用Percoll法、Ficoll法及常规法制备的效应细胞杀伤功能的比较

本文用Percoll配成的不连续密度梯度(Percoll法)对C57BL、C_(3H)和CBA品系小鼠的脾细胞进行了分离,并用不同密度梯度层分离所得的细胞对~3H-TdR或~(51)Cr标记的YAC-1靶细胞进行杀伤功能检测.发现以50～60％、60～70％二个密度梯度层之间的细胞杀伤活性最高,poly I:C可以增强这种活性.并且在同一效靶比例下,这种效应细胞对YAC-1靶细胞的杀伤活性均高于用Ficoll-Isopague分离的脾细胞(Ficoll法)及常规制备的脾细胞(常规法),前者与后二者所获数据间呈显著性差异(p<0.01)。     

2006年沪港国际肝病会议精选(肝癌部分)

2006年沪港国际肝病会议精选(肝癌部分)肝细胞癌的预防西班牙巴塞罗那大学JordiBruix教授指出,大多数诊断为肝癌的患者有慢性病毒性肝炎[丙型肝炎病毒(HCV)或乙型肝炎病毒(HBV)感染]相关基础疾病,某些地区与黄曲霉毒素摄入、酗酒或代谢状况如血色素沉着症有关。避开这些可导致慢性肝损伤甚至肝癌的危险因素为一级预防提供了机会。HBV疫苗已经在防止病毒传播和降低肝细胞癌(HCC)发生中显示其作用,所以肝癌是第一个用疫苗预防成功的肿瘤。目前还没有HCV疫苗,所以预防HCV传播只有通过避免接触有潜在污染危险的血液(不必要的输血、共用…     

补肾健脾方对裸鼠原位肝癌切除术后复发瘤体血管生成拟态形成以及肺转移影响的研究

目的观察补肾健脾方对人肝癌高转移原位移植瘤裸鼠切除术后血管生成拟态(Vasculogenic Mimicry,VM)形成以及肺转移的影响。方法建立HCCLM3原位荷瘤切除术后复发转移裸鼠模型,分为补肾健脾方组(A组)、索拉非尼组(B组)、联合用药组(C组)、模型对照组(D组),每组7只。术后第3天起,给予相应药物灌胃,共给药28天,每天1次。末次给药后48 h处死裸鼠并取材,采用免疫组化法检测复发瘤体VE-cadherin、Eph A2、PI3K、FAK蛋白表达,计算血管生成拟态密度(Vasculogenic mimicry density,VMD)以及肺转移细胞数。结果 (1)VMD:C组与其余3组比较,VECadherin蛋白阳性面积显著降低(P0.05)。与D组相比较,A和C组Eph A2蛋白表达显著降低(P0.05);A、B、C组PI3K、FAK蛋白表达均显著下调(P0.05)。VMD由低到高依次为C、A、B、D组,与D组比较,下调倍数依次为1.4、1.2、1.1倍,但差异无统计学意义(P0.05)。(2)肺转移细胞数:与D组比较,A、C组肺转移肿瘤细胞数显著减少(P0.05)。结论补肾健脾方能有效降低VE-Cadherin、Eph A2、PI3K、FAK蛋白的表达,减少肺部转移;与索拉非尼联用时,对VE-Cadherin、Eph A2蛋白表达抑制尤为显著,能最大程度阻止VM的形成,降低肺部转移。     

FR-Ⅲ型功能调节器矫治前牙功能性反合的临床体会

目的 总结FR-Ⅲ型功能调节器矫治前牙功能性反合的临床效果.方法 对22例功能性前牙反合采用FR-Ⅲ型功能调节器矫治.结果 22例患者中21例疗效满意,面型明显改善.结论 FR-Ⅲ型功能调节器对上下颌骨的反向作用,使其临床作用确切.     

肿瘤干细胞与肿瘤转移

肿瘤干细胞具有不断自我更新、抗凋亡和耐药等特性,随着肿瘤干细胞（或干细胞样肿瘤细胞）研究的不断深入,它在肿瘤发生发展中的作用及其临床治疗价值日益显现。本文就肿瘤干细胞发现的历史、调节机制及其在肿瘤转移中的作用作一综述。     

人肝癌肺和淋巴结靶向转移细胞及裸鼠移植模型的建立

目的 克隆具有肺和淋巴结转移亲嗜性的人肝癌细胞并建立相应的裸鼠移植模型.方法 将荧光人肝癌细胞HCCLM3-R接种于4周龄的裸鼠肝脏,6周后在荧光解剖下观察并获取肺及腹腔淋巴结转移灶组织,经体外克隆培养,所获细胞分别标记为HCCLM3-R-LM1和HCCLM3-R-LnM1.接种上述两种细胞于4周龄裸鼠肝脏,观察各自肺和腹腔淋巴结转移灶荧光数量,并与肺组织连续切片中的转移灶数目进行比较.计量资料采用Wilcoxon秩和检验和Kruskal-Wallis秩和检验进行统计学分析.结果 HCCLM3-R-LM1、HCCLM3-R和HCCLM3-R-LnM1细胞接种于裸鼠肝脏后第6周,在肺和腹腔淋巴结中均能发现肿瘤转移.3株细胞接种后,裸鼠肺和腹腔淋巴结转移灶荧光面积分别为8687.00±1844.63和2570.00±318.20(P＜0.001),6457.67±832.62和10 994.33±2212.31(P＜0.001),2968.67±2571.00和24 416.00±7186.13(P＜0.001),每只裸鼠光镜下肺转移灶中位数分别为755、430、310个(P＜0.001),与荧光定量结果相吻合.结论 成功建成人肝癌肺和淋巴结亲嗜性转移细胞和裸鼠移植模型,其中HCCLM3-R-LM1细胞具有明显的肺转移特性,而HCCLM3-R-LnM1细胞具有明显的淋巴结转移特性,为肝癌器官靶向转移研究提供了理想的体内外模型.

Abstract：

Objective To establish a systematic site-specific metastatsis model of human hepatocellular carcinoma (HCC) in nude mouse.Methods HCCLM3-R cells were seeded into mice liver to establish xenograft mouse models.With the help of RFP,metastasis foci in lungs and lymph nodes in mice were detected using fluorescent stereomicroscopy and were removed.Cells derived from the metastasis foci were named HCCLM3-R-LM1 and HCCLM3-R-LnM1 respectively.HCCLM3-R-LM1 and HCCLM3-R-LnM1 cells were seeded into mice livers to analyze the lung and lymph node metastasis.Lungs of all tested mice were collected,examined by pathological evaluation and counted lung metastasis.Results Both lung and lymph node metastasis were found in HCCLM3-R-LM1,HCCLM3-R and HCCLM3-R-LnM1 cells and a significant difference was found between the lung and the lymph node metastasis levels in the three cells.The fluorescent areas (pixels) of lung and lymph node metastasis were 8687.00 ± 1844.63 versus 2570.00 ±318.20 (P = 0.0031) in HCCLM3-R-LM1 cells,6457.67±832.62 versus 10 994.33±2 212.31(P=0.0036) in HCCLM3-R cells,and 2968.67 ± 2571.00 versus 24 416.00 ± 7 186.13 (P = 0.0094) in HCCLM3-R-LnM 1 cells,respectively.The middle numbers of microscopic lung metastatic foci were 775,430 and 310in HCCLM3-R-LM1,HCCLM3-R and HCCLM3-R-LnM1 cells (P＜0.001),respectively,consist with the results quantified by RFP.Conclusion We established the systematic site-specific metastasis models which demonstrates lung- and lymph node-specific metastasis potential in nude mice and can be used as a model for researches on site-specific metastasis of HCC.     

补骨脂乙素对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖的抑制作用和凋亡诱导作用及其机制

目的：观察补骨脂乙素（IBC）对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其可能的作用机制。方法：将体外培养的Tca8113细胞分为对照组（0 μmol·L^-1）和不同浓度IBC组（10、20、40及80 μmol·L^-1）。通过MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中Akt、p-Akt、Erk、p-Erk、Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达水平。结果：MTT法检测,随着IBC浓度的增加和作用时间的延长,Tca8113细胞的增殖抑制率逐渐增加,12、24和48h半数抑制浓度（IC₅₀）分别为（285.13±8.97）、（132.40±7.76）和（58.56±5.93） μmol·L^-1,不同时间点IC₅₀比较差异有统计学意义（P < 0.05）。流式细胞术检测,与对照组（1.69%±0.65%）比较,作用48h后20和40 μmol·L^-1 IBC组细胞凋亡率（分别为8.21%±2.32%和22.45%±1.18%）明显升高（P < 0.05）。Western blotting法检测,与对照组比较,作用48h后20和40 μmol·L^-1 IBC组细胞中Bcl-2、p-Akt和p-Erk表达水平明显降低（P < 0.05）,Bax表达水平明显升高（P < 0.05）;Akt和Erk蛋白表达水平无明显变化（P > 0.05）;与对照组比较,作用48h后40 μmol·L^-1 IBC组Tca8113细胞中Caspase-3蛋白表达水平明显升高（P < 0.05）。结论：IBC可抑制Tca8113细胞的增殖并诱导细胞凋亡,Akt和Erk通路可能是其诱导肿瘤细胞凋亡的途径。     

猪冠状动脉阻塞及再灌注期卡托普利的抗心律失常作用

本用可逆性气囊导管阻塞猪冠状动脉来研究卡托普利抗心律失常、改善心肌血供及阻止酶释放作用。结果表明：卡托普利能减少高治疗组猪（前１０分钟用６ｍｇ·ｋｇ＾－１，后９０分钟用２５μｇ·ｋｇ＾－１·ｍｉｎ＾－１）室性颤动发生率（阻塞期、再灌注期分别为２／１２，１／１２；对照组为１２／２１，１１／２１，Ｐ〈０．０５）。对其它观察指标无明显影响。提示卡托普利有非特异性抗心律失常作用。     

西吡氯铵联合灭滴灵涂剂治疗复发性阿弗他溃疡

目的 探讨西吡氯铵联合灭滴灵涂剂治复发性阿弗他溃疡(RAU)的效果.方法 将150例患有RAU的患者随机分为观察组(75例)和对照组(75例),对照组采用灭滴灵涂剂局部涂用,观察组采用灭滴灵涂剂局部涂用20min后,含化西吡氯铵,两组均治疗致溃疡面愈合或2周止.结果 实验组患者溃疡平均愈合时间为(3.25±1.50)d.对照组为(5.90±1.84)d.两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).实验组总有效率(92.0％),明显高于对照组(60％).(P＜0.05).结论:西吡氯铵联合灭滴灵涂剂对RAU治疗有明显促进溃疡面愈合,疗效显著,减少患者痛苦.