用固定化啤酒酵母细胞合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱

κ－卡拉胶－魔芋多糖复配胶包埋的啤酒酵母细胞，经冻融处理后用于合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱（CDP－胆碱）。结果表明：250mL摇瓶中加入50mL反应液（葡萄糖400mol/L，CMP10mmol/L，磷酸碍碱50mmol/L,K2HPO4-KH2PO4缓冲液100mmol/L，MgSO410mmol/L,pH=8.0），固定化细胞1200g/L,34℃、150r/min下，反应4h后补加400mmol/L葡萄糖，反应8h可使60％以上的CMP转化为CDP－胆碱。反应液经灭菌和添加辅酶I（NAD^ ）后，固定化细胞可连续使用4次，CDP－胆碱转化率维持在40％以上。     

μ—硒化卡拉胶与亚硒酸钠在兔的吸收与分布比较

给兔灌胃Ｋａｐｐａ－硒化卡拉胶３８ｍｇ．ｋｇ＾－１和亚酸钠１ｍｇ．ｋｇ＾－１，结果显示μ－ＳｅＣ组血Ｓｅ水平的ＡＵＣ０－７２ｈ为１２．８９±３．１３ｍｇ．Ｌ＾－１．ｈ，显著高于亚硒酸钠组的８．６６±１．２０ｍｇ．Ｌ＾－１．ｈ（Ｐ＜０．０５）；μ－ＳｅＣ和亚硒酸钠组的Ｃｍａｘ分别为０．５５６±０．０８６ｍｇ．Ｌ＾－１和０．４９３±０．０９１Ｓｅｍｇ．Ｌ＾－１（ｐ＞０．０５），Ｔｍａｘ分别为４．６５±     

硒化卡拉胶胶囊在兔体的生物利用度

用荧光分光光度法测定硒化卡拉胶（硒宝康）胶囊在兔体内的生物利用度。结果，血Ｓｅ达峰（ｔｍａｘ）５．０５ｈ，最大峰浓度（ｃｍａｘ）１１５．２９μｇ／Ｌ，药时曲线下面积９ＡＵＣ）１６４８．７９μｇ．Ｌ＾－１，ｈ。结论：硒宝康胶囊的生物利用度较亚硒酸钠胶囊大，两种含硒药物间有显著差异（Ｐ＜０．０５），前者维持时间也较长，是一于亚硒酸钠胶囊的补硒制剂。     

红藻多糖卡拉胶分子修饰研究I．酸降解

本文采用酸水解法对红藻多糖κ—卡拉胶进行降解，经超通分级，凝胶柱层折分离，获得8个卡拉胶低聚糖及寡糖组分；用高效凝胶渗透色语法(HPGPC)测得的平均相对分子质量Mw在1，750～11，500之间(平均聚合度DP4～28)。用光谱分折方法(1R，^1H—NMR，和^13C—NMR)测定了结构，并对理化性质进行了分折。     

壳聚糖-明胶-卡拉胶支架复合人牙龈成纤维细胞的体外研究

目的:研究人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast cells,HGFs)在壳聚糖-明胶、壳聚糖-明胶-卡拉胶两种支架材料上生长增殖及某些细胞外基质分泌的情况,为研究组织工程化牙龈支架材料提供实验依据。方法:组织块法培养HGFs,将第4代的HGFs分别接种于两种支架材料上,以壳聚糖-明胶-卡拉胶为实验组,壳聚糖-明胶作为对照组。扫描电镜(SEM)观察两种支架材料的结构;四唑盐比色实验(MTT)法检测HGFs在两种支架材料上的增殖情况;通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞-支架复合培养液中I型胶原蛋白(Collagen I,Col I)和糖胺多糖(Glycosamlnoglycans,GAG)的含量。结果:扫描电镜显示两种支架材料均呈多孔结构,孔径50～200μm,孔隙率达90%。MTT法检测显示:培养1 d实验组与对照组吸光值(A值)差异无统计学意义(P>0.05);第3、5、7天时实验组A值明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA结果显示,培养1 d实验组Col I和GAG的含量与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);第3、5、7天各时间点,实验组Col I和GAG的含量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HGFs与壳聚糖-明胶-卡拉胶支架复合后,其生物学行为更为活跃,壳聚糖-明胶-卡拉胶支架比壳聚糖-明胶支架更适合作为组织工程化牙龈的生物支架材料。     

λ-卡拉胶寡糖体外对血管生成的抑制作用

为探讨λ-卡拉胶寡糖体外对血管生成的抑制作用,采用鸡胚尿囊膜模型(CAM)观察λ-卡拉胶寡糖对CAM血管发育的抑制,发现该寡糖可明显抑制CAM微血管生成,在200 μg·egg-1时,抑制率达54.90%.随后采用MTT法测定λ-卡拉胶寡糖对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响,发现该寡糖的细胞毒作用在不同的细胞间具有选择性,对HUVEC的抑制最强,高浓度时(1 mg·mL-1)能明显抑制其增殖,但低浓度(＜250 μg·mL-1)对细胞几乎无毒.对寡糖的细胞迁移和侵袭抑制作用进行检测,并测定其对HUVEC表达基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的影响.结果表明,λ-卡拉胶寡糖能有效减缓HUVEC的迁移、侵袭能力,并具有抑制HUVEC中MMP-2表达的作用.该研究说明λ-卡拉胶寡糖通过抑制内皮细胞的增殖、细胞侵袭和迁移达到血管生成抑制的作用.     

Χ－硒化卡拉胶对小鼠空间分辨学习的影响

用Ｙ型迷宫箱测试小鼠空间分辨能力，结果：ｐｏ　－硒化卡拉胶（　－ｓｅｌｅｎｏｃａｒｒａｇｅｅ－ｎａｎ，　－ＳｅＣ）１８０ｍｇ／ｋｇ及１０８ｍｇ／ｋｇ（ｑｄ×１４ｄ）能增强正常小鼠的学习能力，提高学习成绩；ｐｏ　－ＳｅＣ１８０、１０８及６４ｍｇ／ｋｇ（ｑｄ×１４）对东莨菪碱（ｉｐ４ｍｇ／ｋｇ）所致小鼠学习障碍均有拮抗作用；ｐｏ　－ＳｅＣ１８０ｍｇ／ｋｇ（ｑｄ×１４）对东莨菪碱（ｉｐ５ｍｇ／ｋｇ）所致小鼠记忆保持障碍有改善作用。以上表明　－ＳｅＣ对脑的学习功能有促进作用，并能拮抗药物引起的学习与记忆功能的损害，改善大脑功能．     

固定化啤酒酵母细胞合成5’-三磷酸腺苷

用K-卡拉胶包埋啤酒酵母制成固定化细胞,在0.05mol/L葡萄糖,0.022mol/L腺苷酸,0.012mol/LMgSO_4·7H_2O,0.2mol/L氯化钾,0.2mol/L磷酸钾缓冲溶液(pH7.0)中,35℃反应4小时,5′-三磷酸腺苷转化率可达42%,在50ml三角烧瓶中分批反应,连续使用5次,5′-三磷酸腺苷转化率仍维持在37%以上。     

兔血管内皮细胞和诱导成骨细胞在可注射纳米材料上的共培养

目的：将可注射纳米骨材料与共培养的兔肾血管内皮细胞和兔骨髓间充质干细胞诱导的成骨细胞复合,并构建可注射细胞型纳米组织工程骨,观察它们体外培养的相容性. 方法：实验于2003-09/2004-11在苏州大学附属儿童医院完成.①实验材料：取16周龄雄性新西兰大耳白兔,体质量1.5 kg左右.②实验方法：麻醉后抽取兔骨髓,用淋巴细胞分离液分离出其中的间充质干细胞,在含体积分数为0.15牛血清的RPMI1640液中培养.骨髓间充质干细胞在条件培养基中,7 d后可见细胞变为多边形,碱性磷酸酶和Ⅰ型胶原染色阳性,形成钙结节,表现成骨细胞分化特点.采用三步梯度筛网法,获得肾血管球,5 g/L胶原酶Ⅳ37℃消化15～20 min,离心沉淀获取血管内皮细胞,在含体积分数为0.15小牛血清的M199中培养.③实验评估：免疫组织化学法进行第Ⅷ因子相关抗原鉴定,透射电镜观察细胞浆Weibel-Palade小体,间接免疫荧光法检测CD31、CD34及CD44的表达.将共培养的兔肾血管内皮细胞、成骨细胞与可注射纳米骨材料体外复合培养,进行形态学观察和功能测定. 结果：①在一定培养条件下成功诱导兔骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化.②培养的血管内皮细胞免疫组织化学法检测第Ⅷ因子相关抗原阳性,透射电镜观察到细胞浆中的Weibel-Palade小体,间接免疫荧光法检测CD31、CD34表达阳性,CD44阴性.③共培养的兔肾血管内皮细胞、成骨细胞在可注射纳米骨材料上生长、增殖良好,细胞活性和碱性磷酸酶活性未受到影响. 结论：可注射纳米骨材料具有良好的细胞相容性,可作为骨组织工程理想的可注射载体材料.     

卡拉胶抗病毒作用机制研究进展

国内外的大量研究表明,卡拉胶具有广泛的抗病毒活性,但是对于不同病毒其抑制作用机制有差异。笔者就国内外对于卡拉胶抗病毒作用机制的研究进展作一综述,系统总结卡拉胶是如何在分子水平上阻断或干扰不同病毒的复制周期,以期能对抗病毒多糖药物的研发提供参考。