ADHESION-INDUCE PROTEIN TYROSINE PHOSPHORY-LATION IS ASSOCIATED WITH INVASIVE AND METASTATIC POTENTIALS IN B16-BL6 MELANOMA CELLS

ＡＤＨＥＳＩＯＮＩＮＤＵＣＥＰＲＯＴＥＩＮＴＹＲＯＳＩＮＥＰＨＯＳＰＨＯＲＹＬＡＴＩＯＮＩＳＡＳＳＯＣＩＡＴＥＤＷＩＴＨＩＮＶＡＳＩＶＥＡＮＤＭＥＴＡＳＴＡＴＩＣＰＯＴＥＮＴＩＡＬＳＩＮＢ１６ＢＬ６ＭＥＬＡＮＯＭＡＣＥＬＬＳＹａｎＣｈｕｎｈｏｎ...     

纤粘连蛋白诱导卵巢癌细胞基质金属蛋白酶-2基因表达

目的　研究细胞外基质蛋白对肿瘤细胞基质金属蛋白酶 (MMP)基因表达的影响及机理。方法　以纤粘连蛋白处理SKOV3卵巢癌细胞后 ,用明胶 酶谱法和反转录PCR观察MMP分泌及基因表达。以MMP 2启动子转染细胞 ,通过测定萤火虫酶活性 ,观察纤粘连蛋白对MMP 2启动子活性的影响。细胞p5 3含量采用Westernblot分析。结果　 5 μg/mL纤粘连蛋白刺激MMP 2分泌 ,但不影响MMP 9分泌 ,这一作用随纤粘连蛋白浓度增加而增强。经 10 μg/mL纤粘连蛋白刺激 1h后 ,细胞内MMP 2mRNA量显著增加 ;作用时间延长 ,诱导作用减弱。纤粘连蛋白可诱导转染细胞中萤火虫酶活性增加 ,AP 1功能抑制剂姜黄素 (5 0 μmol/L)不能阻断这一作用。经纤粘连蛋白处理后 ,细胞内p5 3含量明显增加。结论　纤粘连蛋白可刺激卵巢癌细胞中MMP 2分泌 ,诱导MMP 2启动子活性增强及mRNA含量增加 ,这一作用可能与p5 3蛋白转录因子活性有关 ,而与AP 1通路无关。     

异黄酮genistein对小鼠恶性黑色瘤转移的实验性治疗

目的:研究异黄酮genistein 对肿瘤转移的治疗作用。方法:B16-BL6 细胞由尾静脉注入C57BL/6 小鼠体内,于d 15 观察动物肺转移灶。genistein 混悬于2% 卵磷脂中,从接种瘤细胞前1 天开始ip,剂量为100 和200mg·kg^-1·d^-1 。结果:genistein 可抑制肺转移灶形成,200 mg·kg^-1 用药组小鼠转移灶数目明显减少;作为对照,腹腔给予环磷酰胺100 mg·kg^-1 后,形成的转移灶数目无明显变化,但形成的转移瘤灶体积减小。当genistein 和环磷酰胺合用时,转移小鼠的存活时间明显延长。结论:genistein 可抑制肿瘤转移,其作用与细胞毒药物不同, 与细胞毒药物合用可提高其抗肿瘤转移的作用。     

EFFECTS OF GENISTEIN ON INVASION AND MATRIX METALLOPROTEINASE ACTIVITIES OF HT1080 HUMAN FIBROSARCOMA CELLS

Effects of genistein on invasion and matrix metalloproteinase activities were investigated in HT1080 human sarcoma cells, lnvasion of HTI080 cells through reconstituted basement membnme was inhibited when the cells were treated with 100μmol/L and 200μmol/L genistein; At the same concentrations,genistein not only suppressed latent forms of matrix metalloprotinese-2 and-9 (MMP-2 mad MMP-9) to convert into active forms, but also increase dramatically the tissue inhibitor of metalloproteinase (TIMP-1 ) mRNA contents and reverse the imbalance of MMPs and TIMPs. However, expressions of MMP-2 and MMP-9 were not sigrdficantly affected. Suppression of MMP activation and increase of TMP-1 expression will decrease matrix degradation by MMPs, and consequently inhibit invasions of the cells. These results emphasized the existence of the imbalance between MMPs and TIMPs in tumor invasion mad metastasis formation, The value of genistein as a drug for antiinvasion and anti-metastasis chemotherapy was suggested.     

4‘,5,7—三羟基异黄酮对Balb／c 3T3小鼠成纤维细胞恶性转化的抑制作用

目的４’,５,７－三羟基异黄酮与多种肿瘤的低发生风险呈正相关,此文旨在探讨这一化合物的癌化学预防作用。方法 用３－ＭＣＡ和ＴＰＡ诱导Ｂａｌｂ／ｃ３Ｔ３细胞,建立体外二阶段转化模型,用这一模型来观察ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ对Ｂａｌｂ／ｃ３Ｔ３－Ａ３１小鼠成纤维细胞恶性转化的影响。结果 在对细胞没有明显细胞毒作用的浓度下,ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ明显抑制细胞的恶性转化,机理研究表明,ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ抑制ＴＰＡ刺     

Raji细胞抵抗阿霉素诱导细胞凋亡分子机制的实验研究

目的 :观察 Raji细胞抵抗阿霉素诱导细胞凋亡的分子机制 ,从细胞凋亡的角度探讨肿瘤细胞耐药机制。方法 :MTT方法测定阿霉素和肽素诱导的细胞毒实验 ,碘化丙啶染色 FACS和 DNA降解断裂法分析阿霉素诱导的细胞凋亡 ,FACS分析 Raji细胞 bcl- 2的表达 ,Western bolt观察 Raji细胞 p5 3、bax分子的表达 ,RT- PCR检测 MDR1、MRP和 GSTπ的表达水平。结果 :Raji细胞对阿霉素和肽素均产生明显药物耐受 ,同时抵抗药物诱导的细胞凋亡 ;Raji细胞中 bcl- 2分子呈诱导性表达 ,不表达或弱表达 bax、p5 3分子 ;Raji细胞组成性高表达 MDR1、MRP、GSTπ等耐药相关分子。结论 :Raji细胞抵抗药物诱导的细胞凋亡是化疗耐受的重要原因。其中细胞膜表面分子 MDR1、MRP的高表达 ,细胞质中 bcl- 2诱导性高表达 ,bax、p5 3分子的弱表达是导致药物耐受和抵抗细胞凋亡的重要因素。     

4′,5′,7-三羟基异黄酮对NB4人急性早幼粒白血病细胞生长和分化的影响

目的：研究4′,5′,7-三羟基异黄酮（genistein）对NB4白血病细胞生长和分化的影响,揭示其诱导细胞凋亡作用。方法：分别用NBT还原力分析、DNA电泳分析观察药物诱导分化和凋亡作用;Northern杂交分析和质粒DNA断裂分析检测bcl-2基因表达和DNA拓扑异构酶II活性。结果：Genistein可明显抑制NB4细胞生长,并致细胞大量死亡。在浓度高于40 μmol.L^-1时,可诱导典型的凋亡形态,同时,细胞bcl-2基因表达受到抑制。Genistein可促进DNA拓扑异构酶II介导的DNA断裂, 但诱导NB4细胞分化作用较弱。结论：Genistein通过诱导细胞凋亡来杀伤和抑制NB4细胞的生长,其机制与抑制DNA拓扑异构酶II活性有关。     

Adhesion induces matrix metalloproteinase-9 gene expression in ovarian cancer cells

The processes of cell invasion includes adhesion, proteolysis of extracellular matrix (ECM) and migration. It is not only related to cancer cells metastasis, but also involved in infiltration of immune effector cells,embryogenesis and angiogenesis. During the invasioncells attach and spread on the ECM, secrete proteinase to hydrolyze ECM, and then move through interstitial stroma. Matrix metalloproteinases (MMP), especially MMP-2 and MMP-9, play an important role in this processe[1,2].…     

Genistein抑制HT1080人纤维肉瘤细胞的体外侵袭作用

目的 观察ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ对恶性肿瘤细胞侵袭及侵袭相关性质的影响,探讨蛋白酪氨酸激酶抑制剂用于肿瘤转移治疗的可能性。方法 ＨＴ１０８０细胞经２０μｍｏｌ／Ｌ或４０μｍｏｌ／Ｌ Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ处理３天后,分别用重建基底膜侵袭模型、粘附基质分析、Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室趋化运动模型以及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析来研究药物处理后细胞侵袭、粘附、运动以及基质蛋白酶基因表达的改变。结果 经ｇｅｎｉｓ