K1和K2血清型肺炎克雷伯菌耐药性与可移动遗传元件研究

目的分析K1型肺炎克雷伯菌和K2型肺炎克雷伯菌的耐药基因和可移动遗传元件的分布。方法收集南昌大学第一附属医院2015年1月-2017年12月分离735株非重复肺炎克雷伯菌作为实验菌株,筛选出63株K1型肺炎克雷伯菌和29株K2型肺炎克雷伯菌,进行药物敏感性分析,PCR检测13种耐药基因和13种可移动遗传元件标记。结果 K1、K2血清型肺炎克雷伯菌对头孢唑林和头孢曲松耐药率较高,>20%,对其他抗菌药物都表现较高的敏感性,但出现耐碳青霉烯类药物的肺炎克雷伯菌;K1、K2血清型肺炎克雷伯菌acc6-Ib-cr和qnrS携带率较高,对其他耐药基因的携带率较低,但出现2株K1型和2株K2型携带KPC基因;除厄他培南和SHV基因外,K1型和K2型肺炎克雷伯菌对其它抗菌药物的耐药率和耐药基因的携带率差异无统计学意义,但K1型肺炎克雷伯菌对大部分抗菌药物的耐药率和耐药基因的携带率均低于K2型肺炎克雷伯菌;可移动遗传元件检出1种接合性质粒标记基因,1种整合子标记基因,4种插入序列标记基因,以traC基因和intI1基因阳性率最高。结论 K1、K2血清型肺炎克雷伯菌对大部分抗菌药物敏感性较高,耐药基因阳性率低,可移动遗传元件携带率较低;K1型和K2型高毒力肺炎克雷伯菌耐药表型的出现可能与携带可移动遗传元件相关。     

CpG DNA预防小鼠哮喘模型的形成

目的　研究含胞嘧啶鸟嘌呤核苷酸的免疫刺激元件 (CpGDNA)能否预防卵蛋白致敏小鼠哮喘模型的形成。方法　将 18只BALB/c小鼠均分为 3组 ,其中卵蛋白致敏哮喘组 (OVA组 )和CpG预防组 (CpG组 )皮下注射卵蛋白致敏制作哮喘模型 ,然后用卵蛋白激发 2次 ;阴性对照组 (NS组 )皮下注射生理盐水 ,然后生理盐水激发 2次。CpG组在致敏前腹腔注射CpGDNA 10 0 μg/ 10 0 μL ,其他两组不作干预。 3组分别在第 2次激发后 2 4h测外周血OVA特异性IgE、IgG1、IgG2a,并处死小鼠测肺泡灌洗液 (BALF)中的细胞总数及嗜酸性粒细胞 (EOS)计数 ,肺组织病理切片观察形态学改变 ,并测定脾细胞培养上清液中OVA特异性IFN γ。结果　CpG组BALF中细胞总数和嗜酸性粒细胞明显低于OVA组 ,P <0 .0 5 ;CpG组肺组织炎症反应较OVA组明显减轻 ;CpG组脾细胞培养上清液中OVA特异性IFN γ的浓度明显高于OVA组 ,P <0 .0 5 ;CpG组外周血OVA特异性IgE和IgG1均低于OVA组 ,P <0 .0 5 ;CpG组IgG2a较OVA组为高 ,P <0 .0 5。结论　CpGDNA能预防卵蛋白致敏小鼠哮喘模型的形成     

抑制脑血栓形成的硫代磷酸酯脱氧寡核苷酸的亲和性研究

目的为抑制脑血栓形成,合成与TF基因启动子区切应力反应元件(SSRE)形成三链DNA的硫代磷酸酯寡核苷酸(TFO)。方法设计TFO序列14条,采用固相亚磷酰胺三酯固相法合成TFO。硫代磷酸酯修饰在TFO的3'末端进行。应用电泳迁移分析(EMSA)观察寡核苷酸和硫代脱氧寡核苷酸的亲和性。结果在设计合成的14条寡核苷酸中,与靶序列能形成三链DNA的TFO只有T21GTa、T14GTa和T15GTa,其Kd值分别为3.6×10-10、1.0×10-9和1.0×10-8(M),经硫代磷酸酯修饰后分别为:2.3×10-9、3.8×10-9和1.5×10-8。结论硫代磷酸酯修饰的T21GTa-ps、T14GTa-ps和T15GTa-ps能够与TF基因启动子SSRE的3个位点形成三链DNA。     

苯并[a]芘对内皮细胞HSF1与HSE结合特性分析

目的研究苯并[a]芘（BaP）作用下热休克转录因子1（HSF1）与热休克元件（HSE）结合特性，分析BaP对热应激蛋白70（HSP70）的表达的影响。方法取对数生长期的猪主动脉内皮细胞传代培养，分别以不同浓度的BaP染毒（0、0．1、0．5、1、5、10μmol／L）24h，提取细胞核蛋白，用凝胶阻滞电泳实验（EMSA）检测结合率。结果低（0．1μM）、中剂量（0．5，1μM）BaP可使HSF1-HSE结合率上升，高剂量（5，10μM）BaP使HSF1-HSE结合率明显降低。结论BaP可改变细胞HSF1-HSE结合能力，低、中剂量的BaP使HSF1-HSE结合率升高，提示可促进HSP70表达，高浓度BaP可抑制HSP70的表达。     

病理生理学

硫化氢对大鼠离体灌流心脏心功能的影响；我国辽宁地区遗传性粘多糖贮积症Ⅰ型患者α-L-艾杜糖醛酸酶基因突变的研究；自身免疫反应参与大鼠急性心肌梗死后心肌损伤的实验研究；细胞外信号调节的蛋白激酶对糖尿病大鼠心肌缺血预处理的影响；丹参在常氧、急性低氧及氧反常等条件下对心室肌细胞L-Ca电流的影响；牛磺酸对低氧条件下豚鼠心室肌细胞动作电位和ATP敏感性钾电流的影响；LPS对鼠肺微血管内皮细胞水通道蛋白-1表达及其功能的影响；磷酸化ERK1／2对大鼠体外血小板聚集的可能作用；PKC和MMPs在实验性大鼠动脉粥样硬化形成中的作用及丹参的作用机制；活化蛋白-1和cAMP反应元件结合蛋白在脂多糖注射大鼠肺组织中的变化及地塞米松的影响；急性多发脑梗塞大鼠海马皮层MARCKS蛋白的表达与活性的变化；靶向腺病毒载体介导的EGFP基因在甲胎蛋白阳性肝癌细胞的特异表达；胰腺癌中MAT1蛋白的表达与其临床病理特征的关系；脑血清对EP性发热家兔下丘脑及脑脊液cAMP含量的影响；三丁基过氧化氢诱导WI-38细胞衰老的细胞周期调控机制；复方黄芪提取物抗急性肝损伤作用的研究；不同年龄高血压大鼠心肌中MKP-1的表达及对心肌肥厚的影响；苯丙氨酸缓解高血压大鼠血管重塑；一氧化氮合酶抑制剂氨基胍对脑缺血大鼠脑组织氨基酸含量的影响；左旋卡尼汀对缺氧／复氧诱导的子鼠心肌细胞凋亡的影响；自体骨髓基质干细胞移植治疗兔缺血心肌的实验研究；PGI2对肾缺血再灌损伤兔肠系膜微循环和血液流变性的影响；一氧化氮合酶2抑制剂对大鼠心肌梗死后左心室形态及心功能的影响；实验性肺鳞癌中不同亚型蛋白激酶C表达的研究；兔骨髓间充质干细胞自体移植治疗扩张型心肌病的实验研究；高敏C反应蛋白与代谢综合征组分及靶器官损害的关系；血管内皮祖细胞对缺血肢体血管生成的影响；心血管危险因素与小动脉弹性的关系；实验性心房颤动血栓形成时内皮型一氧化氮合酶和纤溶酶原激活剂抑制物-1的变化；重症高血压大鼠左心室肥厚时肾上腺髓质素系统的上调；冠心病患者血管内皮功能障碍与动脉弹性关系的研究；骨髓增生异常综合征细胞周期调控基因表达谱的研究；血管内皮生长因子反义寡核苷酸增强髓系白血病细胞对三尖杉酯碱敏感性；急性白血病视网膜母细胞瘤相关蛋白46基因和蛋白表达谱的变化及意义；血栓性血小板减少性紫癜思者血管内皮细胞标志物和溶血参数的动态分析及其临床意义；白血病患者血管新生及相关因素研究；氯通道阻断剂对血小板胞浆游离钙和血小板聚集的影响；CD44s的表达与胶质瘤分级的关系。     

HP78xxx系列监护仪黑屏故障与电源电压的分析

探讨HP系列监护仪长期工作后出现黑屏现象的原因，参照维修电路图分析黑屏故障与电源电压不正常的关系。根据易损元件找出解决故障的办法。     

与铁稳态有关的生物分子

根据近几年来发表的与铁稳态有关的生物分子的研究文献 ,将这些生物分子根据其与铁的吸收、转运、储存以及对铁稳态的监控调节等方面的关系 ,对这些生物分子进行了分类。特别是对细胞膜载体、运铁蛋白受体、铁调蛋白及铁反应元件等作了较为详细地论述     

构建MYC反应元件修饰hTERT核心启动子引导Fcy1表达的腺病毒载体

目的：构建串联的MYC反应元件修饰人端粒酶逆转录酶（hTERT)核心启动子引导酵母胞嘧啶脱氨酶基因Fcy1表达的复制缺陷型腺病毒载体。方法：将串联的MYC反应元件修饰的hTERT核心启动子及下游酵母胞嘧啶脱氨酶基因Fcy1克隆到穿梭质粒pDC316上，上辅助质粒pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染HEK293细胞获得重组复制缺陷型腺病毒并在HEK293细胞中扩增重组病毒。PCR法及斑形成实验鉴定重组腺病毒和病毒滴度。结果：成功获得由6倍和18倍MYC反应元件修饰hTERT核心启动子引导Fcy1基因表达的复制缺陷型腺病毒载体。结论：MYC反应元件修饰hTERT核心启动子引导Fcy1基因表达的腺病毒载体为进一步研究骨肉瘤转录靶向基因治疗奠定了基础。