的试剂方法,对3种标本的测定值都最高,与各组比较分析,差异均有显著性(P＜0.01),且变异系数最小,其他两种方法的测定结果无明显差异(P＞0.05).用3种不同缓冲液试剂方法检测3种不同方法制备的标本,均以裂解液中碱性磷酸酶活性最高,冻融液次之,上清液最低,分析结果,差异均有显著性(P＜0.01).结论用二乙醇胺缓冲液的试剂方法,测定体外培养乳鼠成骨细胞裂解液碱性磷酸酶的活性,效果较为理想.     

胃癌患者血清LINC00978表达及其临床意义

目的检测胃癌患者血清中LINC00978表达水平,评估其表达水平与临床病理参数的关系,并探讨其临床诊断价值。方法实时荧光定量RT-PCR检测LINC00978在胃癌细胞、体检健康者、胃良性疾病及胃癌患者血清中的表达水平,分析其与胃癌患者临床病理参数的相关性,并用ROC曲线分析其诊断效能。结果 LINC00978在人胃癌细胞系MGC-803中的表达水平(18.88±1.15)明显高于胃黏膜上皮细胞(1.00±0.03),差异有统计学意义(t=-21.926,P0.05)。LINC00978在胃癌患者血清中的平均含量[3.525(1.385,8.954)]较胃良性疾病患者[0.419(0.258,1.369)]和体检健康者[0.814(0.351,2.510)]均明显升高(Z值分别为-4.834和-4.686;P均0.01),且与淋巴结转移、浸润深度和TNM分期相关(r分别为0.448、0.369和0.383,P均0.01);胃癌患者术后血清中LINC00978的表达水平[0.17(0.15,0.39)]较术前[0.98(0.59,1.61)]明显降低(Z=-5.731,P0.01)。与体检健康者相比,LINC00978在胃良性疾病患者血清中表达差异无统计学意义(Z=-1.693,P0.05)。胃癌患者血清LINC00978的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.807,95%可信区间(CI)为0.723~0.882,当cut-off值为1.806时,其诊断胃癌的敏感性为71.4%,特异性为75.9%。结论 LINC00978在胃癌患者血清中呈高表达,且与淋巴结转移、浸润深度和TNM分期相关,有望成为潜在的胃癌诊断的生物学标志物。