人胚神经干细胞的体外分离培养和长期冻存

目的建立从脑组织中分离人胚神经干细胞的方法和体外长期培养的稳定体系，为细胞治疗提供基础。方法采用机械酶学法从胎脑中获得神经干细胞，这些细胞在合成纤维细胞生长因子和上皮细胞生长因子的无血清培养基中生长，血清刺激诱导分化，程序冷冻法保存细胞。结果这些细胞可在体外持续增殖，并被诱导分化成神经元和神经胶质细胞，可以长期冷冻保存。结论人胚神经干细胞分离培养体系和冻存方法的成功建立为神经损伤、退行性疾病以及其他疾病的细胞治疗提供了潜在的细胞资源。     

甘油长期冷冻保存兔角膜用于穿透性角膜移植效果观察

目的探索不同条件下甘油长期冷冻保存的角膜应用于穿透性角膜移植的可靠性和可行性。方法25只兔眼随机分为4个保存组和1个对照组，保存组按不同方法置于无水甘油中-25℃保存2月，最终全部行同种异体PKP术，术后以裂隙灯显微镜、A超以及锥蓝-茜素红活性染色等测得各组的植片透明率、厚度及角膜内皮细胞（CEC）存活率等指标并进行比较。结果术后各组植片均可见大量活性CEC存在，植片CEC与植床CEC分界清楚，形态不同。角膜片保存组术后的植片透明率、厚度以及CEC存活率均显著好于跟球保存组，角膜片内皮面添加透明质酸钠保存又优于角膜片直接保存。结论甘油冷冻保存法可以长期保存CEC活性，其中以角膜片内皮面添加透明质酸钠后保存最为可靠，这一改良方法可以满足穿透性角膜移植术的需要。     

低温保存对富含血小板血浆质量影响的实验观察

目的: 分析富含血小板血浆(plateletrich plasma,PRP)低温保存后的质量变化。方法: 采用定时限量、温和水平振荡方法将终浓度5%二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)加入已制备的PRP中,测定-80℃条件下冻存前后血小板数(plateletcount,BPC)、乳酸脱氢酶(lacticaciddehydrogenase,LDH)含量及pH值。结果: 制备PRP可获全血中75%的血小板;PRP加DMSO冷冻前后血小板计数差异无统计学意义(P>0.05);LDH活性有明显增高(P<0.01);pH值未见明显变化(P>0.05)。结论: 富含血小板血浆冷冻保存后可获得较高回收率,血小板数量和血浆pH值没有明显改变。     

新鲜和经超低温保存的同种骨髓混合移植对致死量照射小鼠的治疗效果

将新鲜的或在液氮中冻存的上海种小鼠骨髓以及新鲜的或冻存的上海种小鼠骨髓与相应的LACA品系小鼠骨髓混合后,移植给8.5Gy ⁶⁰Coγ 线照射的LACA受体小鼠,动物如天活存率分别为0、1.25、5.6和25.0%。很可能在必须同尉移植几个不同基因型的大量骨髓时,以低温保存的骨髓为好。     

预防OHSS行全胚冷冻的临床研究

目的探讨在辅助生育技术过程中出现卵巢过度刺激综合征(OHSS)倾向患者进行全胚冷冻,以预防OHSS发生,后进行冷冻胚胎移植的应用价值。方法选择2009年1月至2010年12月在本中心进行ART患者,共取卵1722周期,其中具有OHSS倾向患者201周期,占总取卵周期的11.67%,分极高危OHSS倾向组和高危OHSS倾向组两组。极高危OHSS倾向组给予全部胚胎冷冻,以后再安排冷冻胚胎移植,对于高危OHSS倾向组给予新鲜胚胎移植。比较促排卵药的使用总量及使用天数、HCG日E2水平、平均获卵数、平均胚胎数、平均优质胚胎数、OHSS发生率情况。比较全部胚胎冷冻进行复苏后移植与新鲜胚胎移植比较平均移植胚胎数、平均移植优质胚胎数、妊娠率、着床率、早期流产率等。结果1.两组患者的平均年龄、不孕年限、促排卵药的使用总量和天数无显著性差异;但全胚冷冻组HCG日E2水平、平均获卵数、平均胚胎数、平均优质胚胎数及OHSS发生率均高于新鲜周期移植组。2.全胚冷冻后行冷冻胚胎移植组与新鲜周期移植组的平均移植胚胎数、平均移植优质胚胎数、妊娠率、着床率、早期流产率均无显著性差异。结论 1.全胚冷冻不能减少早发型OHSS发生;2.为预防OHSS行全胎冷冻后,再行冷冻胚移植不影响不孕症患者治疗结局。