霉酚酸对趋化性细胞因子I-TAC的表达及其功能的影响

研究探讨霉酚酸(MPA)对趋化性细胞因子I-TAC的表达及其功能的影响。分别在IFN-γ加入之前、同时、之后加MPA于培养的ECV-304细胞中,以RT-PCR检测其I-TAC mRNA的表达水平。PBMC经不同浓度MPA(10、100、1 000ng/ml)处理12 h后,采用微迁移板技术观察MPA对I-TAC趋化作用的影响。MTT法测定不同浓度MPA(10、100、1 000ng/ml)对I-TAC促PBMC增殖效应的影响。结果显示,在不同时间加入MPA处理的各组,其I-TAC/GAPDH比值均显著地小于对照组(P<0.01),而MPA处理组之间无显著性差异(P>0.05)。MPA处理组PBMC的迁移指数和MTT试验的A值与相应对照组相比均显著下降(P<0.05)。这些结果提示,MPA对I-TAC在内皮细胞上表达及其趋化、促增殖功能具有抑制作用。MPA的这些新发现的功能可能是霉酚酸酯(MMF)抗移植排斥的重要机制之一。     

细菌脂多糖单克隆抗体Clone20的多反应性及其抗独特型抗…

Ｃｌｏｎｅ２０系由Ｓ．ｍｉｎｅｓｏｔａ Ｒ５９５死菌免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠制备的ＩｇＭ类单克隆抗体，曾报告它对脂多糖中的末端αＫＣＤ特异。本文报告采用ＥＬＩＳＡ显示，Ｃｌｏｎｅ２０能和ＬＰＳ的毒性成分类脂Ａ结合。用Ｃｌｏｎｅ２０免疫的小鼠淋巴细胞制备杂交瘤并筛选出４个分泌抗独特型抗体的细胞株，编码为Ｃｌｏｎｅ４７－５０。     

Isolation and purification of CWF－Ⅰ derived from Serratia marcescens and its antitumor activities in vitro

ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＣＷＦ－ⅠｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍＳｅｒｒａｔｉａｍａｒｃｅｓｃｅｎｓａｎｄｉｔｓａｎｔｉｔｕｍｏｒａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｉｎｖｉｔｒｏ￥ＪｉａｏＢｉｎｇｈｕａ（焦炳华）；ＺｈａｏＨｕ（赵虎）；ＹｕＷｅ...     

鲎抗脂多糖因子对晚期炎症因子高迁移率族蛋白-1体外效应的拮抗作用

目的 观察鲎抗脂多糖因子(LALF)对小鼠巨噬细胞晚期炎症因子高迁移率族蛋白-1(HMGB1)功能的拮抗效应,探讨LALF对晚期内毒素血症动物的保护机制.方法 用HMGB1刺激小鼠腹腔巨噬细胞,加入或不加LALF.迁移实验检测巨噬细胞趋化作用,ELISA检测培养上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α浓度.结果 巨噬细胞迁移指数的增加呈HMGB1剂量依赖性,HMGB1刺激后巨噬细胞培养上清液TNI-α浓度显著增高.LALF与HMGB1预混合显著降低巨噬细胞的迁移指数和培养上清液TNF-α浓度.结论 LALF可能通过抑制HMGB1而发挥其对晚期脓毒症动物的保护作用.     

慢性乙型肝炎患者外周血趋化因子CXCL10和CXCL11的表达及意义

目的探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血中趋化因子CXCL10和CXCL11的表达水平及与ALT和HBVDNA的关系。方法用ELISA方法定量检测CHB患者外周血中CXCL10和CXCL11含量;以实时定量PCR检测CHB患者HBVDNA含量。以全自动生化分析仪检测CHB患者血清中ALT含量。结果CHB患者血清中CXCL10和CXCL11浓度分别为（123．38±88．37）pg／ml和（129．24±82．79）pg／m1,均高于正常对照组（P〈0．05）,且与ALT呈正相关（r值分别为0．739、0．597,P〈0．05）;但外周血中CX—CL10和CXCL11的含量与血清中HBVDNA含量无明显相关（r值分别为0．244、0．242,P〉0．05）。结论CHB患者外周血中CX—CL10和CXCL11介导了肝脏炎症细胞浸润和免疫损伤,参与了乙型肝炎慢性化病程。     

HMGB1基因沉默促进多柔比星诱导的胃癌BGC-823细胞自噬及调亡

目的 探讨高迁移率族蛋白l（high-mobility group box 1,HMGBl）基因沉默对化疗药物多柔比星（doxorubicin, DOX）诱导BGC-823胃癌细胞发生自噬和凋亡的影响。方法 MTT、Western blotting和激光共聚焦显微镜观察方法分别检测DOX对BGC-823细胞增殖及微管相关蛋白轻链3- I （microtubule light chain- I,LC3I）、LC3II表达和自噬小体形成的影响。构建靶向HMGB1的shRNA载体pSuper-shHMGBl及其对照载体pSuper-shNC并转染BGC-823胃癌细胞,建立HMGBl稳定沉默的细胞系。DOX处理不同质粒转染组的BGC-823胃癌细胞,激光共聚焦显微镜观察HMGBl沉默对DOX诱导的自噬小体形成的影响,MTT法、流式细胞术分别检测对细胞增殖和凋亡的影响,Western blot检测对自噬及凋亡相关蛋白（HMGB1, LC3, Bcl-2,Bcl-XL, Mcl-1 and cleaved caspase-3）表达的影响。结果 DOX可上调LC3-II蛋白的水平和促进细胞自噬体的形成(P<0.001)。与对照组相比,HMGBl基因沉默可降低DOX诱导的自噬作用(P<0.001),并促进胃癌细胞发生凋亡[12.37±2.84 % vs 46.12±3.15%, P<0.05],上调激活型caspase-3的表达水平。进一步分析发现,DOX诱导胃癌细胞发生自噬时,抗凋亡蛋白骨髓细胞白血病蛋白1（Mcl-1）的降解增加,而Bcl-2和Bcl-XL表达无明显变化;HMGBl基因沉默可抑制DOX诱导的Mcl-1降解。结论 DOX可诱导胃癌细胞发生自噬;HMGB1基因沉默有助于逆转BGC-823胃癌细胞对DOX耐药性,促进胃癌细胞发生凋亡。     

不同的力值和加力时间对正畸牙龈沟液中IL-1β水平的影响研究

目的通过分析上颌尖牙受不同作用力后龈沟液（GCF）中的白细胞介素-1β（IL-1β）水平的动态变化规律,间接了解牙齿受机械力作用后牙周组织改建的生化反应过程。方法选择正畸患者14例为研究对象,随机分成2组。分别对2组患者的右侧上颌尖牙施加100 g和250 g的远中移动初始力,左侧上颌尖牙均不加力。分别在加力前、加力后24 h,48 h,72 h,7 d,14 d,21 d和28 d时收集尖牙近、远中龈沟内GCF,ELISA法测定IL-1β含量。结果不同时间点、不同力值下GCF中IL-1β水平变化差别有统计学意义（P〈0.01）,牙齿近远中侧GCF中IL-1β水平变化差别无统计学意义。结论GCF中IL-1β的水平与正畸力大小及力的持续时间密切相关;GCF中IL-1β含量的变化可以作为分析临床正畸加力大小是否合适的参考指标之一。     

灵杆菌细胞壁成分CWF－Ⅰ的提取、纯化以及体外抗肿瘤作用

应用有机溶剂（氯仿－甲醇－石油醚，４∶１∶１，２０ｇ／１５０ｍｌ）萃取法从干燥的灵杆菌（粘质沙雷菌Ｓｅｒｒａｔｉａｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）或其粗制内毒素中提取得到了一种在体外具有显著抗肿瘤作用的非内毒素成分（Ｃｅｌｌｗａｌｌｆｒａｃｔｉｏｎ－Ⅰ，ＣＷＦ－Ⅰ），该成分进一步经制备性硅胶Ｇ薄层层析分离可得到层析纯的单一ＣＷＦ－Ⅰ成分。应用该成分对肿瘤细胞的杀伤作用进行了光镜，以及扫描和透射电镜等形态学研究。     

中国鲎鲎抗脂多糖因子的提取、纯化及其活性的初步鉴定

目的 从中国鲎血细胞中提取鲎抗脂多糖因子并初步鉴定其活性。方法 采用超滤、浓缩、离子交换层析等方法提取、纯化中国鲎鲎抗脂多糖因子，应用鲎变形细胞溶解物抑制试验测定其活性。结果 初步纯化得到的鲎抗脂多糖因子经SDS—PAGE鉴定其纯度达90％以上，分子量为15．68kD，在体外可中和脂多糖(LPS)凝固鲎溶解物的活性，其中和比例约为500：1。结论 初步纯化的中国鲎鲎抗脂多糖因子具有中和LPS的活性。     

HMGB1 基因沉默促进多柔比星诱导的胃癌BGC-823细胞自噬及凋亡

目的：探讨高迁移率族蛋白1（high-mobility group box 1, HMGB1 ）基因沉默对化疗药物多柔比星（doxorubicin, DOX）诱导BGC-823胃癌细胞发生自噬和凋亡的影响。方法：MTT、Western blotting和激光共聚焦显微镜分别检测DOX对BGC-823细胞增殖及微管相关蛋白轻链3-Ⅰ （microtubule light chain-3Ⅰ,LC3Ⅰ）、LC3Ⅱ表达和自噬小体形成的影响。构建靶向 HMGB1 的shRNA载体pSuper-shHMGBl及其对照载体pSuper-shNC并转染BGC-823胃癌细胞,建立 HMGB1 稳定沉默的细胞系。DOX处理不同质粒转染组的BGC-823胃癌细胞,激光共聚焦显微镜观察 HMGB1 沉默对DOX诱导的自噬小体形成的影响,MTT法、流式细胞术分别检测对细胞增殖和凋亡的影响,Western blotting检测对自噬及凋亡相关蛋白（HMGB1、LC3、Bcl-2、Bcl-XL、Mcl-1和激活型caspase-3）表达的影响。结果：DOX可上调BGC-823细胞中LC3-Ⅱ蛋白的水平和促进细胞自噬体的形成（ P <0.01 ）。与对照组相比, HMGB1 基因沉默可减少DOX诱导的胃癌细胞自噬\[(19.33±2.96)% v (71.67±3.38)%, P <0. 01 \],促进胃癌细胞发生凋亡\[（46.12±3.15）% vs （12.37±2.84）%, P <0.05\],上调激活型caspase-3的表达水平。进一步分析发现,DOX诱导胃癌细胞发生自噬时,Mcl-1的降解增加,而Bcl-2和Bcl-XL表达无明显变化; HMGB1 基因沉默可抑制DOX诱导的Mcl-1降解。结论：DOX可诱导BGC-823胃癌细胞发生自噬, HMGB1 基因沉默有助于逆转胃癌细胞对DOX的耐药性,促进胃癌细胞发生凋亡。