化学交联的抗TNF和抗CALLA双功能抗体的制备及其导向功能研究

本文探索了用抗 CALLA 和抗 TNF 的双功能抗体导向 TNF 杀伤 CALLA 阳性白血病细胞的可行性.用化学交联剂 SPDP 制备了抗 TNF 和抗 CALLA 抗体的交联物,经鉴定为双功能抗体;与 TNF 联合使用,在 CALLA 阳性白血病细胞系 nalm—6上进行体外杀伤实验。MTT 比色法测定杀伤效果。我们发现经双功能抗体导向后,nalm—6细胞对 TNF 的敏感性明显增加。     

免疫毒素:Ⅱ抗人T淋巴细胞单克隆抗体和蓖麻毒素结合物的制备及其细胞毒性质

抗体和毒素的结合物称“免疫毒素”,近年来由于单克隆抗体的出现,更增强了“免疫毒素”的特异性。在抗人T淋巴细胞的单克隆抗体上接蓖麻毒素就能成为特异性杀伤T细胞的制剂,为有效地清除骨髓中的T细胞,为在临床上治疗各种有关疾病提供了新的途径。 本文叙述了用异型双功能连接剂,N—琥珀酰亚氨基—3—(2—吡啶基二硫)丙酸(SPDP),将抗人T淋巴细胞单克隆抗体与蓖麻毒素相连接,并初步证明这些免疫毒素对T淋巴细胞的特异性杀伤。     

单克隆抗体亲和柱纯化尿激酶的研究

尿激酶是一种纤溶酶原激活剂,由肾脏合成并释放到尿中。临床上用于治疗血栓,商品酶是从大量人尿中提取,纯化方法复杂,不易得到纯品。抗尿激酶单克隆抗体亲和柱有可能简单而有效地纯化尿激酶,为此我们采用杂交瘤技术制备了七个分泌抗尿激酶单克隆抗体的杂交瘤。它们分泌的单克隆抗体分别命名为S_(31)、S_(26)、N_(14)、N_(17-2)、N_(30)、N_(34)和N_(36)。     

CD3AK细胞过继免疫治疗的实验研究

目的: 分析抗CD3分子的单克隆抗体 (mAb)yCD3的免疫学特性和生物学活性, 观察其激活的免疫活性细胞CD3AK体外及动物体内的抑瘤作用。方法: 用流式细胞术(FCM)测定yCD3的特异性, 以及CD3AK细胞的免疫表型和产生细胞因子的情况。用 3H -TdR法测定yCD3对淋巴细胞转化的作用; 乳酸脱氢酶法 (LDH)测定CD3AK细胞的体外细胞毒活性。建立荷瘤小鼠模型, 观察静脉注射CD3AK细胞后肿瘤生长的情况、转移灶数量和小鼠存活天数。结果: yCD3与T细胞呈特异性反应, 5μgyCD3可竞争抑制 70%的标准抗CD3抗体与细胞表面CD3分子的结合。yCD3刺激外周血淋巴细胞增殖的有效浓度为 8μg/L, 并与IL- 2、抗CD28抗体有协同作用。活化的CD3AK细胞中CD3 、CD8 和CD25 细胞增多; 产生IL- 2和IFN γ的CD3 细胞均有不同程度的增加, 在抗CD28抗体协同刺激下分别增加 3. 29和 2. 47倍。当效靶细胞比为 80∶1时, CD3AK细胞对体外肿瘤细胞杀伤的百分率为 57. 54%。分组观察荷瘤动物, CD3AK细胞治疗组的抑瘤率为 33. 17%, 对小鼠肿瘤肺转移的抑制率为39. 70%, 与LAK细胞联合治疗的疗效更显著。结论: yCD3可活化T细胞, 诱导的CD3AK细胞在体外及动物体内显示抑制肿瘤的作用, 在临床抗肿瘤过继性免疫治疗中具有重要意义。     

对影响聚丙烯酰胺凝胶电泳银染色因素的探讨

本文比较了考马斯亮蓝法和银染法对SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色灵敏度的影响;并对一些影响聚丙烯酰胺凝胶电泳银染因素作了探讨。     

用亲和层析法测定P81抗体所抗细胞表面抗原的分子量

P81是抗人全部T细胞及部分B细胞的单克隆抗体,其特异性类似于Leu-1或OKT_1,但又与它们不完全相同。测定P81抗体所抗细胞表面抗原的分子量将有助于对抗体特异性进行鉴定,也有助于研究相应抗原的性质。本文报道用亲和层析法测定P81抗体所抗抗原的分子量,并与常规的免疫沉淀法所得结果进行比较。材料和方法 Protein A-Sepharose CL-4B,CNBr-Sepharose 4B及测分子量用的标准蛋白均购自     

免疫毒素清除人骨髓中克隆化白血病细胞的研究

本实验用抗急性淋巴细胞白血病共同抗原(CALLA)的单克隆抗体与蓖麻毒素(Ri-cin)偶联的免疫毒素(79:Ricin)清除骨髓中克隆化白血病细胞。目的在于寻找减少自体骨髓移植后白血病复发可能性的有效措施。~3H-亮氨酸掺入实验结果表明,79:Ricin在     

人IgD的纯化及其抗血清制备

<正> 本文采用了Vltrogel AcA34凝胶过滤、DEAE离子交换及亲和层析法,从骨髓瘤病人血清中分离高纯度的IgD,并以此为抗原免疫山羊得到高效价的抗血清。 材料和方法 一、材料及来源:Vltrogel AcA34(LKB公司),DEAE纤维素(Whatman公司),CNBr-Sepharose4B(Pharmacia公司),抗人IgG、IgA、IgM抗血清(上海生物制品研     

抗人gp130分子单克隆抗体的制备和鉴定

ｇｐ１３０可与许多细胞因子受体（ＩＬ－６Ｒ,ＩＬ－１１Ｒ,ＯＳＭＲ,ＬＩＦＲ,ＣＮＴＦＲ和ＣＴ－１Ｒ）组成受体复合物,并在这类细胞因子的信号转导中的起着重要的作用。方法以痘苗病毒为载体构建获得的可溶性ＣＤ１３０（ｓＣＤ１３０）为免疫原,通过融合的方法。得到４株稳定分泌抗ＣＤ１３０单克隆抗体（ｍＡｂ）Ｌ２,Ｌ４ａ,Ｌ４ｂ和Ｌ５）的杂交瘤细胞株。结果本组ｍＡｂ对靶细胞具有识别特异性,不但可识别相对分子     

抗人CD130胞内磷酸化酪氨酸单克隆抗体的制备与鉴定

目的获得一组抗人CD130胞内磷酸化酪氨酸单克隆抗体(mAb),用于研究IL-6介导的信号转导.方法按照CD130分子胞内N752-G766区的氨基酸序列,化学合成Y759磷酸化的15肽作为抗原,应用细胞融合法制备一组抗CD130磷酸化酪氨酸的mAb,并用ELISA、Western blot、免疫沉淀和免疫组化染色等技术,对这组mAb的性质和功能进行探讨.结果(1)通过细胞融合获得了4株稳定分泌抗CD130胞内Y759磷酸化mAb的杂交瘤细胞株(MIY1、MIY2、MIY3和MIY4),这组mAb仅对合成肽N752-G766产生特异性反应.(2)Western blot分析表明,这组mAb识别的靶分子的相对分子质量(Mt)为13×104～14×104的.用此组mAb免疫沉淀的Mr为13×104～14×104蛋白,可被抗CD130 mAb所识别;同时用抗CD130mAb免疫沉淀的13×104～14×104分子也可被这组mAb所识别;(3)进一步研究证实,这组mAb可识别由IL-6诱导的细胞内酪氨酸磷酸化的蛋白分子.结论成功地研制了抗人CD130胞内磷酸化酪氨酸的mAb.