融合自杀基因FCU1真核表达载体的构建与表达

目的 构建含有融合自杀基因FCU1的真核细胞表达载体pEGFP-FCU1，并转染肝癌细胞SMMC7721，初步探讨Fcu1／5-氟胞嘧啶(5-FC)系统对体外培养细胞的生长抑制作用。方法 用SmaⅠ，XhoⅠ两种限制性内切酶分别切割质粒pEGFP-C1和pCIneoFCU1，所得载体片断和目的基因片断连接后转化，阳性重组子转染肝癌细胞SMMC7721，以绿色荧光蛋白基因为报告基因，用G418筛选出阳性细胞克隆后，进行体外药物敏感实验。结果 酶切鉴定重组子阳性克隆率约为60％，转染成功的细胞在荧光显微镜下可见绿色荧光；转染的细胞在5-FC作用下其生长抑制率明显高于未转染细胞的生长抑制率，且旁观者效应显著。结论 自杀基因FCU1真核表达载体构建正确，转染细胞成功并获稳定表达，FCUl／5-FC系统对肝癌细胞SMCC7721具有实验性的基因治疗作用。     

实体器官移植受者移植术后下消化道并发症流行病学及影响因素

实体器官移植(SOT)作为治疗终末期器官衰竭疾病的有效手段,临床开展越来越广泛。随着外科手术技术及术后管理水平的逐年提高及新型免疫抑制剂的应用,SOT受者术后生存率和生存质量不断提高。国外研究发现,SOT受者术后下消化道并发症(如憩室炎、结肠息肉和结直肠癌等)发生率随术后时间延长逐年增加,并成为影响受者生存时间和生存质量的重要因素。但目前国内这方面研究较少,且大多为个案报道。本文旨在对近年来SOT受者移植术后下消化道并发症流行病学及其影响因素相关研究进行综述,以期为临床预防及早期诊治提供依据,改善受者预后。     

结直肠癌组织c-met表达及与肿瘤血管生成关系

目的研究人结直肠癌组织中c-met蛋白的表达及与微血管密度（MVD）的关系,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测50例结直肠癌组织、50例正常黏膜组织及20例结直肠腺瘤组织中c-met蛋白的表达以及CD105标记的MVD。结果 c-met蛋白在结直肠癌组织中阳性表达率明显高于结直肠腺瘤组织与正常黏膜组织（χ2=31.929,P〈0.01）。结直肠癌组织中MVD明显高于结直肠腺瘤和正常黏膜组织（H=92.435,P〈0.01）。结直肠癌组织c-met蛋白表达和MVD与肿瘤部位、组织学分级无关,而与Dukes分期、浸润深度、淋巴结转移及远处转移密切相关（χ2=4.000～9.018,t=2.605～4.024,P〈0.05、0.01）,c-met阳性表达的结直肠癌组织中MVD显著高于c-met阴性者（t=2.752,P〈0.01）。结论 c-met在结直肠癌的侵袭与转移中可能发挥着重要作用,联合检测c-met的表达及MVD可能有助于结直肠癌预后的判断。     

瑞巴派特治疗慢性糜烂性胃炎疗效观察

目的观察瑞巴派特治疗慢性糜烂性胃炎的疗效。方法将75例慢性糜烂性胃炎患者随机分成两组：试验组45例,口服瑞巴派特,0.1g/次,3次/d;对照组30例,口服硫糖铝,1.0g/次,3次/d。均治疗8周。治疗前及治疗1、2、4、6、8周对患者上腹痛、上腹胀、反酸和嗳气症状进行症状评分,治疗前、后分别行胃镜检查及胃黏膜组织病理学检查,并进行胃镜下疗效评分和胃黏膜慢性炎症程度、炎症活动程度评分。结果治疗后两组患者上腹痛、上腹胀、反酸和嗳气总积分间差别有统计学意义（P〈0.05）;胃镜评分间比较,差别有显著性意义（P〈0.05）;胃黏膜糜烂区慢性炎症程度及炎症活动程度评分间差别无统计学意义（P〉0.05）。结论瑞巴派特可改善慢性糜烂性胃炎患者的上腹痛、上腹胀、反酸和嗳气等上消化道症状。     

术前合理营养支持对胃癌及结直肠癌患者术后恢复的影响

目的：探讨术前合理的营养支持对胃癌及结直肠癌患者术后恢复的影响．方法：消化道恶性肿瘤手术并存在营养不良的患者69例,分为肠外营养组(PN组,24例)、肠内肠外营养结合组(EN-PN组,23例)和常规治疗组(NN组,22例),PN组和EN-PN组均于术前7d开始营养治疗,3组患者均于术后24 h开始肠内和肠外相结合的营养方式．分别于术前7d和术后7d测定血清白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)、转铁蛋白(TFN)、血清内毒素水平及细胞因子IL-6、TNFα,测定血清IgA,IgG,IgM,NK细胞活性及CD4/CD8值评价免疫功能,比较3组患者并发症的发生率及平均住院时间．结果：EN-PN组在术后7 d血清内毒素水平(4．23±2．01 ng/L)、IL-6(40．22±7．43 ng/L)及TNF-α(33．04±4．56 ng/L)均明显低于PN(分别为8．23±3．65,55．21±9．32,47．22±8．45 ng/L,P＜0．01)和NN组(10．66±5．23,67．01±10．21,56．43±9．67,ng/L P＜0．01)．而EN-PN组在术后7 d PA(0．27±0．06 g/L),TFN(2．81±0．65 g/L),IgG(10．43±0．86 g/L),NK细胞活性(18．04%±4．56%)及CD4/CD8值(4．98±1．21)明显高于PN组(分别为0．19±0．04,2．01±0．32,8．76±0．65 g/L,11．01%±3．01%,2．11±0．65,P＜0．05)和NN组(分别为0．15±0．03,1．32±0．27,9．05±0．79 g/L,6．45%±2．23%,1．22±0．79,P＜0．05)．与PN和NN组相比,患者并发症发生率(11．3% vs 16．4%,21．6%)和住院时间(7．0±1．4d vs 11．0±2．4,13．0±2．8 d)EN-PN组亦明显降低(P＜0．01)．结论：存在营养不良的消化道恶性肿瘤患者术前应用肠内和肠外营养相结合的营养方式是安全有效的,可促进患者恢复．     

胰腺癌组织中COX-2、VEGF-C表达和淋巴管密度

目的 检测胰腺癌及癌旁组织中COX-2、VEGF-C的表达与淋巴管密度(LVD),探讨它们之间的关系.方法 应用组织芯片技术和免疫组化方法检测40例胰腺癌及相应癌旁组织和12例远处正常胰腺组织中COX-2、VEGF-C的表达及LVD,分析它们之间的关系,以及与临床病理指标的关系.结果 胰腺癌组织COX-2、VEGF-C表达阳性率分别为70.0%(28/40)和67.5%(27/40),显著高于癌旁组织的42.5%(17/40)和35.O%(14/40,P＜0.01),也显著高于正常胰腺的8.3%(1/12)和25.0%(3/12).癌、癌旁及正常胰腺的LVD分别为4.75±2.77、15.20±4.70和1.67±1.15,以癌旁组织最高(P＜0.01).癌组织COX-2表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移相关;VEGF-C的表达与淋巴结转移相关.癌旁组织LVD与肿瘤分化程度、淋巴结转移有关,并与癌组织COX-2、VEGF-C表达存在一定相关性.结论 胰腺癌新生淋巴管主要存在于癌旁,淋巴管的形成可能有COX-2及VEGF-C的参与.     

糖尿病与胰腺癌的相关性研究

流行病学研究证实,糖尿病（D M）与胰腺癌存在相互联系。D M不仅能增加胰腺癌的发生风险,而且风险程度在各型DM中也不相同,同时DM可使胰腺癌病人病死率相应增高;胰岛素以及胰岛素抵抗在胰腺癌形成过程中起重要作用,高糖血症状态可能导致机体异常代谢,产生氧化应激反应,进而激活相关通路,促进胰腺癌的发生。     

外周静脉注入超声造影剂介导p53基因治疗大鼠肝癌的实验研究

目的 :研究超声参数和超声造影剂对人野生型 p5 3基因导入大鼠肝癌细胞效果的影响 ,以探讨一种新型、高效的基因导入方法。方法 :采用免疫抑制法建立大鼠原位肝癌模型。将一定体积造影剂和一定数量的 p5 3质粒经股静脉注入后 ,立刻用二次谐波模式的超声经体表照射瘤区 ,并选用不同的时间和机械指数。 2 d后用半定量 RT-PCR法检测大鼠肝癌细胞内 p5 3m RNA的相对表达量。结果 :未导入 p5 3质粒的肝癌细胞内没有 p5 3m RNA的表达 ,随着质粒注入量的增加 ,基因表达量明显增多。造影剂能明显促进基因表达 ,与未注入者相比有显著性差异 (P<0 .0 0 1) ,并与造影剂的体积有关。超声照射可提高基因的转化率 ,并与照射时间和机械指数有关。结论 :经外周静脉注入超声造影剂和基因后用超声照射靶组织 ,是一种新型的基因导入方法 ,既可控制肝癌基因治疗的靶向性 ,又能提高外源基因的表达水平。