转化生长因子-β1的基因型及血清水平与2型糖尿病肾病的相关性研究

目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)基因多态性各等位基因及基因型在2型糖尿病肾病患者中的分布频率,初步分析其基因型及血清水平与2型糖尿病肾病的相关性.方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测183例2型糖尿病患者(其中91例伴糖尿病肾病) 及105名正常对照组TGF-β1的基因多态性,包括TGF-β1基因启动子-800G/A、-509C/T位点和第1号外显子+869T/C(Leu10Pro)及 +915G/C(Arg25Pro)位点,同时采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清TGF-β1水平.结果糖尿病肾病组血清TGF-β1水平显著高于糖尿病不伴肾病组和对照组(均P<0.01),TGF-β1基因-800G/A、-509C/T、+915G/C(Arg25Pro)位点多态性在糖尿病肾病组和正常人群中的分布差异无统计学意义(均P> 0.05),而TGF-β1+869T/C (Leu10Pro)基因多态性在两组人群中的分布差异存在统计学意义(均P< 0.05),等位基因频率的相对风险分析发现, C等位基因携带者患糖尿病肾病的风险是T等位基因的1.618倍(比值比 = 1.618,95 % CI;1.082～2.418),携带C等位基因的糖尿病肾病患者血清TGF-β1水平显著高于不携带者[(44.89±9.57)μg/L 比(37.48±8.64)μg/L P< 0.05]. 结论 TGF-β1基因+869T/C(Leu10Pro)多态性与糖尿病肾病的发病具有相关性,其中C等位基因可能是糖尿病肾病发病的遗传易感基因;携带C等位基因的个体可能通过促进TGF-β1的高度表达进而增加了糖尿病肾病的发病风险.     

季节因素对北京地区捐精志愿者精液质量的影响

目的: 探索和分析北京地区捐精志愿者的精液质量随季节的变化规律以及两者之间的相关性。方法: 应用回顾性研究方法,收集北京大学第三医院人类精子库捐精志愿者人群的精液数据,按照农历节气和捐精时间进行4个季节分组,比较不同季节分组之间精液参数的差异,分析变化规律以及季节因素对精液参数的影响。结果: 共纳入和分析21 174例精液常规检查数据。将全部数据整体分析,春、夏、秋、冬季组的精子浓度分别为(106.04±59.67)×10⁶/mL、(97.61±47.41)×10⁶/mL、(100.18±47.17)×10⁶/mL、(100.59±38.68)×10⁶/mL,春季组明显高于其他3个季节组(P＜0.001);前向运动精子百分率(progressive motility,PR)分别为56.49%±12.76%、58.02%±13.65%、58.05%±12.36%、57.66%±12.61%,春季组低于其他3个季节组,夏季组较好(P＜0.001);精子正常形态率4个季节组间差异没有统计学意义;冬季组的捐精志愿者合格率高于其他3个季节组(P＜0.01),而夏季组则低于其他3个季节组。将筛选期和正式捐精期志愿者的精液参数分别进行分析,均显示春季组的精子浓度高于夏季和冬季组,PR低于夏季和秋季组。基于正式捐精期精液参数,多元线性回归分析表明季节是影响精子浓度的主要因素,春季组的平均精子浓度比冬季组约高6×10⁶/mL,但春季组的PR比秋季组低2.9%(均P＜0.05)。结论: 季节是北京地区捐精志愿者精液质量的影响因素,推荐春冬两季适宜捐精志愿者积极捐献精子。     

新辅助化疗后胸腔镜肺叶切除治疗Ⅲ期非小细胞肺癌的疗效分析

目的 探讨新辅助化疗后胸腔镜肺叶切除治疗Ⅲ期非小细胞肺癌(NSCLC)的效果.方法 选取了60例NSCLC患者,按住院单双号分为2组.对照组(29例)单纯给予胸腔镜肺叶切除,观察组(31例)给予新辅助化疗后胸腔镜肺叶切除.通过观察并记录患者治疗后1年的疗效,外科手术治疗情况,3年内生存率及随访期间并发症发生情况,评价新辅助化疗后胸腔镜肺叶切除治疗Ⅲ期NSCLC的疗效.结果 经新辅助化疗后胸腔镜肺叶切除治疗1年后,观察组患者治疗的有效率明显高于对照组(P＜0.05).观察组手术切除率明显高于对照组(P＜0.05).2组在1年、3年生存率相比,差异没有统计学意义(P＞0.05).随访3年期间,2组患者总体并发症发生率相比,差异没有统计学意义(P＞0.05).结论 新辅助化疗后胸腔镜肺叶切除能显著提高治疗效果、手术切除率,且不增加并发症的发生,具备较好的临床应用价值.     

联合检测B72.3、癌胚抗原、神经特异性钙结合蛋白、血栓素在浆膜腔积液细胞学鉴别诊断中的价值

目的探讨B72．3、癌胚抗原、神经特异性钙结合蛋白、血栓素组合检测在浆膜腔积液中恶性问皮瘤和增生间皮细胞与腺癌鉴别诊断的价值。方法取123例浆膜腔积液，经活检或临床资料证实为转移腺癌89例、恶性间皮瘤8例、增生间皮细胞26例，井对细胞学标本做特殊处理后常规涂片，做1372．3、煽胚抗原、神经特异性钙结合蛋白、血栓素免疫细胞化学与苏木素-伊红（HE）染色分析。结果123例积液标本中，B72．3、癌胚抗原诊断腺癌的敏感性分别为80．1％、78．7％，特异性分别为97．1％、97．1％，B72．3、癌胚抗原组合检测诊断转移腺癌的敏感性为95．5％（85／89）；神经特异性钙结合蛋白、血栓索诊断间皮源性细胞敏感性分别为88．2％、79．4％，特异性分别为95．5％、91．0％，神经特异性钙结合蛋白、血栓素组合榆测诊断间皮源性细胞敏感性为94．1％（32／34），其中恶性间皮瘤为100％（8／8）。结论通过对浆膜腔积液细胞学标本的有效处理和制片技术的改进，选择B72．3、癌胚抗原、神经特异性钙结合蛋白、血栓素组合检测和细致的细胞形态学观察，可进一步提高浆膜腔积液中恶性间皮瘤与转移性腺煽的鉴别诊断。     

联合检测B72.3、癌胚抗原、神经特异性钙结合蛋白、血栓素在浆膜腔积液细胞学鉴别诊断中的价值

目的探讨B72.3、癌胚抗原、神经特异性钙结合蛋白、血栓素组合检测在浆膜腔积液中恶性间皮瘤和增生间皮细胞与腺癌鉴别诊断的价值。方法取123例浆膜腔积液,经活检或临床资料证实为转移腺癌89例、恶性间皮瘤8例、增生间皮细胞26例,并对细胞学标本做特殊处理后常规涂片,做B72.3、癌胚抗原、神经特异性钙结合蛋白、血栓素免疫细胞化学与苏木素-伊红(HE)染色分析。结果123例积液标本中,B72.3、癌胚抗原诊断腺癌的敏感性分别为80.1%、78.7%,特异性分别为97.1%、97.1%,B72.3、癌胚抗原组合检测诊断转移腺癌的敏感性为95.5%(85/89);神经特异性钙结合蛋白、血栓素诊断间皮源性细胞敏感性分别为88.2%、79.4%,特异性分别为95.5%、91.0%,神经特异性钙结合蛋白、血栓素组合检测诊断间皮源性细胞敏感性为94.1%(32/34),其中恶性间皮瘤为100%(8/8)。结论通过对浆膜腔积液细胞学标本的有效处理和制片技术的改进,选择B72.3、癌胚抗原、神经特异性钙结合蛋白、血栓素组合检测和细致的细胞形态学观察,可进一步提高浆膜腔积液中恶性间皮瘤与转移性腺癌的鉴别诊断。     

不同剂量左旋多巴对偏侧帕金森病大鼠行为学及多巴胺D2受体表达数的影响

目的：研究不同剂量左旋多巴对偏侧帕金森病大鼠行为学及多巴胺D₂受体表达数的影响，并对其相应机制进行探讨。方法：采用6-羟多巴胺（6-OHDA）制备偏侧PD大鼠模型，用免疫组化染色法检测PD模型大鼠分别给予左旋多巴不同剂量（10 mg·kg^-1·d^-1,50 mg·kg^-1·d^-1，100 mg·kg^-1·d^-1）腹腔注射15 d前后纹状体部位的多巴胺D₂受体表达数、观察大鼠行为学改变。结果：成功PD模型大鼠30 min旋转圈数与损毁侧及其健侧的D₂受体表达数增加百分数呈线性相关（r=0.927，P<0.01），大剂量左旋多巴干预后PD大鼠的旋转圈数明显少于对照组（P<0.05），且损毁侧纹状体多巴胺D₂受体表达数明显少于对照组（P<0.01）。结论：大剂量左旋多巴干预能明显改善PD大鼠的旋转行为，并使纹状体多巴胺D₂受体明显下调。     

微 RNA-130a靶向人类 RUNT相关转录因子 3对肺癌 A549细胞增殖和转移的影响

目的 探讨微RNA(miR)-130a与人类RUNT相关转录因子3(RUNX3)的靶向关系及其对非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化的影响.方法 将体外培养的A549细胞分为对照组(未处理)、anti-miR-NC组(转染miR-130a inhibi?tor阴性对照)、anti-miR-130a组(转染miR-130a inhibitor)、anti-miR-130a+siNC组(转染miR-130a inhibitor和NC-siRNA)和anti-miR-130a+siRUNX3组(转染miR-130a inhibitor和RUNX3-siRNA),采用实时定量PCR检测各组细胞中miR-130a和RUNX3mRNA的表达水平,蛋白质印迹法(Western Blot)检测各组细胞中RUNX3蛋白和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测各组细胞增殖能力,克隆形成实验检测各组细胞的克隆形成能力,Transwell小室实验检测各组细胞侵袭与迁移能力,荧光素酶实验检测miR-130a和RUNX3的靶向关系.结果 荧光素酶实验证实,RUNX3是miR-130a的潜在靶基因.与anti-miR-NC组相比,下调miR-130a可抑制A549细胞增殖[(94.72±6.05)％比(51.28±3.24)％]、克隆[(36.15±2.06)％比(15.46±1.25)％]、侵袭[(90.25±5.48)个比(42.18±3.26)个]、迁移[(118.55±9.86)个比(73.48±6.75)个](P<0.05),促进E-cadherin蛋白表达[(0.26±0.03)比(0.48±0.04)](P<0.05),而抑制N-cadherin、Vimentin蛋白表达[(0.52±0.03)比(0.25±0.02);(0.68±0.05)比(0.35±0.03)](P<0.05);与anti-miR-130a+siNC组相比,共转染anti-miR-130a与siRUNX3可成功增强A549细胞增殖[(52.16±3.12)％比(72.23±6.13)％]、克隆[(16.08±1.05)％比(22.12±1.34)％]、侵袭[(41.59±3.02)个比(68.32±4.26)个]、迁移能力[(72.26±5.18)个比(98.25±6.02)个](P<0.05),抑制E-cad?herin蛋白表达[(0.52±0.04)比(0.33±0.03)](P<0.05),而促进N-cadherin、Vimentin蛋白表达[(0.27±0.03)比(0.46±0.03);(0.33±0.02)比(0.53±0.04)](P<0.05).结论 miR-130a可通过靶向RUNX3抑制A549细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转移.     

CRP、WBC及红细胞沉降率在老年肺部感染中的临床价值

目的观察C反应蛋白（CRP）、白细胞（WBC）、中性粒细胞百分数（N）及红细胞沉降率（ESR）在老年肺部感染中的临床应用价值。方法通过检测90例老年肺部感染患者治疗前和治疗后CRP、ESR、WBC、N及痰培养,并进行统计学分析。结果治疗前肺部感染患者CRP水平显著高于8mg／L,阳性率达100％,治疗后显著降低,差异有统计学意义（P〈0．01）,且CRP的阳性率明显高于ESR、WBC、N和痰培养,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论WBC、N、ESR、痰培养在诊断和治疗老年肺部感染患者中作用有限,而CRP可作为诊断肺部感染和观察疗效的敏感指标。     

戊四氮致惊厥大鼠海马神经元Cyclin D_1表达改变和意义

目的　探讨戊四氮致惊厥大鼠海马细胞周期素 Cyclin D1 与神经细胞凋亡的关系。方法　利用寡核苷酸探针原位组织杂交技术观察各组海马 Cyclin D1 m RNA的表达水平 ,同时采用 TUNEL原位末端标记方法观察神经元凋亡。结果　戊四氮致惊厥后 6 h,大鼠海马内 Cyclin D1 m RNA表达开始增强 ,12 h达到高峰 ,2 4h开始回落。同时 ,观察到戊四氮致惊厥大鼠海马神经元凋亡数量有类似改变。结论　 Cyclin D1 m RNA表达水平的增高可能表明戊四氮致惊厥大鼠海马神经元重新进入细胞周期 ,可能与神经细胞凋亡有关。     

Antisense GAD67ODN对戊四氮所致慢性癫痫大鼠的作用

目的 :探讨谷氨酸脱羧酶 (GAD)的抗癫疒间作用。方法 :采用戊四氮制备大鼠慢性癫疒间 模型 ,利用反义寡脱氧核苷酸技术 ,通过选择性地抑制海马GAD基因的表达来观察其对慢性癫疒间大鼠行为、发作阈值及脑电图的影响。结果 :给予AntisenseGAD67ODN处理后 ,GADmRNA表达下降、GABA浓度下降、疒间 性发作潜伏期缩短、发作程度加重及脑电图疒间 波频率增加。结论 :从反面进一步说明GAD基因可能是抗疒间基因 ,为GAD基因治疗癫疒间提供实验依据