疟疾四重巢式PCR检测方法的建立

目的建立一种能同时检测4种疟疾的多重巢式PCR检测方法。方法以4种疟原虫为研究对象,提取全血样本核酸,采用疟原虫18SSU r RNA作为分子标记,合成通用引物和4种疟原虫特异性引物,建立和优化四重巢式PCR反应体系。结果建立的方法在原虫之间无交叉反应,检测敏感性可达102copies/μl,经对随机选取的口岸发热样本进行检测,35份血液样本中,检出恶性疟13例、间日疟7例、卵形疟1例、以及恶性疟和间日疟的混合感染2例,阳性率为65.7%;比镜检的阳性率54.3%高,尤其是检出混合感染病例比例高,并对检测结果进行测序验证。结论建立的四重巢式PCR能同时检测4种不同疟原虫引发的疟疾,具有较高的特异性和敏感度,适合于口岸输入性疟疾的快速检测。     

安普贴薄膜在新型无创耳模矫正技术中的应用研究

目的　探讨安普贴薄膜在新型无创耳模矫正技术中的治疗作用和预防、治疗压力性损伤的临床效果。方法  选择2018年10月～2019年3月患有耳廓畸形并接受美国EarWell耳矫正器治疗121例婴幼儿为研究对象,年龄7天～2岁。签署知情同意,采用美国Earwel耳矫正器进行矫正治疗。随机分为实验组和对照组,实验组61例据耳廓大小选择 合适型号矫形器,将安普贴薄膜贴于耳廓畸形部位、牵引器及耳颊矫正器受压部位,根据耳廓畸形类型先用安普贴薄膜塑型再固定耳廓牵引器和耳颊矫正器。对照组60例按照常规方法用耳廓牵引器和耳颊矫正器直接牵拉治疗,无塑形及保护性隔离。对比观察受压部位皮肤压力性损伤情况、复诊时间、家长满意度,评估矫正效果并记录。结果  比较两组患儿受压部位皮肤压力性损伤的情况、复诊时间及矫正效果。皮肤压力性损伤情况：实验组仅1例皮肤发红,无皮损情况发生;对照组15例出现局部皮肤完整,颜色暗红,压之不褪色;9例出现局部皮肤破损,伴有粉红色的伤口床,无软骨暴露,周围无腐肉;1例耳甲矫正器受压部位皮肤破溃,软骨外露。复诊时间：实验组复诊时间（8.41±0.99）天,对照组复诊时间（5.67±0.95）天。矫正效果：实验组不满意0例,一般3例,满意58例;对照组不满意6例,一般10例,满意44例。结论　安普贴薄膜能有效预防无创耳矫正术中的压力性损伤并对受压部位有治疗作用。安普贴薄膜对耳廓畸形特别是耳轮畸形有塑型作用。能有效延长患儿的复诊时间,减少复诊次数。可以推广应用。     

儿童喉气管狭窄手术的护理方法及效果观察

目的：分析研究儿童喉气管狭窄手术的护理方法及其应用效果,为相关临床护理工作提供有效依据。方法：随机选取该院2014年1月至2015年3月接受治疗的80例喉气管狭窄儿童患者为研究对象,对其进行喉气管重建手术,并进行相关的术前术后护理工作,对其术后康复效果进行观察。结果：通过对该80例喉气管狭窄儿童患者进行喉气管重建手术,并进行相关的术前术后护理工作,其手术治疗结果为治愈患者48例,治愈率60％,手术具有明显效果患者24例,有效率30％,其病情症状无明显改善8例,无效率10％,总有效率为90％。结论：对喉气管狭窄儿童患者进行喉气管重建手术,并进行相关的术前术后护理工作,对患者康复具有十分重要的积极作用,可有效避免并发症的发生,该护理方法为喉气管重建手术的临床护理工作提供了有效依据,值得应用推广。     

河南口岸截获未知蝇种细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因分析

目的应用DNA条形码技术对河南口岸截获的1只形态不完整的未知蝇类进行鉴定。方法利用以细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)为目的基因的DNA条形码技术,对该未知蝇类基因组DNA进行扩增、序列比对和分析。结果通过DNA条形码鉴定和序列比对,该未知蝇类的DNA条形码序列与BOLD中绯颜裸金蝇的序列同源性高达100%,确认该蝇种为绯颜裸金蝇。结论 DNA条形码技术弥补了传统形态学鉴定的局限性,在国境口岸医学媒介生物鉴定中有广阔的应用前景。     

糖尿病健康教育

通过健康教育,纠正患者及其家属对糖尿病认识上的误区,护理上的不足,达到良好地控制疾病,提高生活质量,减轻社会和家庭负担.     

IL-2+IL-15组合培养方案对乳腺癌患者外周血中NK细胞体外扩增的效果

目的：观察IL-2+IL-15组合体外培养方案对于NK、NKT和T细胞亚群的比例、表型、杀伤肿瘤细胞活性与黏附活性的影响,并初步探讨其作用机制。方法：采集天津医科大学附属肿瘤医院生物治疗科2012年5月至2012年7月期间收治的5例乳腺癌患者的外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）,用IL-2+IL-15 联合培养方案进行培养,观察培养15 d后细胞的扩增倍数和淋巴细胞亚群比例变化,流式细胞术检测细胞免疫表型、细胞表面受体的表达,LDH释放法和CD107a释放法检测不同细胞亚群对于HLA匹配或不匹配的靶肿瘤细胞系的杀伤活性,活细胞工作站检测总扩增产物对于不同靶肿瘤细胞系的黏附作用。结果：与扩增前相比,IL-2+IL-15培养方案扩增15 d后,NK细胞\[（36.74±1710）% vs （16.34±3.12）%,P<0.05\]、NKT细胞\[（24.88±12.34）% vs （4.06± 2.05）%,P<0.05\]比例显著增加,CD4+ T细胞和Treg细胞比例显著降低（P<0.05）,CD8+ T细胞比例显著升高（P<0.05）;NK细胞表面活化受体NKp30\[（ 92.38±7.19）% vs（32.14±17.64）%,P<0.05\]、NKp44\[（74.26±16.28）% vs（1.94±1.60）%,P＜0.05\]、NKG2D \[（ 98.58±128）% vs（6650±24.84）%,P<0.05\] 的表达率均显著升高,CD16表达率显著降低\[（ 85.12±7.66）% vs（95.60±253）%,P<0.05\]; NKT细胞、T细胞表面活化受体DNAM-1和NKG2D明显升高（P<0.05）。总扩增产物、NK细胞和NKT细胞对HLA不匹配的靶肿瘤细胞的杀伤率均显著高于HLA匹配靶细胞系的杀伤（P<0.05）;在共孵育至84 min时,与HLA匹配的靶肿瘤细胞系相比,总扩增产物细胞与HLA不匹配的靶细胞系黏附结合数目显著增多\[（ 4.80±0.53） vs （2.25±035）个,P<0.05\]。结论：IL-2+IL-15组合方案在扩增NK细胞的同时,也能够有效扩增NKT细胞,即可以扩增CD56+细胞群。并且,扩增产物主要以不受HLA限制的NK细胞杀伤活性为主来杀伤肿瘤细胞。     

四种NK细胞体外扩增方案的比较

目的： 通过对4种NK细胞体外培养方案扩增后产物的细胞免疫表型、扩增倍数以及杀伤活性进行比较,确定一种高效的NK细胞体外扩增方案。 方法: 建立4种NK细胞体外培养方案：方案1为经典的NK细胞体外扩增方案(IL-2+IL-15);方案2为IL-2+IL-15+IL-18;方案3为IL-2+IL-15+IL-7;方案4为新型NK培养基（IL-2+OKT3）。收集天津医科大学附属肿瘤医院生物治疗科2012年2月至2012年4月间10例晚期实体瘤患者的PBMC,按照4种方案进行体外扩增。在体外扩增的0、5、10、15 d,采用流式细胞仪检测各淋巴细胞亚群（尤其是NK细胞）的比例;比较各方案体外扩增15 d后的NK细胞的扩增倍数、淋巴细胞亚群比例变化,并采用LDH法检测各方案扩增产物对人白血病K562细胞的杀伤活性。结果： 上述4种NK细胞培养方案体外扩增15 d后,细胞总数分别扩增（40.1±20.00）、（44.08±22.09）、（44.82±23.67）、（46.82±2502）倍,其中NK细胞的扩增倍数分别为（75.86±28.57）、（93.32±32.16）、（88.66±24.94）,（58.88±41.53）倍。NK细胞比例由0 d的（20.44±2.23）%分别扩增至15 d的（48.30±13.90）%、（54.72±12.25）%、（55.94±12.70）%和(54.5±14.93)%;各培养方案组在总细胞扩增倍数、NK细胞扩增倍数上的差异均无统计学意义（P>0.05）。前3种培养方案体外扩增产物的杀伤活性明显高于方案4\[（63.40±500）%、（77.30±9.40）%、（62.17±5.60）% vs （37.39±10.42）%,均P<005\],而方案1、2、3之间体外扩增产物杀伤活性的差异则无统计学意义（P>0.05）。 结论： 细胞因子组合对于体外大规模培养NK细胞有着一定的优势,但不同的细胞因子组合（方案1中是否加入IL-18或IL-7）对NK细胞体外大规模扩增的影响差异并不显著;但前3个方案扩增产物对K562细胞的杀伤活性明显强于方案4。     

多重巢式聚合酶链反应在疟疾混合感染检测与分型中的应用

目的:应用能够同时检测恶性疟(P.falciparum)、间日疟(P.vivax)、卵形疟(P.ovale)、三日疟(P.malarie)及其混合感染的多重巢式PCR方法,对疑似疟疾混合感染样本进行检测,评价其在疟原虫混合感染及分型中的应用价值,旨在为疟疾流行病学调查、疟疾混合感染的确诊提供一种快速高效、特异性强、灵敏度高的实验室诊断方法,为传统的镜检法提供有效的补充。方法:根据恶性疟原虫、间日疟原虫、卵形疟原虫和三日疟原虫的18SSU rRNA基因序列设计5对引物(1对通用引物、4对特异性引物),以等比例混合的4种疟原虫核酸为模板,建立疟疾多重巢式PCR检测方法,并应用该法对28份疑似疟疾混合感染样本进行检测及测序验证,将其结果与镜检法比较。结果:28份疑似混合感染样本中混合感染样品数为6例,其中恶性疟和间日疟混合感染样品5例,恶性疟和卵形疟混合感染样品1例。结论:本研究建立的多重巢式PCR检测方法能够同时用于恶性疟、间日疟、卵形疟、三日疟及其混合感染样本的检测,在疟疾混合感染的确诊与分型上较镜检法有明显的优势和更高的应用价值。     

移动医疗干预对出院后膝骨关节炎患者疾病症状影响的Meta分析

目的:评价移动医疗干预应用于出院后膝骨关节炎(KOA)患者症状管理的短期及长期效果,为KOA患者移动医疗(M-health)干预提供参考。方法:计算机检索中英文数据库关于M-health干预出院后KOA患者的随机对照试验,以关节疼痛、关节僵硬、身体活动功能为结局指标,根据Cochrane手册5.1.0对纳入的文献进行质量评价,采用Review manager 5.4软件进行Meta分析。结果:最终纳入17篇文献,共1989例患者。M-health干预后6个月内,干预组较对照组能更好地改善出院后KOA患者的关节疼痛(SMD=-1.10,95%CI:-1.75～-0.46,P<0.001)、关节僵硬(SMD=-0.71,95%CI:-1.36～-0.07,P=0.030),但对改善出院后KOA患者身体活动功能的影响与对照组相比,差异无统计学意义(SMD=-0.43,95%CI:-1.13～0.26,P=0.220)。M-health干预后≥6个月时,干预组较对照组能更好地改善出院后KOA患者的关节疼痛(SMD=-0.42,95%CI:-0.55～-0.29,P<0.001)、关...     

门诊输液中防止过敏反应发生的注意事项

输液是最常见的、最基本的医疗技术。但医疗服务的高风险胜也是现实存在的问题。输液的安全性，尤其是防止输液过敏现象的发生是医护人员最为关心的问题。药物的过敏反应是指机体与某些药物接触后所产生的一种不良反应，它与抗原抗体作用有关，是免疫反应的一种表现，且只针对具有特异体质的患者。