普通蜂胶及纳米蜂胶对临床常见细菌的体外抑制效应研究

目的：了解普通蜂胶及纳米蜂胶对临床常见细菌的体外抑制效应。方法：K-B法测定不同浓度的普通蜂胶或纳米蜂胶对肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、普通变形杆菌、大肠杆菌、肠球菌的抑菌作用。琼脂二倍稀释法测定普通蜂胶和纳米蜂胶对苯唑西林敏感金葡菌（MSSA）和耐药金葡菌（MRSA）的MIC。结果：普通蜂胶及纳米蜂胶对上述细菌的生长有一定的抑制作用，以对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强，且随着浓度的升高抑制作用增加。除肠球菌和铜绿假单胞菌外，纳米蜂胶体外对上述细菌的抑制作用强于普通蜂胶。普通蜂胶对MSSA和MRSA的MIC50和MIC90均为128μg·ml^-1和256μg·ml^-1；纳米蜂胶对MSSA和MRSA的MIC50和MIC90均为32μg·ml^-1和64μg·ml^-1。结论：蜂胶对多种细菌的生长有抑制作用，纳米蜂胶的抑菌作用强于普通蜂胶。但二者对金葡菌的抑菌作用均明显低于苯唑西林和万古霉素。     

PHA,抗CD3单抗,IL—2诱导脾细胞增殖及其抗肿瘤效应的实验研究

本文应用PHA、抗CD_3单抗、IL-2体外诱导正常人脾细胞增殖,并探讨了在不同条件的诱导下脾细胞体外增殖能力和抗肿瘤效应,以及细胞表面标志的表达特征.结果显示,抗CD_3单抗、PHA不仅可增强IL-2诱导脾细胞的增殖作用,且两者合用有协同增强效应.PHA、抗CD_3单抗还可增强体外扩增细胞CD_4和Tas受体的表达.LAK细胞抗肿瘤活性测定结果提示,PHA有直接和间接增强LAK细胞抗肿瘤效应的作用,抗CD_3单抗则可通过增加细胞增殖作用,间接地增强LAK细胞的抗肿瘤活性.     

EXPERIMENTAL STUDY ON ANTITUMOR EFFECT OF MONOCLONAL ANTI－IDIOTYPIC ANTIBODY－DNR CONJUGATE TO LEUKEMIA

ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬＳＴＵＤＹＯＮＡＮＴＩＴＵＭＯＲＥＦＦＥＣＴＯＦＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬＡＮＴＩ－ＩＤＩＯＴＹＰＩＣＡＮＴＩＢＯＤＹ－ＤＮＲＣＯＮＪＵＧＡＴＥＴＯＬＥＵＫＥＭＩＡ￥ＷａｎｇＸｉａｏｌｉｎ；王晓林；ＣａｏＸｉｆａｎｇ；曹熙芳；Ｚｈｕ...     

双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统的构建及体外效应研究

目的：构建高靶向性基因转移及表达系统，并研究其介导HSVtk/GCV自杀基因系统对肝癌细胞的体外杀伤作用。方法： 通过重组技术分别构建antiTfR ScFvGAL4融合蛋白表达载体ScFvGAL4pET28a及含AFP启动子、GAL4特异性识别序列（GAL4rec）的HSVtk真核表达载体pEBAF/tkGAL4rec。IPTG诱导后，利用受体介导内吞作用介导pEBAF/tkGAL4rec质粒转染表面均高表达TfR的人肿瘤细胞株HepG2，SMMC7721及A549。潮霉素筛选后，MTT法检测GCV对它们的杀伤作用。结果：双酶切鉴定、SDSPAGE电泳及测序分别证明antiTfR ScFvGAL4融合蛋白及重组pEBAF/tkGAL4rec真核表达质粒构建成功。体外杀伤实验中，高分泌AFP(845 ng/ml) 的HepG2/tk细胞对GCV很敏感，且抑制率与GCV浓度及作用时间呈正相关；而低分泌AFP(2 ng/ml)的SMMC7721/tk细胞对GCV低度敏感；不分泌AFP 的A549/tk细胞则不敏感。结论：双靶向组织特异性HSVtk/GCV抗瘤系统构建成功，并显示出很好的靶向性。     

补阳还五汤之临床应用

补阳还五汤出自《医林改错》,本方以补气为主,活血为辅,是治疗气虚血瘀的有效验方。现代医学研究此方能扩张脑血管,增加脑的血流量,改善脑的血液循环;改善微循环、血液的流变性;降低血液粘滞性;能抑制血小板凝集;溶解血栓或预防血栓再发;降低血脂;对抗和改善脑缺氧等。兹举验案于下。     

双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统构建及体外效应研究

目的 构建高靶向性基因转移及基因表达系统,并研究其介导HSV-tk/GCV自杀基因系统对人肝癌细胞的体外杀伤作用。 方法 通过重组DNA技术分别构建anti-TfR ScFv-GAL4融合蛋白表达载体ScFv-GAL4-pET28a及含AFP启动子、GAL4特异性识别序列(GAL4rec)的HSV-tk真核表达载体pEBAF/tk-GAL4rec。前者经IPTG诱导表达获取anti-TfR ScFv-GAL4融合蛋白作为非病毒转运载体,利用受体介导内吞作用介导pEBAF/tk-GAL4rec质粒转染表面均高表达TfR的人肝癌细胞株HepG2、SMMC7721及人肺癌细胞株A549,潮霉素筛选阳性细胞,扩大培养,分别命名为HepG2/tk、SMMC7721/tk及A549/tk,然后通过MTT法检测GCV对它们的杀伤作用。 结果 双酶切鉴定及SDS-PAGE电泳证明非病毒转移载体anti-TfR ScFv-GALA融合蛋白及重组pEBAF/tk-GAL4rec真核表达质粒构建成功。体外杀伤实验中,表面TfR阳性且高分泌AFP(845 ng/ml)的HepG2/tk细胞对GCV很敏感,且抑制率与GCV浓度及作用时间呈正相关;而低分泌AFP(2ng/ml)的SMMC7721/tk细胞对GCV低度敏感;表面TfR阳性但不分泌AFP的A549/tk细胞则对前药不敏感。 结论 双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统构建成功,并显示出很好的靶向性。     

TLR4基因多态性与疾病易感性的研究进展

Toll样受体是近年来发现的跨膜信号传递受体,作为一种重要的模式识别受体(PRRs)在多种疾病中起着重要的作用.基因多态性影响机体对疾病的遗传易感性.TLR4作为跨膜受体与多种疾病有着密切的联系,越来越多数据表明,TLRs单核苷酸多态性(SNPs)与多种疾病遗传易感性相关,本文就TLR4 SNPs与多种疾病的遗传易感性之间相关性进行综述.     

抗TfR-scFv-EGFP融合蛋白的构建与表达

目的:抗转铁蛋白受体单链抗体(TfR-scFv)-EGFP融合蛋白真核表达载体的构建与表达.方法:设计两对引物引入连接肽(Gly4Ser)3以及酶切位点HindⅢ和BamH Ⅰ,采用重叠延伸PCR扩增与构建具有前导肽的L-VH-Linker-VL单链抗体基因,亚克隆至pEGFP-N1,转染COS-7细胞,倒置相差荧光显微镜下观察荧光蛋白表达,流式细胞术(FCM)检测细胞分泌上清与乳腺癌细胞MCF-7及黑色素瘤细胞A375结合活性.结果:测序表明获得了正确的L-VH-Linker-VL单链抗体基因序列;亚克隆至pEGFP-N1后,表达载体转染COS-7细胞,经荧光显微镜观察转染细胞,及通过流式细胞术(FCM)检测细胞分泌上清,证实抗TfR-scFv-EGFP融合蛋白在转染细胞中分泌性表达,并能够与天然高表达TfR的细胞特异性结合.结论:抗TfR-scFv-EGFP融合蛋白真核表达载体构建成功,其表达产物具有与TfR阳性细胞结合的活性.     

抗慢性B淋巴细胞白血病患者血清IgM McAb的纯化及其酶结合物的制备

应用DEAE-22纤维素离子交换柱和正辛酸法从接种杂交瘤细胞BALB/C 鼠的腹水或腹腔肿瘤浸出液中纯化抗慢性淋巴细胞白血病(B-CLL)患者血清IgM 单克隆抗体(McAb),纯化物经巴比妥琼脂电泳,SDS-PAGE 鉴定为高纯度。ELISA 法证明具有高效价、高度特异性。采用过碘酸钠氧化结合法制备的辣根过氧化酶 HRPO-McAb 结合物的免疫活性、酶与蛋白质二者mol比、标记率均达到质量要求。