乙肝病毒核心抗原人源单链可变区抗体的筛选

目的　筛选、鉴定乙型肝炎病毒 (HBV)核心抗原 (HBcAg)蛋白的人源单链可变区抗体 (ScFv)的编码基因 ,为细胞内表达小分子单链抗体的研究及抗HBV的基因治疗研究奠定基础。方法　采用噬菌体表面展示技术 ,以HBcAg蛋白为固相抗原 ,从噬菌体单链可变区抗体半合成库中经过 5轮“吸附 -洗脱 -扩增”筛选过程 ,获得抗原结合活性较强的HBcAg人源单链可变区抗体阳性克隆 ,并对其进行免疫检测及序列测定。结果　筛选得到的ScFv片段编码基因为 771nt,编码的产物由 2 5 7个氨基酸残基组成 ,具有典型的轻链和重链可变区结构特点以及与HBcAg结合的特异性。结论　利用噬菌体抗体库技术成功地获得了HBcAg人源单链可变区抗体的编码基因 ,并获得了可溶性单链抗体的表达。     

浅谈研究生免疫学课程的教学改革

在生命科学中,免疫学是一门发展十分迅速的重要的前沿学科。为使基础医学专业和临床医学专业研究生更好地学习免疫学理论知识和技术方法,近年来,我们在教学内容、教学方法和考试形式等方面做了一系列改进与尝试,力争使医学生在将来的工作中自如地运用免疫学知识和技能。     

床旁人工肝血浆置换治疗吉兰-巴雷综合征的疗效观察

目的 观察人工肝血浆置换治疗吉兰-巴雷综合征的疗效及药品比例.方法 将63例吉兰-巴雷综合征分为3组:人工肝血浆置换12例(置换组)、注射人丙种球蛋白组33例(丙球组)、激素治疗组18例(激素组),观察各组疗效,并进行统计学分析.结果 人工肝血浆置换组平均起效时间(5.1±1.7)d,有效率91.67%;注射人丙种球蛋白组平均起效时间(5.6土1.8)d,有效率90.91%;激素治疗组平均起效时间(13.8±2.2)d,有效率22.22%.人工肝血浆置换组、注射人丙种球蛋白组与激素组疗效对照差异均有统计学意义(χ2=13.889,24.727,P<0.01);丙球组与血浆置换组差异无统计学意义(χ2=0.006,P>0.05).药品比例平均(60.4±19.2)%,置换组平均(26.5±3.1)%,丙球组平均(75.5±4.9)%.两组比较差异有统计学意义(P=0.000<0.01);激素组平均(55.5±2.8)%.与前两组比较差异有统计学意义(P均<0.01).结论 人工肝血浆置换治疗吉兰-巴雷综合征安全、有效,而且能够显著降低药品费用占全部医疗花费的比例.     

开设基础与临床结合创新性实验教学项目的探索

首都医科大学基础医学实验教学中心开设了基础与临床结合创新性实验教学项目，该项目有利于培养学生的实践能力和创新精神，提高学生的综合素质。     

嗜酸性粒细胞与蠕虫感染

嗜酸性粒细胞（Eosinophil,Eos）是参与人体免疫反应的一种效应细胞,当有寄生蠕虫感染时被激活,比例可高达40%,在抗蠕虫感染中具有重要作用,本文就Eos的结构、功能以及在抗蠕虫感染中的免疫保护和组织损伤作用作一综述。     

石杉碱甲对多梗死性痴呆认知功能的改善

目的：观察石杉碱甲治疗多梗死性痴呆（MID）的临床疗效。方法：随机将40例MID患者分为两组，两组均给予相同常规治疗，治疗组加服石杉碱甲治疗（0．1mg／次，2次／日，连续服用12周），按简易智能状态量表（MMSE），临床痴呆量表（CDR）及日常生活自理量表（ADL）进行治疗前后的疗效评定。结果：治疗组认知功能及日常生活能力有明显改善，与对照组比较差异有显著性（P〈0．05）。结论：石杉碱甲能改善MID患者认知功能及日常生活能力，安全有效。     

香砂养胃丸治疗抗痨药物副反应的临床观察

自1993年以来,我们采用中药香砂养胃丸治疗抗痨药物副反应,效果满意,现报告如下。临床资料　选择100例住院的肺结核患者,以西药抗痨药治疗出现恶心、呕吐、饮食减少或不能食、腹胀等胃肠道症状为副反应。随机分为香砂养胃丸组(中药组)60例及西药对照组(对照组)40例。中药组男性42例,女性18例;年龄18～90岁,平均485岁;初治肺结核44例,复治肺结核16例。副反应出现在服抗痨药物7～60天后(平均354天)。对照组男性28例,女性12例;年龄20～88岁,平均481岁;初治肺结核28例,复治肺结核12例,副反应出现在服抗痨药物7～58天后(平均349天)。治疗方法　两…     

实时定量PCR分析小鼠树突状细胞TLR4 mRNA表达及地塞米松的调节

目的: 建立检测小鼠Toll样受体4(TLR4)mRNA表达水平的SYBR GreenⅠ实时定量PCR实验; 观察小鼠骨髓源树突状细胞(DC)发育成熟过程中TLR4 mRNA表达水平的动态变化以及地塞米松(DEX)对DC TLR4 mRNA表达的影响.方法: (1)用细胞因子定向诱导的方法将小鼠骨髓细胞培养为DC; (2)构建pUCm-T/TLR4和pUCm-T/β-actin重组质粒, 建立检测小鼠TLR4 mRNA水平的实时定量PCR实验; (3)用实时定量PCR技术对体外培养4、 6、 8、 10、 12 d的DC TLR4 mRNA表达水平进行动态观察; (4)在DC培养体系中加入DEX, 与常规培养DC TLR4 mRNA表达水平进行比较.结果: (1)从小鼠骨髓细胞中成功诱导培养了DC, 经免疫磁珠纯化后其纯度可达90%以上; (2)建立了能精确分析小鼠TLR4 mRNA表达水平的SYBR GreenⅠ实时定量PCR实验; (3)在DC培养前期TLR4 mRNA表达水平变化不大, 后期则明显升高; (4)DEX可使DC TLR4 mRNA表达增强.结论: 小鼠骨髓源DC TLR4 mRNA表达水平与其发育成熟阶段密切相关; DEX促进DC TLR4 mRNA表达.     

HBsAg人源噬菌体单链抗体的筛选及其在临床诊断中的应用

目的 筛选乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)的人源噬菌体单链抗体，并探讨其在临床治疗和诊断中的应用价值。方法 以HBsAg阳性血清超速离心纯化的HBsAg为固相抗原，从噬菌体单链可变区半合成抗体库中经过5轮“吸附—洗脱—扩增”筛选过程，获得特异性较强的HBsAg人源单链可变区抗体(ScFv)；用该抗体对10例石蜡包埋的乙型肝炎患者肝组织进行免疫组化鉴定。结果 酶联免疫吸附法(ELISA)结果表明，制备的HBV人源单链抗体能与HBsAg抗原特异性结合；免疫组化结果表明，该抗体能够特异性识别乙型肝炎患者肝组织中的HBsAg抗原，与正常肝组织及丙型肝炎病毒(HCV)的抗原均无交叉反应。结论 此法制备的单链抗体亲和性好，特异性强，且制备方法简便，周期短，为HBV病原的检测提供了新的有效试剂，为今后HBsAg人源抗体的研究和应用奠定了基础。     

联合检测GADA和ICA在2型糖尿病患者中的临床意义

目的:探讨在2型糖尿病患者中联合检测谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)和胰岛细胞自身抗体(ICA)的临床意义.方法:对482名到我院就诊的2型糖尿病患者用酶联免疫法测定GADA、ICA,同时于空腹和口服葡萄糖120 min时分别取静脉血,测定C-肽和空腹血糖的水平,并按其是否存在GADA、ICA进行分组分析.结果:在初诊为2型糖尿病的患者中GADA阳性率为20.95%,ICA阳性率为10.58%.病程≤5年抗体阳性组的胰岛β细胞功能与抗体阴性组有显著性差异(P＜0.05),病程＞5年抗体阳性组的胰岛β细胞功能与抗体阴性有显著性差异(P＜0.01),但病程≤5年的抗体阳性组与病程≤5年的抗体阳性组胰岛β细胞功能无显著差异.结论:①临床上初诊为2型糖尿病的患者有相当一部分可视为成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA);②GADA和ICA阳性检出率不齐同,联合检测可提高检出率;③GADA及ICA测定对糖尿病的正确分型、指导临床用药早期保护残存的β细胞功能及判断预后具有重要临床价值.