辛二酰苯胺异羟肟酸对鼻咽癌细胞回复引导半胱氨酸丰富蛋白含kazal基元以及基质金属蛋白酶9表达与活性的影响

目的探讨辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对鼻咽癌细胞回复引导半胱氨酸丰富蛋白含kazal基元(reversion-inducing-cysteine-rich protein with kazal motifs,RECK)以及基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达与活性的影响。方法体外培养鼻咽癌细胞系CNE-1,用0、0.1、1、5μmol/L SAHA处理后,采用蛋白质印迹法(Western blot)和Real-Time PCR(RT-PCR)分别检测RECK,MMP-9蛋白和mRNA表达;MTT法检测CNE-1细胞的增殖。同时采用明胶酶谱实验观察SAHA处理后MMP-9酶活性变化。结果随着SAHA浓度的增加,RECK蛋白和mRNA的表达显著增高(P0.05);随着SAHA浓度的增加,MMP-9蛋白和mRNA的表达显著降低(P0.05);CNE-1细胞随着SAHA浓度的增加,存活率逐渐降低(P0.05)。明胶酶谱实验显示,随着SAHA浓度的增加,MMP-9酶活性逐渐降低。结论 SAHA可能通过上调RECK基因的表达,抑制MMP-9的表达与活性而发挥对CNE-1细胞生长抑制作用。     

帕洛诺司琼预防顺铂化疗所致恶心呕吐的临床观察与护理

目的观察及评价盐酸帕洛诺司琼预防顺铂化疗所致恶心呕吐的疗效及安全性。方法将接受高催吐药物顺铂治疗的恶性肿瘤患者随机分为研究组和对照组,分别于第一日化疗前半小时缓慢静注盐酸帕洛诺司琼和格拉司琼注射液,观察患者化疗后5天内急性及迟发型恶心/呕吐的发生情况。结果纳入可评价病例36例,研究组及对照组各18例。两组病例急性恶心的控制率分别为63.3%和60.0%,迟发型恶心的控制率为70.0%和56.5%,急性呕吐的控制率为60.0%和56.5%,迟发性呕吐的控制率67.7%和53.3%,两组患者不良反应的发生率差异无统计学意义。结论帕洛诺司琼能有效的控制顺铂所致恶心呕吐的消化道反应,其对迟发型恶心呕吐的控制率高于格拉司琼,不增加不良反应的发生。     

姜黄素对鼻咽癌细胞RECK基因甲基化以及MMP-9表达与活性的影响

目的探讨姜黄素对鼻咽癌细胞回复引导半胱氨酸丰富蛋白含kazal基元（ RECK）基因甲基化以及基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达的影响。方法体外培养鼻咽癌细胞系CNE-1,用1、10、30μmol/L姜黄素处理后,采用Western blot和实时定量PCR分别检测RECK、MMP-9蛋白和mRNA表达;高效液相色谱-电喷雾质谱检测RECK甲基化;MTT法检测CNE-1细胞的增殖。同时采用明胶酶谱实验观察姜黄素处理前后MMP-9酶活性变化。结果 CNE-1细胞未刺激时RECK表达水平较低,而经1--30μmol/L姜黄素处理后,能显著增强RECK蛋白和mRNA的表达。高效液相色谱-电喷雾质谱结果显示,30μmol/L姜黄素处理后,RECK启动子、全基因组以及细胞核内甲基化水平分别降低为（69.04±10.62）%、（61.13±7.08）%、2.80±1.32。同时,姜黄素能显著降低CNE-1细胞中MMP-9蛋白和mRNA表达以及MMP-9的酶活性。结论姜黄素可能通过能上调RECK基因表达,降低细胞内甲基化水平,从而抑制MMP-9的表达与活性而发挥对CNE-1细胞生长抑制作用。     

治疗前CT影像组学结合机器学习预测非小细胞肺癌患者EGFR突变亚型

目的探讨基于治疗前胸部平扫CT影像组学特征和临床特征结合机器学习算法预测非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)突变状态和突变亚型(19Del/21L858R)的可行性和价值。方法回顾性分析南华大学附属第一医院和附属第二医院经活检病理证实和接受EGFR基因检测的280例NSCLC患者的治疗前胸部平扫CT和临床特征数据, 其中EFGR突变患者为136例。由两位高年资影像和肿瘤医师勾画原发肺部大体肿瘤区域(GTV), 然后提取851个影像组学特征, 采用Spearman相关分析和RELIEFF算法筛选具有预测性的特征, 两家医院分别为训练组和验证组。经特征选择的影像组学特征和临床特征构建临床-影像组学模型, 并与单独采用影像组学特征和临床特征模型进行比较。采用序贯建模流程, 使用支持向量机(SVM)建立机器学习模型预测EGFR突变状态和突变亚型。受试者工作曲线下面积(AUC-ROC)评估预测模型的诊断效能。结果经特征筛选各有21个影像组学特征在预测EGFR突变和突变亚型时具有预测效能并用于建立影像组学模型。临床-影像组学模型表现出最好的预测效能, 预测EGFR突变状态的模...     

穿心莲内酯对人鼻咽癌细胞增殖以及Na-K-ATP酶活性的影响

目的观察穿心莲内酯(Andrographolide, AD)对人鼻咽癌CNE-2细胞的生长抑制作用,并研究其对凋亡的作用机制.方法体外培养CNE-2细胞,分别用1.0mmol/L、3.0mmol/L、5.5μmol/L的AD处理细胞24h、48h、72h.CCK-8法检测细胞的增殖抑制率;流式细胞术分析细胞周期的变化;无机磷法检测Na+-K+-ATP酶活性改变.结果 AD能显著抑制CNE-2细胞的增殖,使其细胞周期停滞于S期和G2/M期;不同浓度的AD能降低Na+-K+-ATP酶活性且呈剂量依赖性,即当AD浓度为1.0μmol/L时,能使酶活性降低至83﹪,3.0μmol/L时其活性降为63.3﹪,而5.5μmol/L AD能使Na+-K+-ATP酶活性降低至42﹪.结论 AD对鼻咽癌细胞增殖具有一定的抑制作用,有望成为一种潜在的肿瘤治疗药物.     

PEITC对NSCLC A549、H1299细胞凋亡的影响

目的探讨异硫氰酸苯乙酯(PEITC)对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株(A549、H1299)凋亡的影响机制。 方法体外培养A549、H1299细胞,采用10、30、50 μmol/L PEITC处理细胞48 h后,MTT法检测细胞增殖水平,流式细胞术检测细胞周期及凋亡率。实时定量PCR、Western blotting分别检测细胞内TFPI-2 mRNA及蛋白、TFPI-2甲基化、TMPRSS4表达水平。荧光素酶报告实验检测细胞内TMPRSS4活性。沉默TFPI-2或过表达TMPRSS4后,分别检测肺癌细胞增殖率及凋亡率。 结果不同浓度PEITC能够抑制A549、H1299细胞增殖及诱导细胞凋亡。PEITC能够促进细胞TFPI-2 mRNA以及蛋白的表达,降低TFPI-2的甲基化酶活性及TMPRSS4的表达。沉默TFPI-2表达后,A549、H1299细胞增殖水平显著增加,而过表达TMPRSS4降低细胞凋亡率。 结论PEITC能够诱导NSCLC A549、H1299细胞凋亡,其机制可能与抑制TFPI-2甲基化、下调TMPRSS4表达有关。     

EGCG对结肠癌细胞RECK基因甲基化以及p38磷酸化的影响

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯（EQCO）对结肠癌细胞HT29RECK基因甲基化及p38信号通路的影响。方法用50uMEGcG以及p38特异性抑制剂SB203580与培养的HT29细胞孵育36h,甲基化特异性PCR（MSP）检测RECK甲基化情况,并用Westernblot检测p38的磷酸化改变。结果MSP结果显示EGCG、SB203580处理后,HT29细胞内甲基化RECK基因有昕减少,而非甲基化基因明显增多,同时EGCG能抑制HT-29细胞中p38的磷酸化水平。结论EGCG可能通过抑制p38磷酸化而逆转肿瘤细胞RECK甲基化。     

水飞蓟宾抑制缺氧状态下胃癌细胞mTOR磷酸化及HIF-1α表达

目的:探讨水飞蓟宾对胃癌细胞缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响及其可能的分子机制.方法:低氧条件下体外培养胃癌细胞系MGC803,用不同浓度水飞蓟宾处理后,分别采用Real-time PCR和Western blotting法检测HIF-1αmRNA、蛋白的表达以及mTOR和Akt的磷酸化水平,MTT法检测水飞蓟宾对MGC803细胞增殖的影响.结果:细胞低氧状态下生长4h后,与正常氧浓度组相比,细胞内HIF-1 α蛋白表达水平显著增高[(0.94 ±0.16)vs(0.015±0.03),P＜0.01)];经250 μmol/L水飞蓟宾处理后,与处理前相比,HIF-1α蛋白表达水平明显减少[(0.24±0.09)vs (0.94±0.16),P＜0.01].与正常氧浓度组相比,低氧并不能增加HIF-1α mRNA的表达[(0.074±0.011) vs (0.07±0.02),P＞0.05],即便加入250μmol/L水飞蓟宾处理对HIF-1αmRNA的表达也无明显影响[(0.081 ±0.011) vs (0.07±0.02),P＞0.05],但水飞蓟宾能显著增加泛素化HIF-1α蛋白的表达[(0.94 ±0.16)vs(0.24 ±0.09),P＜0.01];水飞蓟宾处理后能明显抑制mTOR磷酸化水平[(0.17±0.06) vs (0.53±0.14),P＜0.05)],并能明显抑制MGC803细胞的增殖[(52.94 ±6.15) vs (100±3.22),P＜0.05)].与处理前相比,50和100μmol/L水飞蓟宾处理对Akt磷酸化无明显影响[(0.16 ±0.09)、(0.17±0.06) vs(0.11±0.04),P＞0.05],但250 μmol/L水飞蓟宾处理后,细胞内Akt磷酸化水平明显增强[(0.33 ±0.06) vs(0.11±0.04),P＜0.05].结论:水飞蓟宾可能通过影响mTOR和HIF-1α的表达水平而发挥抗肿瘤活性.     

槟榔碱对2型糖尿病大鼠凝血功能和血液流变学的影响

目的 探讨槟榔碱对2型糖尿病大鼠凝血功能和血液流变学的影响.方法 Sprague-Dawley(S-D)大鼠高糖高脂饮食喂养4周后,腹腔注射链脲佐菌素(30 mg/kg)建立2型糖尿病模型.模型建成后将大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、槟榔碱治疗组(1 mg/kg,5 mg/kg和20 mg/kg).槟榔碱处理12周后,心脏采血测定各组大鼠空腹血糖水平、凝血功能指标、血浆纤维蛋白原含量和血液流变学指标.结果 与正常对照组相比较,模型组大鼠的空腹血糖水平显著性升高,凝血酶原时间、凝血酶时间、活化部分凝血激酶时间显著性降低和纤维蛋白原含量显著性升高,全血黏度、血沉、红细胞压积和红细胞聚集指数显著性增加,而红细胞变形指教显著性降低,而5 mg/kg和20 mg/kg槟榔碱显著性降低大鼠的空腹血糖水平,明显改善凝血功能指标和血液流变学指标的异常变化.结论 槟榔碱能改善2型糖尿病大鼠凝血功能和血液流变学的异常.