大蒜素对人横纹肌肉瘤RD细胞的作用及其机制

目的：探讨大蒜素（ allicin）对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖和凋亡的作用及其相关机制。方法应用不同浓度大蒜素（5,10,20,30μg/ml）作用人横纹肌肉瘤RD细胞株24h,采用MTT比色法检测不同浓度大蒜素下RD细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测不同浓度大蒜素作用后RD细胞的凋亡率。结果 MTT比色法检测各实验组增殖抑制率分别为（25.82±1.75）%、（31.04±1.61）%、（36.32±1.61）%、（42.58±3.88）%;流式细胞仪检测对照组及各实验组凋亡率分别为（5.23±0.80）%、（7.07±0.83）%、（10.60±2.51）%、（15.70±1.79）%、（19.33±0.72）%。以上检测各组间比较差异均有统计学意义（ P<0.05）。结论大蒜素能有效抑制RD细胞的增殖,诱导其凋亡。     

鼻咽癌细胞中大蒜素抑制MAPK信号通路的作用机制研究

目的:探讨大蒜素导致鼻咽癌细胞G1/S期阻滞的分子机制。方法:采用MTT法测定细胞增殖活性;激酶活性分析测定MAPK激酶的活性;报道基因分析检测转录因子AP-1的转录活性;Western blot法检测细胞周期蛋白CyclinD1的表达水平。结果:大蒜素呈浓度依赖性抑制鼻咽癌细胞增殖,细胞的存活率从100%降为52.8%(50μg/mL),P=0.0068;检测50μg/mL大蒜素处理时MAPK激酶的活性,发现其活性仅为未处理组的42.92%,说明大蒜素抑制了MAPK激酶活性;基因分析显示在大蒜素作用下,转录因子AP-1的转录活性也呈浓度依赖性的降低,从6.3×103U降低到3.8×103U(50μg/mL),P=0.0089,受AP-1调节的G1/S期调节蛋白CyclinD1的相对表达水平也从100%下降为32.2%。结论:大蒜素通过抑制MAPK信号通路而抑制转录因子AP-1的活性,从而下调CyclinD1表达,导致细胞G1/S期阻滞。     

大蒜素穴位注射治疗变应性鼻炎的实验研究

目的:探讨大蒜素穴位注射对变应性鼻炎大鼠相关指标的影响及其作用机理。方法:将36只SD大鼠造模成功后,随机分为大蒜素穴位注射组、大蒜素肌肉注射组、生理盐水穴位注射组、模型组,分别给予相应治疗,观察相关指标并进行分析。结果:大蒜素穴位注射组症状积分、鼻腔分泌物涂片和鼻黏膜切片嗜酸性粒细胞(EOS)计数较其它3组均明显下降(P<0.01),显效率为66.7%,总有效率为100%,较其它3组疗效显著(P<0.01)。结论:大蒜素穴位注射可以减少变应性鼻炎大鼠鼻腔分泌物、鼻黏膜中EOS的含量,改善临床症状,达到治疗变应性鼻炎的目的。     

大蒜素片对缺血性心脏病患者血浆GMP—140、TXB_2、6—K—PGF_(1α)、NO及血液流变学的影响

大蒜素片治疗组41例和消心痛治疗组26例冠心病心绞痛患者,比较其疗效,并观察治疗前后患者血浆GMP—140、TXB_2、NO及血液流变学等指标的变化。结果:大蒜素片对冠心病心绞痛的总有效率为85.4％,与消心痛基本相同,同时大蒜素片能明显降低患者血浆GMP—140、TXB_2的水平,升高患者血浆NO水平,并能显著改善患者的血液流变性。提示大蒜素片治疗冠心病心绞痛具有良好的疗效,其作用机理可能是抑制血小板活化,阻止血栓形成,扩张冠状动脉及外周血管,改善患者的血液流变性等。     

大蒜辣素前体包芯片的制备

目的:制备大蒜辣素前体包芯片,使其口服后在短时间内促发酶促反应,生成大蒜辣素。方法:以蒜氨酸和蒜酶双层片为片芯,控酸颗粒为外层压制得到包芯片。并以人工胃液为介质小杯法考察包芯片大蒜辣素产率。结果:大蒜辣素前体包芯片在人工胃液中10 min内大蒜辣素产率>70%。结论:以蒜氨酸、蒜酶及控酸盐组合制备包芯片能够有效避免蒜酶在胃酸条件下失活,达到在体内获得较高产率大蒜辣素目的。     

大蒜质量标准中商榷内容的研究

目的:参照美国药典、欧盟药典和英国药典对2010版中国药典收载的大蒜薄层鉴别和含量测定等进行研究。方法:采用微波灭酶法处理样品,对大蒜药材进行薄层色谱鉴别;采用阳离子交换色谱柱,以磷酸盐缓冲溶液为流动相,流速0.5 mL.min-1,检测波长214 nm,测定大蒜药材中蒜氨酸含量。结果:不同产地大蒜药材的薄层色谱在与蒜氨酸和精氨酸对照品斑点Rf值相同的位置上,均检出相同的斑点。建立的蒜氨酸含量测定HPLC法,经方法学实验表明,蒜氨酸浓度在31.2～374.4μg.mL-1范围内呈良好线性关系(r=0.9999);低、中、高浓度平均回收率(n=9)分别为102.8%(RSD=4.0%),101.8%(RSD=3.0%),111.0%(RSD=3.8%)。结论:本研究建立了大蒜药材的薄层色谱鉴别和高效液相色谱含量测定方法,可用于大蒜药材的定性与定量分析,建议作为大蒜质量标准进一步研究的参考。     

大蒜素对全脑缺血再灌注损伤大鼠海马凋亡相关蛋白表达的影响

目的观察大蒜素对全脑缺血再灌注损伤大鼠海马凋亡相关蛋白表达的影响,进一步探讨大蒜素的脑保护机制。方法雄性Wistar大鼠30只,随机分为5组:假手术组(Sham组);缺血再灌注组(IR组);缺血再灌注+大蒜素10 mg/kg(All-10 mg)、20 mg/kg(All-20 mg)、30 mg/kg(All-30 mg)组,夹闭两侧颈总动脉8 min再灌注24 h建立大鼠全脑缺血再灌注模型,取海马组织硫堇染色观察海马组织学改变及存活神经元密度;免疫组织化学染色测定海马CA1区Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果与Sham组相比,IR组海马CA1区神经元密度明显降低,Bax蛋白表达明显增加(均P0.05);与IR组相比,大蒜素处理各组海马CA1区神经元密度明显增多,Bcl-2蛋白表达明显增加,Bax蛋白表达明显减少,其中以All-20 mg组变化最显著(均P0.05)。结论大蒜素可以通过影响凋亡相关蛋白的表达而抑制细胞凋亡,从而发挥脑保护作用。     

大蒜素上调TRAIL表达诱导宫颈癌细胞凋亡机制研究

目的观察大蒜素对人宫颈癌Hela、Caski细胞的生长抑制作用,大蒜素作用前后TRAIL及其受体DR4、DR5的表达以及Caspase-3、8、9活性变化,探讨大蒜素诱导宫颈癌细胞凋亡作用及其机制。方法 (1)2009-2010年于河北医科大学第二医院,体外培养Hela、Caski细胞,MTT法检测不同浓度大蒜素对细胞的生长抑制作用。(2)RT-PCR方法检测大蒜素对细胞TRAILmRNA表达的影响。(3)流式细胞仪检测大蒜素作用前后细胞TRAIL及其受体DR4、DR5的表达。(4)检测大蒜素对HeLa、Caski细胞Caspase-3、8、9活性的影响。结果 (1)大蒜素对细胞有不同程度的生长抑制作用,随着药物浓度的增加以及作用时间的延长,细胞毒作用逐渐增强。(2)大蒜素处理细胞12h后TRAILmRNA表达水平明显升高,实验组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。(3)大蒜素处理细胞24h后TRAIL蛋白表达水平上调。(4)大蒜素作用48h后,两种细胞半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、8、9的活性明显增强。结论大蒜素对Hela和Caski细胞具有生长抑制作用;上调TRAIL表达,进而活化Cas...     

大蒜素对宫颈癌细胞生长的影响及作用机制

目的探讨大蒜素对体外培养的人宫颈腺癌Hela、鳞癌Cask i细胞半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、8、9的表达和活性变化对宫颈癌细胞生长的影响及其作用机制。方法2008年1月至2009年1月在河北医科大学附属第二医院通过体外培养的人宫颈腺癌Hela、鳞癌Cask i细胞,MTT法检测大蒜素作用后细胞的生长抑制率,分光光度法和RT-PCR方法分别检测大蒜素对细胞Caspase-3、8、9活性和表达的影响。结果用6.25、12.5、25、50、75、100mg/L的大蒜素处理Hela、Cask i细胞24、48、72h后,随着药物浓度和作用时间的增加,抑制率增高。分光光度法检测大蒜素作用48h后,Hela细胞Caspase-3、8、9活性的OD实验组/OD对照组分别是对照组的2.32、2.26、1.53倍;Cask i细胞是对照组的2.28、1.69、2.08倍(P<0.05)。RT-PCR法检测大蒜素作用12h后,Caspase-3、8、9mRNA基因扩增产物与β-actin基因扩增产物电泳带的吸光度比值明显升高,Hela细胞为对照组的1.92、1.47、1.57倍,Cask i细胞为对照组的1.87、1...