用液相色谱-串联质谱法测定血浆总同型半胱氨酸

目的：建立血浆中总同型半胱氨酸(tHcy)的液相色谱-串联质谱(LC-MS／MS)测定法。方法：血浆tHcy及内标氘代高胱氨酸经巯基乙醇还原后，用10％三氯乙酸沉淀血浆蛋白，经液相色谱分离后，采用电喷雾离子化-串联质谱进行多反应监测(MRM)检测，离子选择通道分别为m／z：136．2／46．9(Hcy)，140．2／48．9(Hcy-d4，氘化Hcy)。Hcy、Hcy-d4的保留时间均为6.3min。结果：Hcy在2．5～640μmol／L范围内线性关系良好。本法的最低检测浓度为O．3μmol／L(S／N≥5)。批内、批间精密度分别为1.97％～8.79％、2．55％～4．14％。方法回收率为100．3％～109．1％。结论：该方法的预处理快速、简便，检测专一灵敏，试剂成本低廉，可适应开展大规模临床Hcy研究的需要。     

胺碘酮血药浓度的HPLC测定方法

胺碘酮近年来已被临床用作第三类抗心律失常药物。但由于该药物的半衰期较长,排泄缓慢,易在体内潴留,口服给药其抗心律失常作用要数日至数周后才能充分体现,存在着明显的个体差异。该药物有一定的毒副作用,其对窦房结和房室给有抑制作用,大剂量给药可能发生心室颤动等严重反应。为了向临床提     

茴三硫片剂人体生物等效性研究

目的:比较两种茴三硫制剂药动学及人体生物等效性。方法:19例健康男性受试者随机交叉口服茴三硫受试片剂和参比片剂75 mg,采用液相质谱-串联质谱(LC-MS/MS)的方法测定血清中茴三硫代谢物对羟基苯基三硫酮的浓度,经DAS2.0软件统计,进行相对生物利用度和生物等效性分析。结果:健康受试者口服茴三硫受试制剂和参比制剂75 mg后,血清中对羟基苯基三硫酮的Cm ax分别为(296±92.7)和(295±103)μg.L-1;Tm ax分别为(2.24±1.44)和(1.79±0.73)h;AUC0~t分别为(2 562±671)和(2 189±669)μg.L-1.h;AUC0~∞分别为(2 677±713)和(2 356±688)μg.L-1.h;t1/2分别为(12.5±4.43)和(11.8±4.40)h。以AUC0~t计算相对生物利用度,平均为(118.8±16.4)%。结论:采用双单侧t检验及置信区间法进行的生物等效性检验结果表明,两种茴三硫片制剂具有生物等效性。     

用液相色谱-质谱-质谱法测定人血清中非洛地平浓度

目的:建立液相色谱-质谱-质谱(LC-MS-MS)法测定人血清中非洛地平的浓度。方法:血清样品经液-液萃取预处理。色谱柱为Xterra柱(50 mm×2.1 mm,3.5μm),流动相为乙腈-0.02%氨水,采用梯度洗脱,流速为0.3 mL/min。非洛地平和尼莫地平(内标)的多反应监测(MRM)扫描离子对分别为m/z382.1→145和m/z417.2→92,两者的保留时间分别为1.24 min和1.06 min。结果:非洛地平在0.04～20 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.999 7),低、中、高浓度(0.08、8.0、16.0 ng/mL)的日内RSD分别为6.60%、7.22%和5.01%(n=6),日间RSD分别为9.42%、8.46%和5.12%(n=14),准确度为98.21%～106.20%(n=6)。结论:本法操作简便,检测准确、灵敏、专一,重复性好,适用于非洛地平血药浓度监测和药动学及生物利用度研究。     

单剂口服利巴韦林片在健康人体的药代动力学

目的 对国产利巴韦林片(抗病毒药)在健康中国男性受试者中空腹单剂量口服时的药代动力学特点进行评价.方法 受试者单剂量口服利巴韦林300 mg,用液相色谱-串联质谱法测定血浆中利巴韦林浓度,并用非房室模型计算药代动力学参数.结果 药代动力学参数AUC0-t为(5584.91±1659.34)ng·h·mL-1;AUC0-∞为(7166.33±2224.28)ng·h·mL-1;Cmax为(442.60±148.97)ng·mL-1;tmax为(1.40±1.20)h;t1/2为(22.93±6.38)h;Ke为(0.03±0.01)h-1;Vd为(1484.37±491.50);CL为(45.67±13.90)L·h-1.结论 单剂口服利巴韦林在健康人体的代谢特征基本与文献报道参数[2-5]一致.     

维拉帕米及去甲基维拉帕米临床血药浓度的HPLC—FLU检测

目的 :建立一种简便的维拉帕米 ( Ver)及去甲基维拉帕米 ( Norv)血药浓度 HPL C- FL U的测定方法。方法 :色谱柱为Alltima C1 8柱 ( 15 0 mm× 4.6 m m,5 ︼m) ;流动相为甲醇 -水 -三乙胺 ( 5 2∶ 47.6∶ 0 .4) ,用冰醋酸调节 p H至 5 .41,流速 1ml/min。荧光检测激发波长 Ex=2 84nm,发射波长 Em=313nm。Ver和去 Norv的保留时间分别为 7.14min和 5 .17min,血样预处理采用乙腈直接沉淀法。结果 :Ver及 Norv血药浓度在 2 5～ 40 0 ng/ ml范围内线性关系良好 ( r≥ 0 .9997) ,最低检测限分别为 2 0 0 pg和 10 0 pg( r S/N≥ 3) ,最低检测浓度均为 2 0 ng/ ml。批内、批间精密度小于 5 %。结论 :本方法简便可靠 ,可较好地满足临床治疗药物监测工作的需要     

裸鼹鼠生长发育指标及主要脏器系数正常参考值测定

目的测定不同周龄裸鼹鼠的生长发育指标及脏器系数正常参考值。方法以本中心近3年来饲养繁殖的裸鼹鼠为数据来源，测量其生长发育指标及脏器系数。结果裸鼹鼠生长发育过程中雌雄差异不明显。结论裸鼹鼠生长发育各项指标及脏器系数参考范围的确定为其实验动物标准化及实验应用提供重要参考数据。     

老年患者血清同型半胱氨酸与动脉粥样硬化相关疾病关系的研究

目的了解老年人血清同型半胱氨酸(Hcy)水平,探讨Hcy与年龄、性别、动脉粥样硬化(AS)相关疾病的关系.方法采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS)测定833例老年人血清Hcy水平,对不同性别、AS相关疾病的患者Hcy水平进行统计学分析.结果本次研究发现不同程度肾功能减退的患者,其血清Hcy水平(38.18±11.55)μmol/L明显高于肾功能正常者(28.9±11.28)μmol/L,高血压和冠心病患者血清Hcy水平(30.11μmol/L±12.68μmol/L,32.02μmol/L±9.65μmol/L)高于高脂血症患者(27.54±11.09)μmol/L,高血压合并冠心病患者Hcy水平(34.03±10.61)μmol/L明显高于高脂血症患者并达到统计学显著性(P＜0.05).结论肾功能减退、AS相关疾病特别是冠心病和(或)高血压与高水平Hcy有密切关系.     

低氧对裸鼹鼠皮肤成纤维细胞自噬水平及凋亡的影响

目的 比较裸鼹鼠成纤维细胞常氧与低氧条件下自噬与凋亡水平.方法 分别采用低氧（3％O2）与常氧（20％ O2）培养裸鼹鼠皮肤成纤维细胞,采用Western blotting、RT-PCR等方法检测自噬相关基因Beclin1、LC3的表达,并用流式细胞术检测低氧与常氧条件下裸鼹鼠成纤维细胞凋亡水平.结果 裸鼹鼠皮肤成纤维细胞在低氧与常氧处理24 h时,LC3 Ⅱ蛋白的表达量并无明显差异,而低氧处理48 h后LC3 Ⅱ蛋白的表达量显著高于常氧组,并且裸鼹鼠成纤维细胞随着低氧培养时间的延长,LC3 Ⅱ蛋白表达升高.流式细胞术结果显现低氧处理组裸鼹鼠皮肤成纤维细胞凋亡率显著低于常氧组.结论 裸鼹鼠皮肤成纤维细胞可以通过提高自噬水平适应低氧环境,这为今后深入研究裸鼹鼠耐低氧机制提供了参考.     

反相高效液相色谱法测定马来酸依那普利的含量

本文以苯乙酮为内标，建立了马来酸依那普利制剂的反相高效液相色谱测定法。色谱条件为：ＡＬＬＴＩＭＡＣ１８色谱柱５μ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；甲醇—乙腈—水—１％磷酸（６０５３３．５１．５）为流动相，色谱柱温为６０℃，检测波长为２１５ｎｍ。依那普利的理论塔板数优于２５００，方法的精密度ＲＳＤ优于０．６％。