高糖和茶多酚对人脐静脉内皮细胞谷胱甘肽S转移酶、髓过氧化物酶活性及基质金属蛋白酶诱导因子表达的影响

目的 探讨高糖对内皮细胞产生活性氧和基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)的影响及茶多酚(TPs)的干预作用.方法 培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分为正常对照组、高糖组、TPs对照组和TPs干预组.培养0、6、12、24 h后,用分光光度比色法测定细胞上清液髓过氧化物酶(MPO)、谷胱甘肽S转移酶(GSH-ST)含量,用免疫细胞化学法测定细胞内EMMPRIN的变化.结果 高糖导致内皮细胞GSH-ST活性下降和MPO含量升高,下调EMMPRIN表达,其变化随时间延长更为明显.TPs干预可拮抗高糖时内皮细胞的上述改变.结论 高糖能引起内皮细胞的氧化应激,影响细胞外基质降解,TPs可以抑制这种作用.     

HSVtk/GCV自杀基因系统治疗小鼠腹水瘤的研究

目的:研究HSVtk/GCV系统对腹水瘤的治疗作用.方法:采用XTT、动物实验、透射电镜和流式细胞仪等方法.结果:HSVtk( )的P388tk细胞对GCV的敏感性约为其亲本P388细胞的37倍,且对其邻近的HSVtk(-)的P388细胞或S细胞具有旁观者效应,当P388tk细胞与P388细胞或S细胞混合培养,5μg/ml GCV处理后,P388tk细胞占混合细胞的10%,就可杀伤50%的混合细胞.动物实验中P388tk细胞或P388tk与P388细胞等量混合所致的荷瘤鼠在以CCV治疗后与对照组相比,肿瘤生长受到明显抑制,小鼠生存期明显延长;细胞死亡的机制与凋亡有关.结论:在体内和体外水平,HSVtk( )的P388tk细胞能被GCV有效杀伤,且对其邻近的HSVtk(-)的细胞产生旁观者效应.     

TRDMT1蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义#br#

目的探讨tRNA天冬氨酸甲基转移酶1（TRDMT1）蛋白在胃癌组织中表达情况,并分析其表达与临床病理特征和预后的关系。 方法收集东南大学医学院附属江阴医院2012年1月至2013年12月手术切除的胃癌组织标本90例及对应癌旁组织35例,采用免疫组化SP法分别检测上述组织中TRDMT1蛋白的表达,同时分析其表达与临床病理特征和总生存期（OS）的关系。 结果TRDMT1在胃癌组织中的阳性表达率为556％（50／90）,高于癌旁组织中的114％（4／35）,差异有统计学意义（P＜005）。TRDMT1表达与年龄和性别无关（P＞005）,与肿瘤大小、分化程度、侵犯深度、淋巴结转移和TNM分期有关（P＜005）。TRDMT1阳性表达者的中位OS为330个月,显著低于TRDMT1阴性表达者的420个月（P＜005）。Cox多因素分析显示,肿瘤大小、分化程度、侵犯深度、淋巴结转移、TNM分期和TRDMT1表达均为影响胃癌患者OS的独立因素。 结论TRDMT1在胃癌中表达升高,其可能在胃癌的发生、发展中起促进作用且对预测胃癌患者的预后具有一定意义。     

结肠癌细胞上调脐静脉内皮细胞EMMPRIN的表达

目的：探讨结肠癌细胞对脐静脉内皮细胞中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）表达的影响,以及EMM-PRIN与肿瘤新生血管生成的关系.方法：建立结肠癌LoVo细胞与人脐静脉内皮细胞（HUVEC）共培养模型,并设HUVEC单独培养对照组,培养36 h后进行形态学观察,并应用免疫细胞化学方法检测内皮细胞EMMPRIN的表达.结果：共培养组HUVEC形成大量管样结构,且EMMPRIN的表达明显强于HUVEC单独培养对照组强.结论：结肠癌细胞上调HUVEC EMMPRIN的表达,并诱导HUVEC管样结构的的形成,EMMPRIN的表达可能与肿瘤新生血管生成具有一定的相关性.     

HDVtk／GCV自杀基因系统治疗小鼠腹水瘤的研究

目的：研究ＨＳＶｔｋ／ＧＣＶ系统对腹水瘤的治疗作用。方法：采用ＸＴＴ、动物实验、透射电镜和流式细胞仪等方法。结果：ＨＳＶｔｋ（＋）的Ｐ３８８ｔｋ细胞对ＧＣＶ的敏感性约为其亲本Ｐ３８８细胞的３７倍,且对其邻近的ＨＳＶｔｋ（－）的Ｐ３８８细胞或Ｓ细胞具有旁观者效应,当Ｐ３８８ｔｋ细胞与Ｐ３８８细胞或Ｓ细胞混合培养,５／μｇ／ｍｌ ＧＣＶ处理后,Ｐ３８８ｔｋ细胞占混合细胞的１０％,就可杀伤５０％的混合细     

HSVtk/GCV自杀基因系统治疗小鼠实体瘤的实验研究

目的：研究单纯疱疹病毒胸苷激酶基因联合丙氧鸟苷（ Ｈ Ｓ Ｖｔｋ／ Ｇ Ｃ Ｖ） 系统对实体瘤的治疗作用。方法：以感染法建立携带 Ｈ Ｓ Ｖｔｋ 基因的 Ｐ３８８ｔｋ 细胞,用 Ｘ Ｔ Ｔ、动物实验、透射电镜和流式细胞仪（ Ｆ Ｃ Ｍ） 方法研究 Ｇ Ｃ Ｖ 对 Ｐ３８８ｔｋ 细胞的杀伤作用及其机制。结果： Ｐ３８８ｔｋ 细胞对 Ｇ Ｃ Ｖ 的敏感性明显增强,约为其亲本 Ｐ３８８ 细胞的３７ 倍,且当 Ｐ３８８ｔｋ 细胞与 Ｐ３８８ 细胞或 Ｓ 细胞混合培养经５ μｇ·ｍｌ－ １ Ｇ Ｃ Ｖ 处理后, Ｐ３８８ｔｋ 细胞占总细胞的１０ ％ ,可杀伤５０ ％ 的混合细胞。动物实验中, Ｐ３８８ｔｋ 细胞或 Ｐ３８８ｔｋ 细胞与 Ｐ３８８ 细胞等量混合所致的荷瘤鼠在以 Ｇ Ｃ Ｖ 治疗后与对照组相比,肿瘤生长受到明显抑制,小鼠生存期明显延长;细胞死亡的机制可能与凋亡有关。结论： Ｈ Ｓ Ｖｔｋ（ ＋ ） 的 Ｐ３８８ｔｋ 细胞能被 Ｇ Ｃ Ｖ 有效杀伤,且对其邻近的 Ｈ Ｓ Ｖｔｋ（ － ） 的细胞产生旁观者效应。     

线粒体和凋亡

凋亡是精确调节细胞数量 ,清除无用的或有害的细胞过程。本文阐述了凋亡有关的线粒体 (Mt)特征性变化 :如膜电位的降低 ;膜通透性的转变 ;细胞色素 C、AIF的释放 ;ROS产物的增加以及 dcl- 2家族的影响等等 ,说明 Mt与凋亡的发生密切相关     

低能脉冲超声波对巨噬细胞生物学行为的影响

目的：探讨低能脉冲超声波（LIPUS）对巨噬细胞生物学行为的影响，为LIPUS的临床应用提供理论依据。方法：以Ficoll—paque密度梯度离心法分离人白细胞血（buffy coat）。获得单个核细胞，培养后再通过黏附法获得巨噬细胞；蛋白芯片分析分泌蛋白的表达，酶谱学检测基质金属蛋白酶（MMP）的分泌；利用荧光标记的大肠杆菌分析细胞吞噬能力；荧光染色法检测基质金属蛋白酶诱导剂（CD147）的表达；Western blot检测信号蛋白的表达。结果：LIPUS加速巨噬细胞对大肠杆菌的吞噬，促进细胞分泌MMP和表达CD147，增加细胞的磷酸化程度和Src、ERK的活化。结论：LIPUS可能通过Src、ERK的活化调控巨噬细胞的吞噬及分泌功能。     

HSV-TK/GCV系统治疗小鼠乳腺癌的实验研究

我们从体内外两方面研究单纯疱疹病毒胸苷激酶基因联合前药ＧＣＶ系统（ＨＳＶＴＫ／ＧＣＶ）对小鼠乳腺癌的作用,并初步探讨引起细胞死亡的机理。一、材料与方法１－细胞培养和实验动物：小鼠乳腺癌细胞系４Ｔ１（密执安州大学Ｄｒ．Ｍｉｌｌｅｒ惠赠）,常规培养在Ｄｕｌｂａｃｃｏ’ｓＭｏｄｉｆｉｅｄＥａｇｌｅ（ＤＭＥ,美国Ｂｉｏｆｌｕｉｄ公司）培养液内,添加１０％胎牛血清,青、链霉素,谷胺酰胺（Ｂｉｏｆｌｕｉｄ公司）。６～８周雌性Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠用于实验。２－逆病毒载体及基因转导：ＳＴＫ逆病毒载体来自ＬＮＬ６载…