人原发性肝癌基因的实验研究───肿瘤坏死因子基因的初步应用

将含人肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）ｃＤＮＡ的不同逆转录病毒载体（ＬＮＳ－ｔｎｆα、Ｌ－ｔｎｆαＳＮ及ＬＮＣ－ｔｎｆα）和质粒型真核细胞载体（ｐＳＶＫ３－ｔｎｆα），分别用磷酸钙法导入肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１中，观察ＴＮＦ的表达水平。结果：重组质粒型表达载体ｐＳＶＫ３－ｔｎｆα表达好，２４小时开始分泌ＴＮＦα（５０Ｕ／ｍｌ），４８～７２小时达最高值（９０Ｕ／ｍｌ），９６小时后下降（４０Ｕ／ｍｌ）。将ｐＳＶＫ３－ｔｎｆα重组ＤＮＡ用磷酸钙包裹后直接进行瘤内注射，发现裸鼠外周血ＴＮＦα水平有一过性增高，３周后测量瘤体大小，发现实验组的肿瘤体积明显小于对照组（２．５±１．６ｃｍ比３．２±１．８ｃｍ，ｎ＝６，Ｐ＜０．０５），实验组荷瘤裸鼠的生存时间亦明显延长（４４．０±３．３ｄ比２８．２±２．０ｄ，ｎ＝６，Ｐ＜０．０１）。结果表明，应用ＴＮＦα基因转移进行肝癌的基因治疗是一条值得探索的途径。     

人TNFα基因转染的人肝癌细胞稳定高表达克隆SMMC7721-TNF体外抗瘤活性及其可能机制的初步研究

应用逆转录病毒载体介导人TNFα基因感染人肝癌细胞株SMMC7721，经G418筛选获得一稳定高表达SMMC7721-TNF，观察SMMC7721-TNF细胞及其培养液上清对SMMC7721和BEL7404肝癌细胞的抗瘤效应，结果表明SMMC7721-TNFα细胞本身对两种细胞均无明显的杀伤作用，但其培养液上清对这两种细胞均具有明显的抑制作用，     

两种血液保存箱的比较

目的 通过临床验证评价血液保存箱在临床使用过程中的安全性和有效性.方法 利用6探头的自动温控系统测试血液保存箱的降温速度、24h温度波动值、均匀性、稳定性、超温和断电报警等.制备悬浮红细胞,随机分配到两血液保存箱中.在6个时间点检测并比较两保存箱内悬浮红细胞的游离血红蛋白浓度.结果 两保存箱报警功能正常;在空负载和满负载时,两血液保存箱间温度波动差异不显著(P＞0.05),血液保存箱内部温度波动差异不显著;两保存箱内悬浮红细胞的游离血红蛋白浓度在同一时间点差异不显著,且浓度＜0.72g/L.结论 两血液保存箱的性能良好,保存的血液在有效保存期内质量可靠.     

α肿瘤坏死因子（TNFα）基因的分离鉴定及在人肝癌细胞中…

应用不连续密度梯度法分离获得人肝癌浸润性单个核细胞（ＴＩＭ），ＲＮＡ斑点杂交提示ＴＩＭ中有明显的ＴＮＦαｍＲＮＡ转录。经ＲＴ－ＰＣＲ扩增反应分离得到一特异的７００ｂｐ左右的ＤＮＡ片段，ＤＮＡ序列分析证实这一ＤＮＡ片段中包含编码人ＴＮＦα成熟肽所需的全部ｃＤＮＡ序列。将这一人ＴＮＦαｃＤＮＡ克隆到真核细胞表达质粒ｐＳＶＫ３，获得真核细胞表达重组质粒ｐＳＶＫ３－ｔｎｆ，用磷酸钙沉淀法将ｐＳＶＫ３－ｔｎ     

肿瘤的生物学疗法

肿瘤生物疗法是伴随现代分子生物学、免疫生物学和肿瘤免疫学的飞速发展而兴起的新型肿瘤疗法,与手术、放疗、化疗并称为肿瘤的四大疗法,初步的临床应用表明,该疗法具有广阔的前景。本文就该疗法的原理、分类及初步临床应用作一简要叙述。     

肝脏炎性假瘤10例报告

肝脏炎性假瘤是一种少见的极易误诊为肝癌的肝脏良性疾病。近年虽屡见报道,但对其病因、诊断及处理,各家意见不一。我院曾收治10例,现报告如下。     

小鼠肝癌浸润性淋巴细胞的分离和培养

作者对小鼠肝癌肿瘤浸润性淋巴细胞(Tumor-infiltratjng lymphocyte,TIL)的分离和培养进行了初步研究。结果表明:运用酶消化加Ficoll或Percoll不连续密度离心法均能有效地获得TIL,两者相比,后者分得的TIL纯度更高(P<0.01)。TIL在含2000u/ml重组白细胞介素2(recombinant IL-2,rIL-2)RPMI 1640培养基中被激活,5～7 d后开始扩增,呈集落样生长,同时肿瘤细胞逐渐减少,至14d左右基本消失。培养40d时TIL扩增到原来的10~5倍,致分裂素PHA刺激的脾细胞上清液或LAK细胞上清液(称条件培养基)可促进TIL的扩增。     

人原发性肝癌基因治疗的实验研究：肿瘤坏死因子基因的初步应用

将含人肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）ｃＤＮＡ的不同逆转录病毒载体（ＬＮＳ－ｔｎｆα、Ｌ－ｔｎｆαＳＮ及ＬＮＣ－ｔｎｆα）和质粒型真核细胞载体（ｐＳＶＫ３－ｔｎｆα），分别用磷酸钙法导入肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１中，观察ＴＮＦ的表达水平。结果：重组质粒型表达载体ｐＳＶＫ３－ｔｎｆα表达好，２４小时开始分泌ＴＮＦα（５０Ｕ／ｍｌ），４８￣７２小时达最高值（９０Ｕ／ｍｌ），９６小时后下降（４０Ｕ／ｍｌ）。将ｐ     

人肝癌浸润性单核细胞初步观察及其与预后等因素的关系

观测经ＨＥ染色的４８例肝细胞性肝癌手术标本石蜡切片中肿瘤浸润性单核细胞的浸润程度，分析了它与预后等因素的关系。结果显示：肿瘤浸润性单核细胞的数量与患者的性别、外周血甲胎蛋白（ＡＦＰ）的水平等无关（Ｐ＞０．０５５）；与患者年龄、ＨＢＶ感染状态、包膜的完整性、肿瘤大小以及肿瘤的坏死程度等有关（Ｐ＜０．０５）；与患者的预后高度相关（Ｐ＜０．０１）。此外，经用肝动脉结扎加插管合并其他疗法（如导向治疗、免疫治疗等）后再手术切除的标本中肿瘤浸润性单核细胞明显多于未经特殊治疗而直接手术者（Ｐ＜０．０１）。上述资料表明：肿瘤浸润性单核细胞的多少受多种因素的影响，综合分析可为患者的预后等提供有用的信息