衢州市无偿献血者中隐匿性HBV感染的基因型别及突变类型分析

目的 了解衢州市无偿献血者隐匿性乙肝病毒感染情况及病毒的分子生物学特征.方法 对衢州市中心血站24 178例无偿献血者血液用北京万泰和Sorin公司生产的ELlSA试剂盒进行HBV的初检和复检,对HBsAg阴性标本进行HBV DNA检测,从而检出隐匿性乙肝病毒感染者,再对HBV DNA 阳性标本进行 S 基因片段序列分析和氨基酸突变分析,从而了解本市无偿献血者隐匿性乙肝病毒感染情况和病毒分子生物学特征,探讨隐匿性乙肝病毒感染的可能机制.结果 24 178例无偿献血者标本中,158例HBsAg阳性,24 020例HBsAg阴性标本中,15例HBV DNA阳性,隐匿性HBV感染比例为0.62‰（15/24 020）,其中基因C型9例（60％）,基因B型6例（40％）;S基因“a”表位氨基酸突变分析显示有11例隐匿性HBV感染病毒株在“a”表位发生突变.结论 衢州市无偿献血者中存在一定比例隐匿性乙肝病毒感染,隐匿性乙肝病毒感染与病毒基因突变有相关性.     

糖尿病患者烫伤28例治疗体会

生活中烫伤较常见,糖尿病患者血糖水平高、末梢血液循环差,烫伤后伤口不易愈合,容易感染.2004年4月-2009年7月,我们采用庆大霉素、山莨菪碱、胰岛素混合液治疗糖尿病患者烫伤28例,疗效满意.现分析报告如下.     

血液病房医院感染的发生及处理

目的血液病房作为医院感染发生的高危场所,必须加强医院感染的管理,预防和控制感染的发生。方法找出易感危险因素,采取积极、有效的措施,做好医院感染的各项监测,强化医院感染意识。结果通过规范化管理及有效措施,降低血液病房的医院感染发生率,以达到卫生部的要求。结论要控制医院感染情况,降低医院感染率,首先要进行原发病的治疗。同时,必须通过有效的措施实行保护性隔离制度,严格执行消毒隔离制度,严格执行无菌技术操作的原则,指导不同患者加强营养,纠正贫血,尽量缩短住院时间,防止外源性感染,认真做好基础工作,保护易感人群。以科学监测为依据,以感染管理为手段,是控制医院感染的关键。     

肌钙蛋白T在慢性心力衰竭患者危险分层中的价值

目的 探讨血浆心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)在慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)危险分层中的价值和对近期预后的影响.方法 86例入院治疗的CHF患者(NYHA Ⅱ～Ⅳ级)和64例健康体检者,测定血浆cTnT,超声心动图等检测.经规范化治疗,随访3个月,观察的终点是心血管事件(心源性死亡及心力衰竭恶化再住院).结果 cTnT对CHF的诊断价值以ROC曲线下面积表示,为0.901(95%可信限:0.819～0.983).根据ROC曲线,以诊断CHF的敏感度与特异度之和的最高值作为截断值,cTnT的截断值为0.01ng/m1.以此值将CHF患者分为2组:A组40例(cTnT＜0.01ng/ml)、B组46例(cTnT≥0.01ng/m1).随访结束,失访2例(A、B组各1例).发生心血管事件29例:心源性死亡6例(A组2例,B组4例),心力衰竭恶化再住院23例(A组8例、B组15例).结论 检测血浆cTnT浓度可对CHF患者进行危险分层和短期预后的判定.     

rTpNl7和rTpN47及其融合蛋白酶联免疫吸附试验检测梅毒血清标本的效果

目的构建梅毒螺旋体tpnl7、tpn47基因及tpnl7-tpn47融合基因原核表达系统，建立基于rTpNl7、rTpN47和rTpNl7-TpN47的ELISAs并对其用于梅毒血清学诊断的敏感性和特异性进行评价。方法采用常规分子生物学方法扩增并克隆梅毒螺旋体tpnl7和tpn47基因，以连接引物PCR构建tpnl7-tpn47人工融合基因，建立上述目的基因原核表达系统。采用SDS-PAGE检测目的重组蛋白rTpNl7、rTpN47和rTpNl7-TpN47表达情况，Ni-NTA亲和层析法提纯上述目的重组蛋白，Western blot检测其免疫性。分别以rTpNl7、rTpN47和rTpNl7-TpN47为包被抗原，建立相应ELISAs检测健康人群、类风湿关节炎（RA）和系统性红斑狼疮（SLE）患者及梅毒患者血清标本中梅毒抗体并与现行TRUST和TPHA进行比较。结果克隆的tpnl7、tpn47基因及构建的tpnl7-tpn47融合基因与GenBank中相关序列相似性为100％。rTpNl7、rTpN47和rTpNl7-TpN47表达量分别为细菌总蛋白的37．2％、23．3％和29．8％，其提纯物电泳后均显示单一条带，并均能与梅毒抗体阳性血清发生明显的结合反应。rTpNl7-ELISA、rTpN47．ELISA和rTpNl7-TpN47-ELISA对所有健康人血清、RA和SLE患者血清标本的检测结果均为阴性，对梅毒患者血清标本检测阳性率分别为84．4％、82．3％和98．1％，其中rTpNl7-ELISA和rTpN47-ELISA检测阳性率低于TPHA（P〈0．01），rTpNl7-TpN47-ELISA检测阳性率相似（P〉0．05），但均高于TRUST（71．4％）。结论研究中建立的rTpNl7-ELISA、rTpN47-ELISA，尤其是rTpNl7-TpN47-ELISA，有望成为快速、简便、安全的梅毒患者血清学筛查方法。     

肺炎链球菌ciaH/R基因重组表达及CiaH/R与β-内酰胺类耐药相关性

目的：构建肺炎链球菌ciaH和ciaR基因的原核表达系统，探讨ciaH和CiaR封闭后细菌耐药性变化。方法：采用PCR扩增全长ciaH和ciaR基因，以常规基因工程技术建立其原核表达系统。采用SDS—PAGE及Bio—Rad凝胶图象分析系统检测目的重组蛋白rCiaH和rCiaR表达量。制备rCiaH和rCiaR兔抗血清及其IgG。检测IgG胞外或胞内封闭肺炎链球菌菌株CiaH和CiaR后，细菌对青霉素和头孢噻肟耐药性的变化。结果：与报道序列比较，所克隆的ciaH和ciaR基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为99．9％～100％和100%。所构建的工程菌E．coli BL21DE3^pET42A-ciaH和E．coli BL21DE3^pET42a-ciaR能高效表达目的重组蛋白rCiaH和rCiaR，其产量分别高达细菌总蛋白的33％和45％。rCiaH、rCiaR抗血清及其IgG免疫双扩散效价分别为1：4、1：4和1：1、1：1。CiaH—IgG胞外或胞内封闭CiaH、CiaR—IgG胞内封闭CiaR后，青霉素及头孢噻肟敏感菌株可出现对两种抗生素的耐药性，但对耐药菌株耐药性无明显影响。结论：成功地构建了肺炎链球菌ciaH／ciaR基因原核表达系统，为深入研究该TCS与耐药性关系奠定了基础。CiaH和CiaR均与肺炎链球菌对青霉素及头孢噻肟耐药性有关。     

临证忌望文断章

中医理论乃众医临证经验之总结，它反过来又指导于临证实践，在临证实践中不断得以验证并逐步提高。在临证中，对医理万勿断章取义，否则便会迷途而延误治疗。现试举临证1例而议之，以飨同道。     

3种G-CSF动员224例外周血干细胞效果比较

目的比较3种粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对外周血干细胞的动员效果。方法我科自体外周血干细胞移植病人224例,采用3种粒细胞集落刺激因子(吉赛欣、欣粒生、惠尔血)进行外周血干细胞动员,对干细胞动员情况、干细胞质量、移植后造血重建和药物毒副作用进行比较。结果224例病人全部移植成功,其动员效果、干细胞质量及在移植后造血重建中的临床效果差异均无显著性,毒副作用小。结论吉赛欣和欣粒生两种国产制剂及惠尔血能可靠用于外周血干细胞动员及造血重建,尤其是国产制剂的价格明显低于进口产品,在有效保证动员效果的同时大大减轻了病员的经济负担,值得临床应用推广。     

内耳神经节细胞的成熟:截面积形态测定分析

小鼠耳蜗与前庭功能发生和成熟过程在出生后完成。本研究应用截面积形态测定法分析胚胎16和19天、出生时、生后4、6、10、12、22和28天的 CBA/CBA 小鼠内耳神经节细胞变化。主要观察结果:(1)胚胎期和出生后,耳蜗、前庭神经极短,前庭和耳蜗神经节在胚胎期开始发育,神经纤维直接发芽先于神     

离体鼠位听神经节在器官培养期的分化缺陷

一些研究者认为,中胚层和上皮组织的相互作用对内耳形态发生至关重要。本文观察了与脑干或听泡上皮组织均无联系的离体位听神经节在器官培养期的发育情况。选用 CBA/CBA小鼠,妊娠第12天处死,取出听泡及位听神经节,置入器官培养器,35±0.2℃下孵育4